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过表达Tgm2基因的重组载体、重组CHO细胞及其在提高外源蛋白表达中的应用: 本发明提供了过表达Tgm2基因的重组载体、重组CHO细胞及其在提高外源重组蛋白表达中的应用，属于基因工程技术领域，本发明创造性发现编码转谷氨酰胺酶2的基因Tgm2具有提高哺乳动物细胞中外源重组蛋白表达水平的作用，本发明将...; 贾岩龙张慧婕王冲王稳王天云华子春林艳赵琦

液质联用鉴定重组CHO细胞株目的蛋白的表达研究: 2025年; 目的:采用高分辨四极杆-飞行时间液质联用(LC-Q TOF MS)技术,探索重组中国仓鼠卵巢(CHO)细胞株目的蛋白的表达鉴定方法。方法:选择1株表达抗体的重组CHO细胞株,将该细胞悬液12500 r·min^(-1)离心10 min,取上清液,使用碳酸氢铵溶液(50 mmol·L^(-1))置换液体,加入胰凝乳蛋白酶(chymotrypsin)进行酶切,采用Advance Bio Peptide(100 mm×2.1 mm,2.7μm)色谱柱,通过Sciex TRIPLE TOF 5600+与Agilent Q TOF G65452台液质联用仪进行对比分析。根据保密要求和氨基酸覆盖率选择合适的特征肽段,并将该抗体目的蛋白重链与轻链的特征肽氨基酸序列分别输入SCIEX BioPharmaView Version 3.0与Agilent MassHunter BioConfirm 12.0软件中,建立数据库,对样品中实际检测得到的肽段进行搜库检索,验证并鉴定出目的蛋白特征肽。结果:样品通过Sciex TRIPLE TOF 5600+仪器分析得到8条特征肽段,氨基酸覆盖率为100%;样品通过Agilent Q TOF G6545仪器分析得到12条特征肽段,氨基酸覆盖率为100%。结论:本研究建立的方法操作简单,覆盖率高,稳定性好,可用于该抗体重组CHO细胞株目的蛋白的表达鉴定,也可为同类细胞株其他蛋白的表达鉴定提供参考。; 康赵飞王可心韩春乐庞琳饶春明; 关键词：重组蛋白液质联用氨基酸序列胰凝乳蛋白酶胰蛋白酶

一种表达猪PRV gDFc或gBFc融合蛋白的重组CHO细胞系及其构建方法和应用: 本发明提供了一种表达猪伪狂犬病病毒gDFc或gBFc融合蛋白的重组CHO细胞系及其构建方法和应用，属于疫苗技术领域。本发明提供的重组CHO细胞系表达PRVgDFc或gBFc用于制备亚单位疫苗，免疫小鼠后能够产生较强的针对...; 钱平任旭皎李祥敏荣振香

一种重组CHO细胞发酵培养生产重组EGFR抗体活性分子的方法: 本发明提供了一种重组CHO细胞发酵培养生产重组EGFR抗体活性分子的方法。所述方法包括下述步骤：(1)接种培养：将用于生产重组EGFR抗体活性分子的CHO细胞株种子液接种于第一培养基中，得初始发酵液，并发酵培养；(2)补...; 彭红卫周小辛

高密度灌注培养重组CHO细胞生产人促卵泡激素的方法、培养基及其应用: 本发明公开了一种高密度培养重组CHO细胞生产人促卵泡激素的方法、培养基及其应用，属于生物制药领域，制备方法包括：将CHO细胞复苏后，使用基础培养基进行细胞密度扩增；当活细胞密度达到一定密度后，使用生产培养基进行灌注培养：...; 王延涛惠觅宙李国军赵喜红

2型糖尿病患者接种重组CHO细胞乙型肝炎疫苗的免疫原性观察: 2023年; 目的探讨2型糖尿病(Diabetes mellitus,DM)患者接种重组CHO细胞乙型肝炎(乙肝)疫苗(Hepatitis B vaccine,HepB)的免疫原性。方法在泰州市12个社区卫生服务中心招募乙肝五项血清标志物均阴性且无HepB接种史的2型DM患者(DM组)以及健康人群(对照组),按照0-1-6月免疫程序接种20μg重组CHO细胞HepB,采用电化学发光法定量检测免疫后4-6周乙肝表面抗体(Hepatitis B surface antibody,HBsAb),分析抗体阳转率和中位数浓度(Median concentration,MC)。结果 DM组、对照组分别纳入受试者224例、227例,两组受试者HepB全程免疫后HBsAb阳转率分别为91.96%、97.80%(χ~2=7.93,P=0.005),MC分别为539.70 mIU/mL、1 000 mIU/mL(Z=4.78,P<0.001)。结论 2型DM患者接种重组CHO细胞HepB后具有较好的免疫原性,但弱于健康人群。; 朱中奎申璐唐万琴刘华先于扬肖辉顾维邓方斌王锦涛汤奋扬解燕; 关键词：乙型肝炎表面抗体免疫原性 2型糖尿病

重组酶介导的定点整合及在构建重组CHO细胞中的应用: 2022年; 中国仓鼠卵巢细胞(Chinese hamster ovary cells,CHO)是生产治疗性重组蛋白最常用的细胞。随机整合(random integration,RI)工艺是目前构建重组CHO细胞株的主要策略,由于CHO细胞基因组缺乏稳定性,为得到产量高、品质好且适应特定工艺的细胞株,通常需要1~2轮高通量筛选,不仅工作量大、耗时长且批次稳定性差。定点整合(site-specific integration,SSI)基因编辑技术将外源基因整合至细胞基因组的特定位点,经一轮筛选得到稳定、高产且适应特定生产工艺的细胞株,从而缩短细胞株构建周期。近年来,不断有将定点整合策略应用于构建重组CHO细胞株的报道。基因编辑技术的发展是实现细胞外源基因定点整合工艺的基础,常用的基因编辑技术包括核酸酶技术、转座子技术和重组酶技术。比较这三种基因编辑技术在构建流程、整合效率和专利等方面的不同特点,重点讨论重组酶介导的定点整合及其在CHO细胞株构建中的应用。; 孙瑾瑜刘光李晨王颖刘国庆; 关键词：重组酶 CHO

一种表达鸡VP2和鸡GAL-1融合蛋白的重组CHO细胞株及其构建方法和应用: 本发明涉及一种表达鸡VP2和鸡GAL‑1融合蛋白的重组CHO细胞株及其构建方法和应用。本发明通过电转含有VP2‑GAL1序列的真核表达载体，经过单克隆细胞筛选，获得表达鸡传染性法氏囊病毒VP2‑GAL1融合蛋白的重组细胞...; 刘喜凤周佳彬曹玉飞杨闯刘燕郑杰马宁宁

超声截留灌流培养重组CHO细胞工艺优化: 2022年; 目的采用超声截留控制器超声使得细胞聚集、沉降的方法截留悬浮细胞,优化重组CHO细胞灌流培养工艺。方法基于无血清化学限定(CD)培养基,选择表达水痘-带状疱疹病毒(varicella-zoster virus,VZV)糖蛋白E(VZV gE)的重组CHO细胞在5 L生物反应器中灌流培养。对初步确定的培养条件进行响应面分析,优化培养温度、培养基pH、灌流速度;并采用上述优化条件验证超声截留控制器灌流培养重组CHO细胞工艺。结果本实验条件下,优化后的灌流培养条件为:温度33.2℃、pH 7.0、灌流速度4.1 mL/min。3批验证结果显示,相较批培养,灌流培养时间延长5~7 d,收获体积增加5~7倍。其中,葡萄糖和乳酸含量、细胞密度和活性批间变化趋势一致;细胞截留效率均高于90%,批间差异无统计学意义(P>0.05);目的蛋白比活性约为0.5,批间差异无统计学意义(P>0.05);Western blot结果显示,相对分子质量和糖基化修饰与批培养一致。结论实现了5 L生物反应器灌流培养重组CHO细胞表达gE蛋白工艺,为后续大规模生产提供了依据。; 庄宗兰程杰彭杰周云祁碧玉杨文静杨世龙谭小东; 关键词：重组CHO细胞生物反应器

一种稳定表达GPC3的重组CHO细胞株及其应用: 一种稳定表达GPC3的重组CHO细胞株及其应用，CHO细胞株保藏编号为：CGMCC No.18881；所述GPC3由如SEQ ID No.1所示的cDNA序列编码；重组CHO细胞株生产的抗原用于制备GPC3单克隆抗体，重...; 李伟赵叔杰

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