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脐血单核细胞移植治疗慢性完全性脊髓损伤Ⅱ期临床试验的安全性和疗效评估被引量：2: 2020年; 目的评估人类白细胞抗原(HLA≥4:6)配型的脐血单核细胞(UCBMC)移植治疗慢性完全性脊髓损伤(SCI)的安全性、可行性、有效性以及最佳细胞剂量和联合使用甲基强的松龙(MP)、碳酸锂对细胞移植的作用。方法选取联勤保障部队第九二〇医院神经外科自2011年2月至2014年1月收治的20例SCI患者,按照随机数字表法分为5组(A、B、C、D、E组),每组4例受试者。在患者损伤上下缘脊神经背根入处的4个点(上下各2点)注射UCBMC,A、B、C组分别为每点各注射4、8和16μL(100000 UCBMC/μL,640万细胞)到SCI部位的上方和下方脊神经背根入处,D组为16μL细胞注射加30 mg/kg MP静脉注射,E组为16μL细胞注射加MP和口服碳酸锂(750 mg/d),一个疗程6周。受试者进行3~6个月的强化步行训练,以美国脊髓损伤协会(ASIA)为主要评分指标,脊髓损伤步行指数(WISCI)和脊髓独立量表(SCIM)为次要评分指标。结果20例受试者的SCI平面分别位于C3~T11,平均受伤7年。治疗前,16例(80%)患者行走<10 m,18例(90%)患者自理生活需要协助。治疗后41~87周,受试者ASIA运动评分无明显变化,而WISCI和SCIM评分明显提高。15例(75%)患者可在辅助下步行10 m,12例(60%)患者恢复膀胱和肠道控制,5例(25%)患者由完全性SCI变为不完全性SCI;所有患者无神经功能丢失。结论UCBMC移植和步行训练能提高慢性完全性SCI患者的WISCI和SCIM评分,但对运动评分没有改善,因此推测UCMBC移植能促进轴突的生长,从而激活中枢模式发生器,改善运动、排尿和排便等功能,而且联合使用MP和碳酸锂对细胞移植治疗无明显作用。; 封亚平Wise Young朱辉封雨邓洵鼎谢佳芯张社敏方芳石静陈永和郑爽; 关键词：脊髓损伤脐血单核细胞

新生儿脐血单核细胞及中性粒细胞对胎膜早破感染预测价值研究被引量：4: 2019年; 目的探讨新生儿脐血单核细胞(MONO)和中性粒细胞(PMN)对胎膜早破(PROM)感染的预测价值。方法选取滨海县人民医院2017年1—12月收治的40例PROM新生儿,设为PROM组;选取同期30例足月正常分娩新生儿,设为正常组。采用流式细胞术检测两组新生儿脐血MONO、PMN表面TREM-1及CD64的表达水平。根据新生儿是否发生早期感染分为感染组(n=12)和未感染组(n=58),分析两组上述指标的表达差异。采用受试者工作特征曲线(ROC)计算新生儿脐血MONO和PMN表面TREM-1及CD64的表达水平对早期感染的临床预测价值。结果正常组新生儿外周血C反应蛋白(CRP)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞计数(WBC)均显著高于PROM组(P<0.05)。正常组感染率25.0%(10/40),高于PROM组的6.7%(2/30),差异有统计学意义(P<0.05)。正常组新生儿脐血MONO和PMN表面TREM-1、CD64表达均高于PROM组(P<0.05)。感染组新生儿脐血MONO和PMN表面TREM-1、CD64表达均高于未感染组(P<0.05)。脐血MONO表面TREM-1平均荧光强度(MFZ)比值、CD64 MFI比值、PMN表面TREM-1 MFI比值和CD64 MFI比值均可预测早期新生儿感染。结论 PROM新生儿脐血MONO和PMN表面TREM-1、CD64表达异常偏高,新生儿娩出后加强其临床检测,对早期新生儿感染具有显著预测价值。; 周建波周凌君汪洪友; 关键词：脐血单核细胞中性粒细胞 TREM-1 CD64 新生儿感染

胎膜早破新生儿脐血单核细胞和中性粒细胞表面TREM-1、CD64的表达特点及临床意义被引量：5: 2019年; 目的探讨胎膜早破(PROM)新生儿脐血单核细胞(MONO)和中性粒细胞(PMN)表面TREM-1及CD64的表达特点以及对新生儿感染的临床预测价值。方法收集该院2017年收治的40例胎膜早破新生儿为观察组,另选取同期30例足月正常分娩新生儿作为对照组。采用流式细胞术检测两组新生儿脐血MONO和PMN表面TREM-1及CD64的表达水平。结参照第4版《实用新生儿学》诊断标准,根据新生儿是否发生早期感染分为感染组和未感染组,统计分析两组上述检测指标的表达差异,若差异有统计学意义,则采用受试者工作曲线特征(ROC)计算新生儿脐血MONO和PMN表面TREM-1及CD64的表达水平对早期感染的临床预测价值。结果观察组外周血C-反应蛋白(CRP)、白细胞介素-6 (IL-6)、白细胞计数(WBC)均较对照组高,早期新生儿感染率25. 00%(10/40)高于对照组6. 67%(2/30),差异有统计学意义(P<0. 05);观察组新生儿脐血MONO、PMN表面TREM-1、CD64表达分别较对照组高,早期新生儿感染组脐血MONO和PMN表面TREM-1、CD64表达分别较未感染组显著偏高(P<0. 05);ROC曲线分析显示,新生儿脐血MONO表面TREM-1、CD64和PMN表面TREM-1、CD6表达预测早期新生儿感染AUC分别为0. 768、0. 812、0. 736、0. 717 (AUC均>0. 7),Cut-off依次为8. 61、5. 32、7. 49、1. 63。结论胎膜早破时新生儿脐血MONO和PMN表面TREM-1、CD64表达异常偏高,新生儿娩出后加强其临床检测,对早期新生儿感染具有显著预测价值。; 王晓莹栾海燕; 关键词：胎膜早破脐血单核细胞 TREM-1 CD64 新生儿感染

一种临床用脐血单核细胞的制备方法: 本发明公开了一种脐带血单核细胞的制备方法：步骤一、脐带血初步筛选与保存；步骤二、培育；步骤三、吸取；步骤四、收集；步骤五、细胞培养；步骤六、单核细胞冻存和检测；步骤七；单核细胞的使用。本发明拟从原料采集开始直至细胞制备完...; 赵翔李国焱唐玲熊华强

脐血单核细胞体外高效扩增NK细胞方法的研究被引量：1: 2018年; 目的建立1种使用脐血单核细胞（UCBMC）制备较高纯度自然杀伤（NK）细胞的体外高效扩增方法,并初步鉴定扩增后的NK细胞杀伤肿瘤细胞（K562）的能力。方法 6人份脐血标本来自北京妇产医院,取20 mL/份、采用密度梯度离心法分离脐血中的UCBMC,提取后的UCBMC以1×10~6个/mL细胞在4 mL含有白细胞介素（IL）-2、IL-12、IL-15和IL-21的X-VIVO15中培养5 d,期间于d2和d3添加等体积含上述细胞因子的新鲜培养基; 800 g离心将细胞后转入含1 000 IU/ml IL-2和50 ug/mL L-抗坏血酸-2-磷酸三钠盐的X-VIVO15培养基中继续培养至14 d,800 g离心收获细胞。无血清RPMI1640重悬后通过台盼蓝染色法做细胞计数测定细胞的扩增倍数;流式细胞仪检测NK细胞重要表面标志物（CD56和CD16等）及与杀伤功能相关的重要分子[CD158a、CD158b、CD158e/k、CD69、CD314（NKG2D）、CD94、CD335（NKp46）、CD337（NKp30）、CD62L、CD226（DNAM-1）、CD57和CD336（NKp44）]的表达情况;胞内染色结合流式细胞仪测定细胞杀伤重要效应分子Perforin和Granzyme B的表达情况,并以乳酸脱氢酶（LDH）释放法检测扩增后的细胞对K562细胞的杀伤能力。结果 6份UCBMC培养14 d：活细胞总数从培养前的4×106个扩增至（3. 6—5. 5）×10~8个,扩增倍数91—137（116±13. 1）; CD3-CD56＋细胞（NK细胞）占比85. 6%—95. 5%（90. 2±3. 4）%;培养得到的NK细胞表面除表达CD56分子外,还表达CD16（91. 2±2. 6）%、CD158a（71. 4±4）%、CD158b（52. 1±2. 2）%、CD158e/k（50. 3±6. 9）%、CD69（95. 6±2. 8）%、CD314（NKG2D）（94. 2±1. 7）%、CD94（94. 1±2. 1）%、CD335（NKp46）（26. 6±4. 1）%、CD337（NKp30）（94. 6±1. 5）%、CD62L（12. 8±3. 4）%、和CD226（DNAM-1）（97. 6±1. 3）%,以及CD57（4. 2±0. 9）%和CD336（NKp44）（7. 1±1）%。胞内染色结果显示：〉90%扩增产物（细胞）内表达与NK细胞杀伤功能相关的Perforin（86. 9±2. 7）%和Granzyme; 汪德海郭昌龙周越高建恩马旭; 关键词：脐血单核细胞自然杀伤细胞体外扩增 K562 细胞毒

一种富含造血干细胞的临床用脐血单核细胞的制备方法: 本发明提供一种临床用脐血单核细胞的制备方法，包括如下步骤：取适量分离获得的脐带血，置于脐血保存袋中冷藏保存；进行脐血单核分离处理，获得脐血单核细胞，进行冷冻处理；冷冻细胞复苏后用生理盐水洗涤，后再次计数和活率，并留样进行...; 朱兵锐江晔刘朋程

粗根荨麻多糖对人脐血单核细胞源树突细胞表面分子表达的影响被引量：3: 2016年; 研究粗根荨麻多糖在体外对人脐血单核细胞向树突细胞分化及成熟的作用。用淋巴细胞分离液分离脐血获得脐血单个核细胞,将获得的单核细胞分为3组,实验组:在含有粗根荨麻多糖(200 mg/L)的RPMI1640完全培养液中培养;阴性对照组:在无药物的RPMI1640完全培养液中培养;阳性对照组:在含有细胞因子(IL-4、GM-CSF、TNF-α)的RPMI1640完全培养液中培养;收集第10 d细胞用流式细胞术检测DCs成熟表型(CD1a、CD80、CD83、CD86、HLA-DR)。结果表明,与阴性对照组比较,实验组和阳性对照组CD80、CD83、CD86、HLADR、CD1a的表达明显增加。粗根荨麻多糖可诱导脐血单核细胞分化成熟的DCs。; 屈铭鸿王崇静梁月琴夏洪颖李仲昆; 关键词：树突细胞脐血单核细胞

低氧预处理人脂肪间充质干细胞联合脐血单核细胞治疗大鼠急性心肌梗死: 心肌梗死是严重威胁人类健康的疾病。我国每年约有2.9亿人罹患心血管疾病，并有350万人因此而丧生。心血管疾病死亡率位居我国城乡居民总死亡原因的首位，且呈逐年攀升趋势。目前心肌梗死的主要治疗手段还是药物和手术，虽然它们能够...; 相杭; 关键词：心肌梗死脂肪间充质干细胞低氧预处理脐血单核细胞临床疗效

人脐血单核细胞不同移植时间对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤的神经保护作用研究: 研究背景：　　新生儿缺氧缺血性脑病(Hypoxic-ischemic encephalopathy，HIE)是指发生在新生儿围生期因缺氧或缺血引起的脑组织的病变，是导致新生儿急性死亡和后期严重神经系统后遗症的常见病因之一...; 唐华兵; 关键词：新生儿缺氧缺血性脑损伤神经保护

1,25-二羟维生素D_3对脐血单核细胞来源树突状细胞刺激T细胞增殖能力的影响被引量：4: 2015年; 目的探讨1,25-二羟维生素D_3[1,25(OH)_2D_3]对脐血单个核细胞来源树突状细胞(DCs)刺激T细胞增殖能力的影响。方法无菌条件下采集脐血,体外分离获得脐带血单个核细胞,经重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(rh GM-CSF)、重组人白介素-4(rh IL-4)和重组人肿瘤坏死因子-α(rh TNF-α)培养8 d诱导分化为DCs,予1,25(OH)_2D_3(10 nmol/L)干预。流式细胞术检测DCs表面分子的表达情况,经CD3磁珠阳性分选后获得T细胞,并以羧基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺酯(CFSE)标记,用流式细胞术检测DCs刺激自体T细胞增殖的能力和T淋巴细胞各亚群的增殖情况;ELISA法检测混合培养上清中细胞因子水平。结果 1,25(OH)_2D_3干预组DCs刺激同种同体CD3^+T细胞增殖率低于对照组(61.6±8.23对75.21±6.21),且CD3^+CD4^+和CD3^+CD8^+T细胞亚群的增殖率均降低(59.24±10.22对74.54±6.89,47.06±12.10对59.97±9.11),差异均有统计学意义(P均<0.05)。DCs与同种同体T淋巴细胞混合培养后收集上清液检测细胞因子,1,25(OH)2D3干预组IL-12和IFN-γ浓度均低于对照组(78.84±11.8对99.06±9.07,9.76±2.75对22.45±2.6),而IL-4则高于对照组(49.45±2.84对35.75±1.89),差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论 1,25(OH)_2D_3可抑制脐血单个核细胞来源DCs刺激自体CD3^+CD4^+和CD3^+CD8^+T淋巴细胞增殖反应,且诱导T细胞免疫应答呈Th2倾向。; 李海园唐征王翼施婴婴刘志伟; 关键词：1,25-二羟维生素D3 树突状细胞 T淋巴细胞脐血

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