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一种用于蛋白 免疫印迹法 的自动洗膜装置 蛋白 免疫印迹法 的自动洗膜装置，包括储液单元、分流单元、洗膜单元、放液单元、集液单元和控制单元。其中，储液单元用于储存洗膜液；分流单元设置于储液单元的下游，用于将洗膜液均匀分流；洗膜单元设置于分流单元...用于蛋白 免疫印迹法 的智能洗膜装置 蛋白 免疫印迹法 的智能洗膜装置包括机座、摇摆托盘以及清洗机构，所述摇摆托盘水平定位滑动配合在机座顶部，所述摇摆托盘底部连接有驱动摇摆托盘水平往复移动的摇摆驱动机构，所述清洗机构包括供NC膜放置的清洗盒...不同参数对蛋白 免疫印迹法 结果的影响 被引量：2 2019年 蛋白 免疫印迹法 结果的影响。[方法 ]通过测量灰度值,比较不同曝光时间(6 s和21 s)、洗脱时间(30 min和8 h)以及图像处理软件(Image J和Imagequant TL)对蛋白 免疫印迹法 结果的影响。[结果]上样量比值为2∶1的蛋白 曝光6 s的灰度值读数分别为14766±724和7171±577(n=3),均数比值为2. 1∶1。延长曝光至21 s后相同样品灰度值分别为14932±1198和11994±616(n=3),均数比值减小为1. 2∶1;洗脱30 min和8 h后的曝光结果相比,上样量为1. 64μg蛋白 灰度值分别为23713±1895和22892±571(n=3),差异无统计学意义;Image J和Imagequant TL两种软件对倍比梯度上样的蛋白 样品读值,比值分别为1∶0. 56∶0. 41∶0. 22和1∶0. 59∶0. 40∶0. 15;对两组读值进行直线回归分析,可得斜率分别为0. 13和0. 14,提示两组读值趋势一致。[结论]曝光时间对蛋白 免疫印迹法 结果有明显影响,高丰度蛋白 需要低曝光时间,才能保持确切的倍比关系;洗脱时间超过30 min对蛋白 免疫印迹法 灰度值结果没有直接影响;不同图像处理软件对灰度值结果分析趋势一致。关键词：蛋白免疫印迹法 WESTERN BLOT 灰度值 蛋白 免疫印迹法 同时检测大、小分子蛋白 的实验条件改进被引量：16 2016年 蛋白 免疫印迹法 是现代生物医学研究中广泛应用于蛋白 定性和半定量分析的实验技术。然而,常规采用传统单一浓度凝胶的蛋白 免疫印迹法 在应用过程中仍有不足之处,如不能同时检测分子量很大和很小的蛋白 ,因而有必要探索一种增大凝胶有效分离范围的检测方法 。本文提出采用组合凝胶来实现更大范围分子量蛋白 的同时检测。方法 :比较双浓度的组合凝胶与单一浓度凝胶的分离范围以及分析采用组合凝胶,蛋白 免疫印迹法 对大、小分子蛋白 的检测效果。结果:12%/7.5%组合凝胶和15%/7.5%组合凝胶的分离范围显著大于相应的单一浓度凝胶。通过12%/7.5%组合凝胶,蛋白 免疫印迹法 同时检测到15-300 k Da范围内的大、小分子蛋白 。结论:组合凝胶有助于蛋白 免疫印迹法 对分子量相差很大的蛋白 进行同时检测分析,具有很强的实用性。关键词：蛋白免疫印迹法 蛋白分析 分离胶 蛋白 免疫印迹法 条带特征与人类免疫 缺陷病毒新发感染的相关性被引量：7 2015年 印 迹 法 检测HIV抗体带型与新发感染的相关性.方法 将294份经Western印 迹 确证为HIV感染者的标本,进一步行HIV捕获酶联免疫 法 （BED-CEIA）检测,比较新发感染者和长期感染者标本的条带反应强度,并与95份艾滋病患者的标本带型进行比较.统计学分析采用LSD检验和卡方检验.结果 HIV新发感染者各条带反应强度均低于长期感染者,其中p31相差最大,新发感染者为1.32分,长期感染者为2.80分,艾滋病患者为2.19分,差异有统计学意义（F=127.25,P=0.000）.Western印 迹 结果显示,新发感染者中p66、p55、p51、gp41和p31条带缺失者的比例明显高于长期感染者和艾滋病患者;p31缺失新发感染者28例,长期感染者0例,艾滋病患者1例,差异有统计学意义（χ2=54.70,P=0.000）.带型组合情况显示,全条带的带型组合最常见,占49.1％（191/389）;gp160＋gp120--p24带型组合在新发感染者中出现最多（6例）,而在长期感染者没有出现.结论 Western印 迹 法 HIV抗体条带变化与新发感染之间存在一定的相关性.关键词：人类免疫缺陷病毒 印迹法 蛋白质 蛋白 免疫印迹法 检测小分子蛋白 的实验条件优化研究被引量：6 2015年 蛋白 免疫印迹法 自发明以来被广泛应用于现代生物学研究中的蛋白 质定性和半定量分析。为了提高蛋白 免疫印迹法 的检测效率,需针对不同蛋白 的特性调节相关的实验条件参数。本文旨在探讨免疫印迹法 不同参数对小分子蛋白 检测效果的影响,从而优化并获得最佳实验条件。方法 :比较不同转膜电压和时间、转移缓冲液甲醇含量、不同化学发光剂对小分子蛋白 的检测效果。结果:选择20 V、10 min转膜电压和时间所获得的信号显著高于10 V、25 min转膜条件,选择含20%甲醇转移缓冲液所获得的信号显著高于无甲醇转移缓冲液,选择飞克级化学发光剂所获得的信号显著高于纳克级化学发光剂。结论:选用高电压、短时间组合,选择含20%甲醇转移缓冲液和飞克级化学发光剂信号均有助于小分子蛋白 免疫印 迹 检测。关键词：免疫印迹法 WESTEM BLOT 甲醇 HIV抗体不确定血清蛋白 免疫印迹法 检测条件的正交实验优化及应用 2014年 蛋白 免疫印迹法 (WB)对艾滋病病毒(HIV)抗体不确定血清的检测条件,并测试其检测效能。方法 采用正交实验L9(34)法 ,对HIV弱阳性对照的WB检测条件(样本量、样本孵育时间、酶联合物孵育时间)进行优化设计;对19份HIV抗体不确定血清、25份HIV阴性血清和20份HIV阳性血清,同时采用标准检测条件和优化检测条件进行检测。结果以样本量100μL、样本孵育时间2小时、酶联合物孵育时间15分钟,为HIV抗体不确定血清的最优检测条件;同标准检测条件相比,优化检测条件对HIV阴性或阳性血清的检测效能一致,但对19例HIV抗体不确定血清的检测效能更高。结论正交实验所筛选的优化检测条件可高效检测HIV抗体不确定血清。关键词：艾滋病病毒 免疫印迹法 正交实验 一例HIV抗体蛋白 免疫印迹法 检测条带不全病例的分析 被引量：7 2014年 法 该病例的血清标本采用两种酶联免疫 吸附试验(ELISA)及两种快诊实验检测,又用蛋白 免疫印迹法 (WB)进行确证实验,并结合流行病学资料、核酸检测和基因测序结果,对该样本进行全面分析。结果 2012年11月至2013年3月期间,一例首次来自上海市肺科医院,两次随访均来自浦东新区自愿咨询检测门诊(VCT)的病例,ELISA和快诊检测为HIV抗体阳性,但WB确证结果首次为"不确定",第2、第3次随访结果也均为"不确定",后经核酸检测结果为阳性,基因测序结果为HIV-1型的CRF01_AE重组亚型,符合该病例的流行病学调查资料。结论对确证试验为"不确定"的病例,应综合初筛结果和实验室辅助检测手段及流行病学史,尽早明确个体HIV感染情况。关键词：艾滋病病毒 中国莱姆病阿弗西尼基因型感染蛋白 免疫印迹法 诊断方法 的研究 蛋白 免疫印迹法 诊断方法 及其标准化操作程序。 方法 : (1)选择中国Borrelia afzelii代表菌株FP1作为抗原出发菌,采用SDS-PAGE、电转...关键词：莱姆病螺旋体 蛋白免疫印迹法 蛋白 免疫印迹法 检测胃癌组织Cyr61和HIF-1α蛋白 的表达及其临床意义被引量：2 2011年 蛋白 和低氧诱导因子-1α(HIF-1α)蛋白 在胃癌组织中的表达水平,探讨两者与胃癌侵袭转移的关系。方法 将标本分成3组,分别为49例胃癌组、49例配对的癌旁组(距癌2 cm)和49例配对的正常组(距癌5 cm以上),用免疫 组织化学和蛋白 免疫印 迹 (Western blot)方法 检测Cyr61和HIF-1α的蛋白 表达水平,并分析两者与胃癌的临床病理特征的关系。结果免疫 组织化学检测显示Cyr61在胃癌细胞的胞浆中表达,HIF-1α在胃癌细胞的胞浆/胞核中表达。进一步用Western blot检测结果显示,胃癌中Cyr61蛋白 的表达水平(0.2767±0.02200)高于癌旁组织(0.2145±0.02209)和正常组织(0.1055±0.02082),癌旁组织高于正常组织(均P<0.01);胃癌中HIF-1α蛋白 的表达水平(0.2663±0.02682)高于癌旁组织(0.2120±0.04087)和正常组织(0.1008±0.03867)(均P<0.01),癌旁组织高于正常组织(P<0.01)。Cyr61和HIF-1α蛋白 表达的增强与肿瘤的分化程度、淋巴转移及TNM分期相关(均P<0.05)。SPERMAN等级相关分析证明了Cyr61蛋白 和HIF-1α蛋白 的表达呈明显正相关(r=0.411,P<0.05)。结论 Cyr61蛋白 和HIF-1α蛋白 在胃癌组织中呈高表达,可能与胃癌的侵袭转移有关。联合检测Cyr61蛋白 和HIF-1α蛋白 对指导胃癌临床及判断预后有重要价值。关键词：胃肿瘤 低氧诱导因子-1Α 蛋白免疫印迹法
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