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知母皂苷对AD模型大鼠学习记忆能力及磷酸化Tau蛋白和胆碱乙酰基转移酶表达的影响被引量：13: 2016年; 目的:研究知母皂苷(SAa B)对Aβ1-42诱导的大鼠学习记忆障碍的改善作用及机制。方法:选用SD大鼠48只随机分为4组:正常对照组,Aβ1-42组,SAa B(1、2.5 mg/ml)+Aβ1-42组,每组12只,侧脑室注射给药后第2 d进行Morris水迷宫实验,第7d快速取海马CA1区,Western Blot法观察磷酸化tau(P-tau)、磷酸化GSK-3β、磷酸化Akt蛋白及胆碱乙酰基转移酶(Ch AT)蛋白表达水平。结果:脑室内注射Aβ1-42大鼠出现明显的空间学习记忆障碍,表现为逃避潜伏期和游泳路程较正常对照组明显延长,在原平台象限游泳时间占总时间的百分比明显降低,同时伴有海马P-tau表达明显增加,p-GSK-3β、p-Akt、Ch AT表达明显降低。侧脑室内注射SAa B后,与Aβ1-42组相比,SAa B(1、2.5 mg/ml)+Aβ1-42组大鼠逃避潜伏期和游泳路程明显缩短,原平台象限游泳时间占总游泳时间百分比升高;海马P-tau表达明显降低,p-GSK-3β、p-Akt、Ch AT表达明显增加。结论:侧脑室内注射知母皂苷可通过降低Ptau表达水平,提高Ch AT活性,从而减少神经元纤维缠结的形成,并可能通过调节胆碱能功能的途径发挥抗痴呆的作用。; 隋海娟马瑞国刘卓闫恩志金英; 关键词：知母皂苷 Β淀粉样蛋白磷酸化TAU蛋白胆碱乙酰基转移酶

人参皂苷Rg1对阿尔茨海默病模型大鼠脑片磷酸化Tau蛋白及胆碱乙酰基转移酶表达的影响被引量：10: 2015年; 目的观察人参皂甙Rg1对阿尔茨海默病(AD)模型大鼠脑片磷酸化tau蛋白(P-tau)及胆碱乙酰基转移酶(Ch AT)表达的影响。方法将5周龄雄性大鼠脑片随机分为五组,分别放置人工脑脊液中培养。3个人参皂苷Rg1组培养液中分别加入不同浓度人参皂苷Rg1,在模型组和3个人参皂苷Rg1组培养液中分别加入冈田酸,空白对照组不加任何处理。采用Western印迹、图像分析技术等方法,检测皮层和海马P-tau、Ch AT的表达水平。结果与空白对照组比较,模型组P-tau表达显著增加(P<0.01);Ch AT表达降低(P<0.01);与模型组比较,人参皂甙Rg1各组P-tau表达均明显减少(P<0.01),Ch AT表达均明显增加(P<0.01);Rg1三个浓度组之间差异显著(P<0.01),以高浓度组效果最佳。结论人参皂甙Rg1可通过降低P-tau表达水平,提高Ch AT活性,从而减少神经元纤维缠结的形成,并可能通过调节胆碱能功能的途径发挥抗痴呆的作用。; 李源刘颖袁海峰马新欣张欣李明侯吉星权乾坤李玺; 关键词：人参皂甙RG1 阿尔茨海默病磷酸化TAU蛋白胆碱乙酰基转移酶

慢性脑缺血对大鼠海马微血管构筑及胆碱乙酰基转移酶蛋白表达的影响: 2014年; 目的:探讨慢性脑缺血致大鼠海马胆碱能神经元损伤的作用,初步阐明其作用机制。方法:选取90只健康成年雄性SD大鼠,随机分为假手术组(30只)和实验组(60只)。实验组大鼠采用结扎双侧颈总动脉的方法,建立慢性脑缺血模型;假手术组大鼠颈部正中切口,分离双侧颈总动脉,不做结扎。分别于术后第7、14和21天随机各取假手术组大鼠10只、实验组大鼠20只处死取材。免疫组织化学SP法观察海马神经元胆碱乙酰基转移酶(ChAT)蛋白表达水平的动态变化,单宁酸-氯化铁媒染法观察大鼠海马微血管构筑的动态变化,采用MiVnt图像分析系统定量分析免疫组织化学阳性结果、大鼠海马水平部的微血管密度(MVD)和微血管面积密度(MVA)。结果:实验组大鼠海马神经元ChAT的表达水平较假手术组大鼠明显降低(P<0.05);且随缺血时间的延长,ChAT的表达水平逐渐降低,实验组14d时大鼠ChAT的表达水平明显低于实验组7d时(P<0.05),实验组21d时明显低于实验组14和7d(P<0.05)。实验组各时间点大鼠海马的MVA和MVD均较假手术组明显降低(P<0.05)。随着造模时间的延长,MVA逐渐降低,实验组14和21d时大鼠的MVA明显低于实验组7d时(P<0.05);随着造模时间的延长,MVD也逐渐降低,实验组14和21d时的MVD明显低于实验组7d(P<0.05),实验组21d时明显低于实验组14d(P<0.05)。结论:慢性脑缺血可致大鼠海马MVA、MVD及ChAT蛋白的表达水平进行性下降,进而导致学习和记忆功能障碍逐渐加重,这可能是血管性痴呆发生的原因之一。; 杨振军赵亮薛景凤; 关键词：慢性脑缺血海马微血管构筑胆碱乙酰基转移酶

褪黑素对异氟醚麻醉大鼠海马胆碱乙酰基转移酶的影响: 2011年; 目的探讨褪黑素对异氟醚麻醉大鼠海马胆碱乙酰基转移酶（ChAT）的影响。方法雄性SD大鼠60只，体重390～440g，采用随机数字表法，将大鼠随机分为5组（n=12）：对照组（C组）、1％异氟醚组（I组）、1％异氟醚＋褪黑素组（IM组）、2％异氟醚组（J组）和2％异氟醚＋褪黑素组（JM组）。IM组和JM组腹腔注射褪黑素10mg／kg，1次／d，连续7d，C组、I组和J组给予等容量生理盐水。I组、IM组第7天吸人1％异氟醚4h，J组、JM组第7天吸入2％异氟醚4h。于麻醉次日行Morris水迷宫实验，测试逃避潜伏期及原平台象限探索时间；水迷宫实验结束后取血浆及脑组织，采用ELISA法测定血浆褪黑素浓度，Westernblot法测定海马ChAT表达水平，采用比色法测定海马ChAT活性，采用免疫荧光法测定海马CAI区和齿状回的ChAT阳性神经元数量。结果与C组比较，I组血浆褪黑素浓度、ChAT表达水平和活性降低（P〈0．01）；J组逃避潜伏期延长，原平台象限探索时间缩短，血浆褪黑素浓度、ChAT表达水平和活性降低（P〈0．05或0．01）。与I组比较，IM组逃避潜伏期缩短，原平台象限探索时间延长，褪黑素浓度升高，ChAT表达水平和活性升高（P〈0．05或0．01）。与J组比较，JM组逃避潜伏期缩短，褪黑素浓度升高，ChAT活性升高（P〈0．05或0．01）。海马CAl区和齿状回的ChAT阳性神经元数量与ChAT表达水平变化一致。结论褪黑素可减轻异氟醚麻醉对ChAT表达水平及活性的抑制，从而改善异氟醚麻醉后大鼠的认知功能。; 倪诚郭向阳钱敏周阳吴长毅王军李民贾东林岳峰; 关键词：褪黑激素异氟醚海马

川芎嗪对拟AD小鼠脑胆碱乙酰基转移酶和NMDA受体的影响被引量：7: 2011年; 目的探讨川芎嗪(TMP)对阿尔茨海默病(AD)模型小鼠脑胆碱乙酰基转移酶(ChAT)和N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体的影响。方法 56只小鼠随机分为五组:正常对照组(A组,10只)、D-半乳糖(D-gal)模型组(B组,10只)、TMP低、高剂量组(C、D组,各12只)和哈伯因阳性对照组(E组,12只)。Morris水迷宫测试学习记忆功能,同时进行大脑皮层、海马ChAT活性测定和NMDA受体结合试验。结果与A组相比,B组学习记忆能力和海马NMDA受体含量均下降(P<0.01);TMP可明显改善模型小鼠的学习记忆能力,增强皮层和海马ChAT活性,上调海马NMDA受体数目(P<0.05)。结论 TMP可明显提高模型小鼠的学习记忆功能,这可能与增强ChAT活性及保护NMDA受体有关。; 张春王世真王铁崔旭; 关键词：川芎嗪阿尔茨海默病胆碱乙酰基转移酶 N-甲基-D-天冬氨酸受体

肝脏部分缺血再灌注对小鼠海马神经元胆碱乙酰基转移酶表达的影响: 2011年; 目的探讨肝脏部分缺血再灌注对小鼠海马神经元胆碱乙酰基转移酶（ChAT）表达的影响。方法成年雄性小鼠100只，2月龄，体重20～25g，采用随机数字表法，将其随机分为5组（n=20）：正常对照组（C组）、假手术组（S组）、肝缺血20min再灌注组（I／R1组）、肝缺血30min再灌注组（I／R2组）和肝缺血40min再灌注组（I/R3组）。C组不做任何处理；S组作腹部正中切口，分离肝十二指肠韧带；I／R1组、I／R2组和I／R3组采用夹闭肝左动脉及门静脉的方法制备肝脏部分缺血再灌注损伤模型，肝缺血时间分别为20、30、40min。各组分别于术后4、18d时取10只小鼠，进行避暗实验，持续6d，然后处死，取脑组织，测定海马CA3区神经元ChAT表达。结果与C组比较，I／R1组和I／R2组术后4～7d时潜伏期缩短，错误次数增加，I／R3组术后4—9d时潜伏期缩短，错误次数增加，I／R1组、I/R2组和I／R3组术后9d时海马CA3区神经元ChAT表达下调（P〈0．05或0．01），术后18—23d时潜伏期、错误次数及术后23d时海马CA3区神经元ChAT表达差异无统计学意义（P〉0．05）；与I／R。组比较，I／R组术后4、5d时错误次数增加，I，凡组术后4—6d时潜伏期缩短，术后4～9d时错误次数增加，I/R2组和I／R3组术后9d时海马CA3区神经元ChAT表达下调（P〈0．05或0．01），术后18～23d时潜伏期、错误次数及术后23d时海马CA3区神经元ChAT表达差异无统计学意义（P〉0．05）。结论肝脏部分缺血再灌注可导致小鼠短期认知功能障碍，其机制与下调海马神经元ChAT表达有关。; 邬薇薇李元海张海涅金晶星徐露; 关键词：再灌注损伤海马神经元

参龙健脑胶囊对脑缺血损伤大鼠海马区胆碱乙酰基转移酶表达的影响被引量：1: 2011年; 目的:探讨参龙健脑胶囊对脑缺血损伤大鼠脑保护作用及对海马区胆碱乙酰基转移酶(ChAT)表达的影响。方法:采用结扎双侧颈总动脉制备脑缺血模型,参龙健脑胶囊低、高剂量组和吡拉西坦组剂量分别为0.4,1.2,0.45 g.kg-1,ig 1次/d。ig 28 d后观察神经功能并评分、脑病理组织切片并应用免疫组织化学染色法观察ChAT在缺血脑损伤大鼠海马区的表达。结果:模型组大鼠神经功能缺损明显(P<0.05),海马区ChAT表达减少(P<0.01);与模型组相比,参龙健脑胶囊治疗组大鼠的神经功能缺损改善(P<0.05),大鼠海马区ChAT表达显著增加(P<0.01,P<0.05)。结论:参龙健脑胶囊对脑组织损伤的保护作用与其促进脑组织ChAT表达密切相关。; 许成勇张岗黄泉智王发渭陈利平; 关键词：参龙健脑胶囊脑缺血胆碱乙酰基转移酶免疫组织化学

小鼠胆碱乙酰基转移酶慢病毒载体的构建及其在RAW264.7细胞中的表达: 2010年; 目的:构建胆碱乙酰基转移酶(ChAT)过表达的慢病毒载体,转染小鼠腹腔巨噬细胞系RAW264.7,上调细胞中ChAT表达。方法:利用PCR方法从小鼠cDNA文库中调取ChAT基因,克隆至pGC-FU慢病毒载体上,经PCR和测序鉴定。用pGC-FU ChAT质粒转染RAW264.7后,荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白(GFP)表达,real-time PCR检测RAW264.7细胞中ChAT基因表达丰度。结果:融合表达GFP的慢病毒载体pGC-FU-ChAT感染RAW264.7细胞的效率可达80%以上,感染细胞ChAT基因表达大幅上调。结论:成功构建了携带ChAT基因的慢病毒载体,能有效感染RAW264.7细胞,细胞中ChAT基因过表达。; 吕艺; 关键词：胆碱乙酰基转移酶慢病毒

高同型半胱氨酸血症对大鼠学习记忆能力和海马胆碱乙酰基转移酶表达的影响及叶酸的干预作用被引量：1: 2010年; 目的探讨高同型半胱氨酸血症(HHcy)对大鼠学习记忆能力和海马胆碱乙酰基转移酶(ChAT)表达的影响及叶酸的干预作用。方法将30只Wistar大鼠随机分为正常对照组、HHcy组和叶酸干预组,每组10只。在大鼠饮水中添加蛋氨酸[1.0g/(kg·d)]制作HHcy模型,叶酸干预组大鼠同时给予叶酸[0.4mg/(kg·d)]灌胃,共持续8周。在实验前后测定各组血浆同型半胱氨酸(Hcy)、叶酸的浓度,给各组大鼠进行Morris水迷宫试验检查学习记忆能力,实验8周后用免疫组化染色观察大鼠海马区ChAT的表达水平。结果与正常对照组和叶酸干预组比较,HHcy组水迷宫试验的逃避潜伏期明显延长,穿过平台次数明显减少,停留时间明显缩短(P<0.05～0.01);HHcy组大鼠海马CA3区ChAT阳性细胞平均灰度值明显降低(P<0.01)。叶酸干预组与正常对照组以上各项检查结果比较,差异无统计学意义。结论 HHcy导致大鼠学习记忆能力下降以及海马CA3区ChAT表达水平降低。补充叶酸能够起到很好的干预作用。; 王延平刘湘敏杨少青黄绍宽陈盛强孙卫文李海员; 关键词：高同型半胱氨酸血症叶酸学习记忆能力海马胆碱乙酰基转移酶

血管性痴呆大鼠海马胆碱乙酰基转移酶的动态变化被引量：33: 2009年; 目的观察血管性痴呆(VD)模型大鼠海马组织胆碱乙酰转移酶(ChAT)与学习记忆功能的动态变化,探讨VD发病的可能机制。方法采用双侧颈总动脉反复夹闭再灌注,同时腹腔注射硝普钠建立VD大鼠模型,在7、15 d、1、2、4个月等时间点,采用水迷宫检测大鼠学习记忆能力的变化,HE染色和免疫组化染色观察大鼠海马神经元的形态学改变及ChAT表达的变化。结果模型组大鼠各时间点的逃逸潜伏期(EL)比假手术组均明显延长(P<0.01);海马区锥体细胞数比假手术组明显减少(P<0.01);免疫组织化学观察海马ChAT阳性神经元表达均显著少于假手术组(P<0.01)。而且随造模手术后时间的延长,以上变化逐渐加重,与水迷宫EL呈负相关(r=-0.937,P<0.05)。结论缺血再灌注后,海马胆碱能神经元进行性缺失与ChAT活性降低可能是VD大鼠学习记忆障碍的重要机制之一。; 张立红周永翠王玉良; 关键词：血管性痴呆胆碱乙酰转移酶学习记忆

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