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高效液相色谱-串联质谱法测定野生蘑菇中毒样品中5种鹅膏肽类毒素: 2025年; 目的建立高效液相色谱-串联质谱法(high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,HPLC-MS/MS)快速测定野生蘑菇中毒样品中5种鹅膏肽类毒素的分析方法。方法剩余蘑菇和患者尿液经甲醇提取,250 mg N-丙基乙二胺(N-propyl ethylenediamine,PSA)吸附剂净化,采用Waters CORTECS C^(+)_(18)液相色谱柱分离待测物,以甲醇-2 mmol/L乙酸铵(含0.1%甲酸)为流动相,进行梯度洗脱。采用HPLC-MS/MS检测。结果 5种鹅膏肽类毒素在10.0~500.0μg/L质量浓度范围内线性关系良好(r>0.997),蘑菇样品中5种毒素检出限(limits of detection,LODs)为2.0~3.0μg/kg,定量限(limits of quantification,LOQs)为5.0~10.0μg/kg,尿液样品中5种毒素LODs为0.8~1.2μg/L,LOQs为2.0~4.0μg/L。方法回收率范围为60.1%~94.9%,相对标准偏差为2.0%~17.7%(n=6)。结论该方法准确、快速,适用于食用野生蘑菇中毒事件剩余蘑菇样品和患者尿液样品中鹅膏肽类毒素的检测。; 韦慧慰刘金明孙金影唐亮郑权东; 关键词：高效液相色谱-串联质谱法食物中毒

一种生物检材中鹅膏肽类毒素的检测方法: 本发明公开了一种基于蛋白沉淀‑液质联用的生物检材血浆和肝脏中5种鹅膏毒肽：α‑鹅膏毒肽、β‑鹅膏毒肽、γ‑鹅膏毒肽、羧基二羟鬼笔毒肽、二羟鬼笔毒肽的检测方法，属于鹅膏肽类毒素检测技术领域。本发明建立了生物检材中蛋白沉淀的...; 崔海燕师燕华郭月胡萌王乐乐王涛尉志文贠克明

超高效液相色谱-串联质谱法快速测定蘑菇中5种鹅膏肽类毒素: 2024年; 目的建立超高效液相色谱-串联质谱法(ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,UPLC-MS/MS)快速测定鲜蘑菇中α-鹅膏毒肽、β-鹅膏毒肽、γ-鹅膏毒肽、二羟鬼笔毒肽和羧基二羟鬼笔毒肽5种强毒性鹅膏肽类毒素的检测方法。方法样品经充分粉碎后,加入10%甲醇超声提取后,离心上清液过0.22μm微孔滤膜,用Waters Xselect CSH C_(18)(2.1 mm×100 mm,1.7µm)色谱柱分离,外标法定量。结果在优化条件下,该方法中5种强毒性鹅膏肽类毒素的最低检出限均为0.02 mg/kg,定量限为0.06 mg/kg,平均回收率为78.2%~103.5%,相对标准偏差为3.1%~7.6%。结论本方法简便、快速、准确,回收率好,适用于因鹅膏肽类毒素引起的食物中毒快速应急检测。; 邹淼李延升韩晓鸥华正罡; 关键词：超高效液相色谱-串联质谱法蘑菇

UPLC-MS/MS法测定蘑菇、科研用人血清和尿液中5种鹅膏肽类毒素的方法研究: 2024年; 本文建立了适用于蘑菇、科研用人血清和尿液样本中5种鹅膏肽类毒素的超高效液相色谱-串联质谱分析方法。样品经乙腈提取和水稀释后,采用XSelect HSS T3(3mm×150mm,2.5μm)进行色谱分离,以0.01%甲酸-乙腈和水为流动相进行梯度洗脱,串联质谱-电喷雾离子源(ESI)正离子模式检测。5种鹅膏肽类毒素在1~50ng/mL范围内呈现良好线性关系,相关系数均大于0.99,蘑菇样品方法检出限为0.06 mg/kg,定量限为0.2 mg/kg,在3个加标水平下平均回收率为92.6%~124.0%,相对标准偏差为3.2%~14.8%(n=6);科研用人血清样品方法检出限为0.01 mg/L,定量限为0.03 mg/L,在3个加标水平下平均回收率为85.5%~123.5%,相对标准偏差为0.9%~16.4%(n=6);科研用人尿液样品方法检出限为0.005 mg/L,定量限为0.015 mg/L,在3个加标水平下平均回收率为84.8%~119.3%,相对标准偏差为0.9%~16.1%(n=6)。本方法简单快速,高效准确,适用于蘑菇、科研用人血清和尿液中5种鹅膏肽类毒素的快速检测,为突发事件应急检验提供参考依据。; 曾豪威戚平林子豪彭名军陈婷毛新武; 关键词：蘑菇尿液超高效液相色谱-串联质谱

磁性固相萃取净化-超高效液相色谱-串联质谱同时测定尿液中6种鹅膏肽类毒素被引量：1: 2024年; 目的建立磁性纳米材料萃取净化结合超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)同时测定尿液中α-鹅膏毒肽、β-鹅膏毒肽、γ-鹅膏毒肽、羧基二羟鬼笔毒肽、二羟鬼笔毒肽和羧基三羟鬼笔毒肽的检测方法。方法尿液样本经C18功能化磁性纳米颗粒(Fe3O_(4)@SiO_(2)@C18)的萃取净化,采用超高效液相色谱-串联质谱电喷雾电离(ESI),多反应监测(MRM)模式测定6种鹅膏肽类毒素。结果6种鹅膏肽类毒素的线性范围为0.50~50.00 ng/ml,均呈良好的线性关系;检出限为0.05~0.15μg/kg,定量限为0.15~0.50μg/kg,平均加标回收率为83.5%~102.3%之间,相对标准偏差(RSD)为2.55%~5.67%。结论该方法简便快速,结果准确可靠,适用于尿液中6种鹅膏肽类毒素检测。; 崔勇张冠英刘智; 关键词：尿液超高效液相色谱-串联质谱

固相萃取/超高效液相色谱-串联质谱法测定血清和尿液中5种鹅膏肽类毒素: 2024年; 建立了适用于人体血清和尿液样本中5种鹅膏肽类毒素的固相萃取/超高效液相色谱-串联质谱(Solid Phase Extraction-Ultra Performance Liquid Chromatography Tandem Mass Spectrometry,SPE-UPLC-MS/MS)分析方法。血清样品加水稀释提取、尿液样品进行离心,两者经HLB固相萃取净化后,采用XSelect HSS T3(150 mm×3 mm,2.5μm)进行色谱分离,水和0.01%甲酸-乙腈的流动相组合进行梯度洗脱,三重四极杆串联质谱正离子模式进行检测。结果表明,5种鹅膏肽类毒素在1~100 ng·mL^(-1)线性关系好,相关系数均大于0.997,血清样品方法定量限为1.5 ng·mL^(-1),在3个加标水平下平均回收率为74.9%~114.2%,相对标准偏差为3.1%~17.1%(n=6);尿液样品方法定量限为1.0 ng·mL^(-1),在3个加标水平下平均回收率为81.8%~104.5%,相对标准偏差为1.2%~12.5%(n=6)。本方法简便高效,适用于快速检测突发应急事件中毒患者的血清和尿液中鹅膏肽类毒素。; 曾豪威周庆琼梁智安曾羲戚平; 关键词：尿液固相萃取

云南楚雄3种环柄菇中鹅膏肽类毒素的检测与分析被引量：1: 2024年; 目的对云南楚雄地区3种环柄菇中的6种鹅膏肽类毒素含量进行分析。方法采集的蘑菇45℃烤干,采用形态学和分子生物学方法进行物种鉴定。将蘑菇分为3个不同生长时期(生长期、成熟期、衰老期)和不同组织部位(菌盖、菌柄、整体),用超纯水超声提取毒素,采用超高效液相色谱-三重四极杆串联质谱法、电喷雾(ESI-)模式下多反应监测(MRM)方式检测,外标法定量。结果细环柄菇(Lepiota clypeolaria)和冠状环柄菇(Lepiota cristata)未检出鹅膏肽类毒素,肉褐鳞环柄菇(Lepiota brunneoincarnata)中检测出α-鹅膏毒肽(α-AMA)、β-鹅膏毒肽(β-AMA),其中α-AMA含量高于β-AMA。α-AMA总含量成熟期(1.67 mg/g)>生长期(1.56 mg/g)>衰老期(0.40 mg/g),β-AMA总含量成熟期(0.71 mg/g)>生长期(0.60 mg/g)>衰老期(0.14 mg/g)。两种毒素在生长期和成熟期的分布为:菌盖>菌柄,而衰老期为菌柄>菌盖。结论楚雄地区的肉褐鳞环柄菇L.brunneoincarnata主要含有鹅膏毒肽,包括α-AMA、β-AMA、Amanin、Amaninamide,不含鬼笔毒肽及毒伞肽,并且在不同生长期、不同组织部位中的α-AMA、β-AMA含量具有差异,能够为该类蘑菇中毒的临床诊断及治疗提供参考。; 许苹余成敏姚群梅李吉品唐燕吴兆华钟加菊; 关键词：环柄菇属超高效液相色谱-串联质谱法毒蘑菇

一种毒蕈中鹅膏毒肽类毒素的分离纯化方法: 本发明公开了一种毒蕈中鹅膏毒肽类毒素的分离纯化方法，具体步骤包括，S1.采用高速逆流色谱法对含鹅膏毒肽类蘑菇提取物进行初次分离；S2.采用制备液相色谱法对初次分离后的产物进行二次分离；本发明利用HSCCC结合Pre‑HP...; 曹钰彭爱华杜鸿灵向昕杰张舜杰

敬钊缨毛蛛肽类毒素JZTX-V中JZ-VF3片段对巨噬细胞炎症反应的抑制作用及机制研究: 2024年; 目的探究敬钊缨毛蛛肽类毒素JZTX-V中的多肽片段对巨噬细胞炎症反应的抑制作用,并探究相关机制。方法通过免疫印迹法检测来自JZTX-V的3个多肽片段对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激的RAW 264.7细胞中诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)表达的作用;通过Griess反应检测细胞上清液中一氧化氮(nitric oxide,NO)浓度,通过异鲁米诺化学发光检测超氧化物的产生量;通过实时荧光定量PCR检测细胞中促炎细胞因子mRNA的表达量;通过免疫印迹法检测JZ-VF3对丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)和核因子-κB(nuclear factor kappa-B,NF-κB)信号通路的影响,并用免疫荧光检测JZ-VF3对p65的核转位的影响。结果与LPS刺激组相比,用JZ-VF3处理RAW 264.7细胞可以显著抑制iNOS的激活及NO和超氧化物的产生,还可以抑制细胞中促炎细胞因子的产生。蛋白免疫印迹和免疫荧光实验揭示,JZ-VF3可以抑制MAPK和NF-κB信号通路的激活,以及p65的核转位。结论JZTX-V中的JZ-VF3多肽片段通过抑制MAPK和NF-κB信号通路的激活,从而抑制LPS诱导的RAW 264.7细胞中的炎症反应,具有成为多肽抗炎药的潜力。; 刘欣悦钱峰; 关键词：巨噬细胞 MAPK信号通路 NF-ΚB信号通路

混合阳离子固相萃取净化结合UPLC-MS/MS测定蘑菇及生物样本中鹅膏肽类毒素被引量：4: 2023年; 建立了一种混合阳离子固相萃取净化结合超高效液相色谱串联质谱法(UPLC-MS/MS)测定蘑菇、尿液及血浆中α-鹅膏毒肽、β-鹅膏毒肽、γ-鹅膏毒肽、二羟鬼笔毒肽和羧基二羟鬼笔毒肽的方法。对于蘑菇样本,烘干粉碎后纯水超声提取,经混合阳离子柱(MCX)净化;对于尿液和血浆样本,乙腈提取后,经PRi ME MCX柱净化。净化的样本以甲醇和5 mmol/L甲酸铵水溶液为流动相,在ACQUITY UPLC BEH C_(18)色谱柱上进行分离,电喷雾正离子多反应监测(MRM)模式检测,基质匹配外标法定量。结果表明,5种鹅膏肽类毒素在0.5~1000μg/L范围内均呈良好的线性关系,相关系数R^(2)>0.999。方法检出限为0.1~0.5μg/kg(μg/L),定量限为0.5~1.0μg/kg(μg/L);3个加标浓度下的平均回收率为79.1%~103.5%,相对标准偏差(RSD)为0.2%~9.6%。该方法适用于含鹅膏毒肽蘑菇中毒的确证与临床诊断。; 易思亮赵志勇赵兰馨范婷婷赵晓燕周昌艳杨凌宸; 关键词：超高效液相色谱串联质谱法蘑菇

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