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一种促进干细胞造血分化的方法及其应用
本发明提供了一种促进干细胞造血分化的方法及其应用,所述方法包括:依次采用含有组蛋白去乙酰化酶抑制剂的培养基对干细胞进行造血分化培养;所述含有组蛋白去乙酰化酶抑制剂的培养基包括培养基I、培养基II和培养基III;其中,所述...
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一种无滋养层的体外诱导人类多潜能干细胞向造血分化的方法
本发明公开了一种无滋养层的体外诱导人类多潜能干细胞向造血分化的方法,属于生物技术领域。本发明首先培养人类多潜能干细胞,消化细胞后加入胚状体形成培养基制备细胞悬液,接种到倒金字塔形凹槽的琼脂糖模板上,培养至形成胚状体,然后...
王鹏元陈波
脂质在促进造血分化中的应用
本发明属于干细胞造血分化领域,公开了脂质在促进造血分化中的应用,以及促进人多能干细胞造血分化的培养基和促进人多能干细胞造血分化的方法。在人多能干细胞造血分化的单层分化培养体系中<I>,</I>添加脂质可有效促进人多能干细...
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绘制人类造血分化中DNA甲基化不一致性的动态变化
覃小桓
GATA1s敲除hPSCs模型构建与造血分化影响初探
目的建立并验证GATA1s及GATA1敲除人多能干细胞(human pluripotent stem cells,hPSCs)模型,并初步探索其在体外诱导造血分化时的生理学功能改变。方法1)载体构建:分别构建含有重组臂-...
李霞
关键词:多能干细胞造血分化
GATA1s敲除hPSCs模型构建与造血分化影响初探
2023年
本文建立了GATA1s敲除人多能干细胞(human pluripotent stem cells,hPSCs)细胞株,并以此为模型探讨了GATA1s缺失对体外诱导造血分化的影响。本文通过构建含有重组臂-敲入片段(GATA1外显子Ⅱ-Ⅵ序列及BGH polyA序列)-LoxP-潮霉素筛选标记-LoxP-重组臂的打靶质粒和含有gRNA-Cas9的gRNA质粒对hPSCs进行基因编辑以敲除GATA1s。通过第一步电穿孔将以上质粒导入细胞,潮霉素初步筛选7 d后的阳性克隆进行下一步电穿孔环化重组酶(Cre)使LoxP位点特异性重组以去除筛选标记,通过单细胞克隆的方式进一步培养,PCR及测序鉴定出正确基因编辑细胞,最后通过蛋白质免疫印迹验证其GATA1与GATA1s蛋白的表达情况,验证敲除GATA1s后的细胞株进行体外诱导造血分化,发现其CD34^(+)、CD43^(+)及CD45^(+)细胞增多,但GPA^(+)、CD41a^(+)及CD42b^(+)细胞显著减少,通过转座子系统过表达GATA1也不能挽救其减少的GPA^(+)、CD41a^(+)及CD42b^(+)细胞。本研究建立了GATA1s敲除hPSCs细胞株,并发现其在造血分化时有重要作用。
李霞李晓红周涯马峰张勇刚
关键词:多能干细胞造血分化
一种促进人多能干细胞造血分化的方法及其培养基
本发明涉及干细胞生物学领域,公开了一种促进人多能干细胞造血分化的方法:人多能干细胞在培养基中进行造血分化,所述培养基的渗透压在200mOSM/L以上。本发明通过提高造血分化的培养基的渗透压,促进hPSCs造血分化获得CD...
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体外诱导小鼠胚内生血内皮细胞向造血分化的不同培养体系的比较研究
2023年
目的:比较二维平铺法和三维悬滴法两种培养体系对小鼠胚胎期生血内皮细胞体外诱导生成造血产物的支持作用。方法:分别利用二维平铺法和三维悬滴法将流式细胞术分选的造血干细胞潜能的生血内皮细胞PK44(CD41-CD43-CD45-CD31^(+)CD201^(+)Kit^(+)CD44^(+))群体与OP9-DL1-GFP基质细胞共孵育6 d后,在显微镜下观察两种培养体系产生造血产物的形态特点;利用流式细胞术分析两种培养体系孵育后的造血产物,并统计分析造血产物的比例和绝对数量;分别对两种培养体系共孵育后的造血产物进行造血细胞集落形成单位培养(colony-forming unit culture,CFU-C)实验,并对不同形态的细胞集落进行计数。结果:(1)利用二维平铺法形成的造血细胞平铺或悬浮于基质细胞上,而利用三维悬滴法共孵育后的产物形成了以基质细胞为中心,造血细胞黏附在周围的细胞聚集体。(2)二维平铺法产生更多CD45^(+)造血细胞;三维悬滴法对造血产物的分化具有谱系偏向性,更有利于肥大细胞的分化。(3)二维平铺法诱导生血内皮的分化产物在体外CFU-C实验中可以产生更多的造血集落。结论:二维平铺法更支持小鼠胚内生血内皮细胞体外诱导产生CD45^(+)的造血细胞以及有集落形成能力的造血干祖细胞。
郭霞丁晓晨兰雨刘兵侯思元
MDS-BM-MSC阻滞HSC造血分化的代谢机制研究
研究背景及目的:骨髓增生异常综合征(Myelodysplastic syndrome,MDS)是一种临床上不易诊断,且高风险向急性髓系白血病(Acute myeloid leukemia,AML)转化的前恶性肿瘤。MDS...
闫雪
关键词:脂代谢
NFIL3基因的靶向K562细胞在红系造血分化中的应用
本发明公开了生物医药技术领域的NFIL3基因的靶向K562细胞在红系造血分化中的应用,所述应用为将NFIL3基因靶向K562细胞应用于红系造血分化中。本发明首次提出了NFIL3基因与K562细胞产生血红蛋白量有显著的关系...
崔蕊于海川 杜晓妍 陈孟姚 白启荣

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毛宁
作品数:227被引量:744H指数:13
供职机构:军事医学科学院基础医学研究所
研究主题:间充质干细胞 MSC 小鼠 骨髓 骨髓间充质干细胞
刘兵
作品数:72被引量:123H指数:6
供职机构:安徽医科大学
研究主题:胚胎干细胞 间充质干细胞 小鼠胚胎 人脐带间充质干细胞 造血
刘加军
作品数:119被引量:378H指数:11
供职机构:中山大学附属第三医院
研究主题:白血病 细胞凋亡 端粒酶 冬凌草甲素 急性白血病
周家喜
作品数:8被引量:18H指数:2
供职机构:北京协和医学院血液病医院
研究主题:人胚胎干细胞 造血分化 基因敲除 MEI S2基因
苏培
作品数:5被引量:13H指数:2
供职机构:北京协和医学院血液病医院
研究主题:人胚胎干细胞 造血分化 基因敲除 MEI S2基因