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一种检测马传染性贫血病毒的试剂盒及其应用: 本发明涉及基因工程技术领域，尤其涉及一种检测马传染性贫血病毒的试剂盒及其应用。本发明基于马传染性贫血病毒的P26蛋白和gp45蛋白的抗原表位和结构特点，以及大肠杆菌的密码子偏好对马传染性贫血病毒的P26蛋白和gp45蛋白...; 王新杰孙晓明白雪冬李润年

一种检测马传染性贫血病毒的试剂盒及其应用: 本发明涉及基因工程技术领域，尤其涉及一种检测马传染性贫血病毒的试剂盒及其应用。本发明基于马传染性贫血病毒的P26蛋白和gp45蛋白的抗原表位和结构特点，以及大肠杆菌的密码子偏好对马传染性贫血病毒的P26蛋白和gp45蛋白...; 王新杰孙晓明白雪冬李润年

基于单个B淋巴细胞扩增技术筛选马传染性贫血病毒的囊膜蛋白单克隆抗体: 2022年; 马传染性贫血病毒(EIAV)囊膜蛋白(Env)是参与病毒感染过程中的关键蛋白,由表面蛋白(Gp90)及跨膜蛋白(Gp45)组成,Env蛋白在介导病毒粘附、细胞间融合、疾病传播等方面发挥重要作用。为了通过单个B淋巴细胞扩增技术获得Env特异性单克隆抗体(MAb),本研究利用密码子优化后的Gp90基因构建了重组质粒pcDNA3.1-s-gp90-His,按常规方法将该重组质粒免疫小鼠6次后分离脾细胞,利用荧光激活细胞分选(FACS)技术分离免疫小鼠脾细胞中可识别Gp90的单个B淋巴细胞,结果显示,本研究从2×10^(8)个小鼠脾细胞中获得890个识别Gp90的单个B淋巴细胞。通过特异性引物以单个B淋巴细胞的基因组cDNA为模板扩增抗体重链(Ig VH)和轻链(Ig VL)的可变区基因,利用重叠延伸PCR方法分别将重链(Ig VH)和轻链(Ig VL)可变区基因克隆至pcDNA3.1中,测序鉴定结果显示分别正确构建了27对匹配的pcDNA3.1-VH和pcDNA3.1-VL表达质粒,将这27对匹配的表达质粒分别按照pcDNA3.1-VH:pcDNA3.1-VL=1:1的比例共转染至HEK293F细胞,收获细胞上清,经Protein A纯化获得Gp90 MAb。通过ELISA和western blot两种方法对纯化的Gp90 MAb进行鉴定,结果显示获得了27株可匹配的抗体基因对,经表达后有4株MAb可与Gp90蛋白结合,且可以识别Gp90蛋白的天然构象。本研究首次采用单个B淋巴细胞扩增技术对Gp90 MAb进行了筛选,获得的Gp90 MAb为Env蛋白检测方法的研究提供了物质基础,同时为深入研究Env蛋白的功能奠定了基础。; 张佳琦王亚玉郭兴林跃智廖化新王晓钧; 关键词：马传染性贫血病毒囊膜蛋白单克隆抗体

马传染性贫血病毒感染靶细胞后差异表达microRNA的研究: 为研究EIAV感染靶细胞马单核巨噬细胞（Equine monocyte-derived macrophages,eMDM）后细胞内microRNA（miRNA）表达的变化,本研究采用EIAV（Equine Infecti...; 韩亚儒; 关键词：马传染性贫血病毒荧光定量PCR CD69

感染马传染性贫血病毒的巨噬细胞差异表达microRNA分析被引量：1: 2018年; 为研究马传染性贫血病毒(EIAV)感染靶细胞-马单核巨噬细胞(eMDM)后细胞内microRNA (miRNA)表达的变化,本研究采用EIAV强毒株EIAVDLV34感染eMDM,并以未感染组作为对照,提取细胞内总RNA,通过高通量测序分析细胞内miRNA表达谱的变化。结果显示,与对照相比,感染EIAVDLV34后eMDM有16个miRNA发生差异表达,其中8个miRNA上调表达,8个miRNA下调表达,通过荧光定量PCR技术对这16个miRNA的表达进行了验证,结果与高通量测序一致,最后利用生物信息学方法对这16个miRNA的靶基因及其参与的生物学过程进行了分析,显示靶基因主要参与转录调控、信号转导、细胞凋亡等生物学过程。本研究为进一步分析EIAV与其宿主相互作用、致病机制以及慢病毒相关疾病的预防提供了参考依据。; 韩亚儒杜承王晓钧; 关键词：马传染性贫血病毒 MICRORNA 生物信息学

马天然免疫限制因子tetherin对马传染性贫血病毒的限制作用及病毒拮抗机制研究: 马传染性贫血病毒（equine infectious anemia virus，EIAV）是巨噬细胞嗜性的慢病毒。EIAV与其它慢病毒成员的基因组结构、生命周期及抗原漂移规律等相似，但EIAV基因组最小，同时遗传物质也最...; 尹鑫; 关键词：马传染性贫血病毒抗病毒活性拮抗作用

干扰素应答分子Tetherin对抗马传染性贫血病毒的作用机制研究: Tetherin，又称为CD317，BST-2或HM1.24，是一种宿主细胞的天然免疫因子，它最早被发现可以阻止HIV-1Vpu缺失型病毒从细胞膜上释放。而HIV-1能通过自身编码的相应蛋白Vpu来对抗tetherin的...; 吴星亮; 关键词：TETHERIN 马传染性贫血病毒

感染马传染性贫血病毒的巨噬细胞差异表达蛋白质组分析: 刘海芳

感染马传染性贫血病毒的巨噬细胞差异表达蛋白质组分析: 2012年; 为研究马传染性贫血病毒(EIAV)感染其主要靶细胞马巨噬细胞(eMDM)后与细胞蛋白的相互作用,本研究采用EIAV强毒株EIAVDLV34感染48 h后的马外周血单核细胞分化的eMDM,并以未感染eMDM为对照,提取细胞的蛋白质样品,进行双向凝胶电泳(2-DE)分离,并分析凝胶中差异蛋白点。结果共检测出19个表达差异的蛋白点(ratio>1.4,p<0.05),其中感染组相对于对照组有7个蛋白质上调表达,12个蛋白质呈现下调表达。将差异蛋白进行串联质谱分析进行鉴定,并通过生物信息学方法对这19个差异表达蛋白进行了蛋白互作用分析。此外,对其中5个比较重要蛋白的mRNA水平进行了荧光定量PCR分析,其表达变化与2-DE结果一致。本研究为进一步分析EIAV与其宿主细胞eMDM的相互作用提供了参考。; 刘海芳杜承林跃智王雪峰周建华; 关键词：马传染性贫血病毒差异蛋白双向电泳生物信息学

单一受体的慢病毒——马传染性贫血病毒感染靶细胞的分子基础研究: 马慢病毒受体1(Equine Lentivirus Receptor-1，ELR1)是Zhang等在2005年通过克隆表达技术发现的马传染性贫血病毒(Equine Infectious Anemia Virus，EIAV...; 郝飞飞; 关键词：慢病毒马传染性贫血病毒细胞受体凝胶过滤层析

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