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超声辐照阳离子纳泡介导HSV-TK/GCV自杀基因系统对胃癌细胞抑制效应的实验研究
目的:观察体外转染单纯疱疹病毒胸苷激酶(Herpes simplex virus-thymidine kinase,HSV-TK)基因及联合前药更昔洛韦(Ganciclovir,GCV)后对人胃癌NCIN87细胞增殖、凋...
吴桐
关键词:自杀基因HSV-TK/GCV系统胃癌
携带ePNP/MePdR自杀基因系统的减毒沙门氏菌菌株构建及初步鉴定
研究背景:随着全球进入老龄化社会,肿瘤持续升高的发病率以及死亡率,不仅迫使各个国家投入大量的人力及财力,而且严重降低人们的生存质量。迄今为止,各类基因疗法、免疫疗法以及分子靶向药联合传统的手术、放疗或化疗,虽然极大延长了...
李园园
关键词:减毒鼠伤寒沙门氏菌抗肿瘤
一种基于腺相关病毒载体改造的自杀基因系统及其应用
本发明属于基因工程领域,具体涉及一种基于腺相关病毒载体改造的自杀基因系统及其应用。该系统包括腺相关病毒载体pAAV‑SV40增强子‑hTERT‑tk,所述pAAV‑SV40增强子‑hTERT‑tk载体至少包括以下特性:a...
潘讴东杨兴林杨佳丽李书胜秦楠
HSV-TK/CD20双自杀基因系统慢病毒载体的构建及应用被引量:2
2019年
目的构建同时表达单纯疱疹病毒胸苷激酶(HSV-TK)和RQR8膜蛋白双自杀可控开关的Jurkat细胞,使之可通过更昔洛韦药物(GCV)或利妥昔单抗(RTX)实现可控性细胞消除。方法 RQR8膜蛋白小分子含利妥昔单抗识别的模拟表位和抗CD34单抗表位。合成编码RQR8及HSV-TK的基因,构建慢病毒共表达载体pLV-RQR8-T2A-TK;脂质体Lipofectamine3000转染Jurkat细胞,流式荧光抗CD34单抗检测RQR8的表达,通过磁珠筛选获得RQR8+TK+Jurkat细胞;分别加入GCV或RTX检测自杀可控开关功能:CCK8法检测加药后细胞增殖情况,Annexin-V/PI检测细胞凋亡情况。结果慢病毒载体pLV-RQR8-T2A-TK酶切片段大约1 670 bp,测序进一步证实外源片段插入正确。慢病毒感染Jurkat细胞,感染率为45.21%,磁珠纯化得到99.4%纯度的RQR8+TK+Jurkat。GCV对RQR8+TK+Jurkat具有细胞毒性作用,GCV浓度为40μmol/L时,其存活率为(52.11±7.04)%,IC50为20.66μmol/L。80μmol/L GCV作用RQR8+TK+Jurkat细胞72 h后凋亡率达(41.28±2.78)%。在血清(含补体)存在情况下,320μg/ml RTX可通过补体介导的细胞杀伤作用杀伤RQR8+TK+Jurkat,其存活率为(29.64±4.52)%。结论双自杀可控开关慢病毒载体pLV-RQR8-T2A-TK构建成功,加入GCV或RTX可通过2种不同路径成功杀伤细胞,达到细胞清除目的,提高了安全性,为临床治疗过继免疫不良反应提供多种选择。
家婷张涛邹强郑武燕赵日欧阳寒梅曹倩朱榕王茂庆叶鑫宇刘佳慧李华
关键词:自杀基因HSV-TKCD20利妥昔单抗更昔洛韦
pAdKDR/CD/TK双自杀基因系统对肝癌细胞的杀伤作用的试验研究被引量:1
2017年
目的探讨含KDR启动子的双自杀基因CD/TK对肝癌HepG2细胞的杀伤作用。方法观察不同前药对HepG2细胞、血管内皮细胞ECV304和LST174细胞的杀伤作用,评估KDR启动子的靶向杀伤作用。观察不同前药对转染不同自杀基因的HepG2细胞的杀伤作用,及旁观者效应。结果转染腺病毒的HepG2细胞及血管内皮ECV304细胞对前药具有较高的敏感性,而感染腺病毒的LST174细胞对前药不敏感(P<0.05)。当转染细胞混合比例为50%时,应用前药后,转染CD/TK,CD,TK的HepG2细胞生存率分别为11.8±1.2%、41.3±3.7%、43.1±2.3%(P<0.05)。结论含KDR启动子的双自杀基因CD/TK对肝癌HepG2细胞具有高度靶向杀伤作用;联合用药对转染双自杀基因的肝癌HepG2细胞具有协调增强杀伤作用。
谷洋刘志毅金虎刘明孙铁梁
关键词:双自杀基因KDR启动子肝癌细胞基因
微泡造影剂超声辐照介导自杀基因系统治疗肝癌实验研究被引量:7
2017年
目的探讨微泡造影剂超声辐照介导自杀基因系统治疗体内肝癌肿瘤的作用。方法采用小鼠肝癌瘤体内直接注射KDR-TK、AFP-TK基因和微泡造影剂SonoVue后加以超声辐照的介导方式,并通过给予GCV和5-FC两种前药,观察肿瘤生长体积、抑瘤率、生存时间、肿瘤细胞凋亡指标。结果 (1)治疗组小鼠皮下肝癌移植瘤体生长体积与对照组之间差异无统计学意义,但治疗组的抑瘤率有增加,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);(2)治疗组与对照组小鼠生存时间差异均无统计学意义(P>0.05);(3)治疗组诱导肿瘤组织内的细胞凋亡增多,与对照组差异有统计学意义(P<0.05);(4)各组除针道外,肿瘤组织内未见明显坏死。结论微泡造影剂超声辐照介导自杀基因治疗系统具有抑制小鼠体内肝癌实体瘤的生长速率的趋势,可能的机制是诱导肿瘤细胞凋亡。
何炼图汤庆何小洪何玮华汤佳馨李婷廖丽斯李颖珊杜继业
关键词:基因治疗肝癌微泡造影剂
Survivin启动子调控的HSVtk/GCV自杀基因系统对肝癌细胞的杀伤作用
目的:  1.构建一种由survivin启动子介导的重组载体pcDNA3.1-pSurvivin-TK。  2.检测由survivin启动子调控的单纯疱疹病毒胸苷激酶(HSVtk)自杀基因的真核表达载体pcDNA3.1-...
李勇芳
关键词:SURVIVIN启动子胸苷激酶肝癌细胞
NTR/CB1954自杀基因系统对Lewis肺癌细胞的体内外杀伤效应研究
目的:  近年来大量实验表明,NTR/CB1954自杀基因系统在对多种恶性肿瘤细胞(乳腺癌、宫颈癌、卵巢癌等)均具有杀伤效应,但是,针对NTR/CB1954自杀基因系统对肺癌细胞的相关研究较为罕见。本实验旨在探讨NTR/...
滕隔玲
关键词:肺癌杀伤效应
Ad-HSV-TK/GCV自杀基因系统对人卵巢癌细胞增殖、凋亡的影响
2014年
目的探讨腺病毒介导的单纯疱疹病毒腺苷激酶(HSV-TK)/丙氧鸟苷(GCV)自杀基因系统对人卵巢癌细胞SKOV-3增殖、凋亡的影响。方法以人卵巢癌细胞SKOV-3为实验组,人成纤维细胞株MRC-5为对照组,两组分别取对数生长期,调整细胞浓度为1×107/mL。采用Ad-hTERT-HSV-TK分别转染两组细胞48 h,然后分别给予不同浓度的GCV(0.1、1、5、10、20、50、100、200μg/mL)作用48 h。采用MTT法检测各组OD值,计算并比较两组细胞增殖率、凋亡率。结果 5、10、20、50、100、200μg/mL GCV作用下实验组细胞增殖率较对照组降低(P<0.05),实验组GCV 10、100μg/mL作用下细胞凋亡率高于对照组(P<0.05)。结论腺病毒介导HSV-TK基因转入人卵巢癌SKOV-3细胞并获稳定表达,Ad-HSV-TK/GCV自杀基因系统能明显抑制卵巢癌细胞增殖,促进卵巢癌细胞凋亡。
王善凤王雅楠
关键词:卵巢癌自杀基因腺病毒丙氧鸟苷
山奈酚对小鼠黑色素瘤自杀基因系统的增效作用
目的: 建立小鼠黑色素瘤B16细胞HSV1-tkGFP/GCV自杀基因系统,为直观研究中药活性成分山奈酚对该自杀基因系统的增效作用的实验研究打下基础;证实中药活性成分山奈酚对小鼠黑色素瘤B16细胞HSV1-tkGF...
曾玲
关键词:自杀基因系统旁观者效应缝隙连接通讯黑色素瘤山奈酚

相关作者

黄宗海
作品数:473被引量:1,658H指数:17
供职机构:天津农学院
研究主题:创伤性休克 创伤性 自杀基因治疗 双自杀基因 KDR启动子
杜标炎
作品数:124被引量:624H指数:14
供职机构:广州中医药大学基础医学院
研究主题:自杀基因 六味地黄丸 肝癌 黑色素瘤 旁观者效应
谭宇蕙
作品数:106被引量:469H指数:12
供职机构:广州中医药大学基础医学院
研究主题:自杀基因 肝癌 六味地黄丸 细胞凋亡 吴茱萸碱
陈道桢
作品数:206被引量:639H指数:11
供职机构:无锡市妇幼保健院
研究主题:宫颈癌 17-丙烯胺基-17-去甲氧基格尔德霉素 特发性男性不育 男性不育 旁观者效应
吴映雅
作品数:63被引量:328H指数:11
供职机构:广州中医药大学
研究主题:自杀基因 六味地黄丸 肝癌 细胞凋亡 旁观者效应