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新型农抗N2对指状青霉与意大利青霉细胞通透性的影响及其作用机理研究
2025年
【目的】研究农抗N2抑制指状青霉与意大利青霉生长的作用机制,以期为由指状青霉与意大利青霉引发的植物病害的生物防治提供材料和理论参考。【方法】通过测定经不同浓度农抗N2处理的指状青霉及意大利青霉的β-1,3-葡聚糖酶活与几丁质酶活,研究农抗N2对2种病原真菌细胞壁降解酶活的影响;通过测定经不同浓度农抗N2处理的指状青霉及意大利青霉的麦角甾醇含量研究农抗N2对病原真菌细胞膜组分的影响;通过测定胞外蛋白质与DNA含量,进一步探究农抗N2对指状青霉与意大利青霉细胞壁与细胞膜完整的影响。【结果】经农抗N2处理的指状青霉与意大利青霉,其β-1,3-葡聚糖酶与几丁质酶活在处理24h后显著提高,且酶活与农抗N2浓度呈正相关。经农抗N2处理的指状青霉与意大利青霉,2种病原真菌细胞膜中麦角甾醇含量在处理24h后显著下降,其麦角甾醇含量与农抗N2浓度呈负相关。在用高浓度N2处理120h后,2种病原真菌的麦角甾醇含量达到最低值,仅为未处理组的16.77%(指状青霉)和16.23%(意大利青霉)。经农抗N2处理的2种病原真菌,胞外蛋白质含量在处理24h后显著增加,并与农抗N2浓度呈正相关;胞外DNA含量在经农抗N2处理后也有不同程度的增加,其含量在高浓度农抗N2处理72h达到最大值,分别为未处理组的1.98倍(指状青霉)与1.35倍(意大利青霉)。【结论】农抗N2能有效诱导病原真菌产生β-1,3-葡聚糖酶与几丁质酶,降解真菌细胞壁中的几丁质与β-1,3-葡聚糖,破坏细胞壁的完整。此外,农抗N2显著降低病原真菌细胞膜中的麦角甾醇含量,影响麦角甾醇的生物合成,进而破坏细胞膜的完整。综上,破坏真菌细胞壁与细胞膜的完整是农抗N2抑制指状青霉与意大利青霉的重要机制。
彭帅英段超刘群王倩代于琪郝利文李昆太
关键词:细胞壁降解酶
提高新金分枝杆菌细胞通透性的方法、新金分枝杆菌工程菌及其在制备9α-羟基雄甾-4-烯-3,17-二酮中的应用
本发明提供了一种提高新金分枝杆菌细胞通透性的方法、新金分枝杆菌工程菌及其在制备9α‑羟基雄甾‑4‑烯‑3,17‑二酮(9‑OHAD)中的应用。在分枝杆菌中生物转化植物甾醇为9‑OHAD等高价值类固醇中间体是类固醇药物的基...
张博陈鑫鑫柳志强郑裕国
薏苡附子败酱散对肠上皮细胞通透性的调控机制
2025年
目的探究薏苡附子败酱散(YFBS)在Toll样受体(TLR)4/核转录因子(NF)-κΒ/肌球蛋白轻链激酶(MLCK)-肌球蛋白轻链(MLC)信号通路下对脂多糖(LPS)诱导的Caco-2单层损伤模型调控机制。方法采用跨膜电阻(TEER)和碱磷酸酶(ALP)活力值评价细胞单层通透性变化,应用建立的模型,观察不同剂量YFBS对通透性、炎因子、紧密连接(TJ)蛋白和TLR4/NF-κΒ/MLCK-MLC通路的调控。炎因子、mRNA及蛋白表达水平应用酶联免疫吸附试验(ELISA)、实时荧光定量-聚合酶链反应(RT-PCR)、Western印迹检测。结果10μg/ml的LPS作用24 h引起细胞TJ损伤。与正常组比较,模型组TEER值显著降低(P<0.01),IL-6、IL-8及IL-4、IL-10含量显著增加(P<0.001),显著上调TLR4/NF-κΒ/mlCK-MLC通路mRNA转录和蛋白表达(P<0.05),显著下调TJ蛋白mRNA转录(P<0.001);与模型组比较,高剂量组TEER值显著增加(P<0.05),显著下调IL-6、IL-8并显著上调IL-4、IL-10水平(P<0.001)及TJ蛋白mRNA转录(P<0.05),显著下调TLR4/NF-κΒ/MLCK-MLC通路mRNA转录和蛋白表达(P<0.01)。结论YFBS通过调控TLR4/NF-κΒ/MLCK-MLC通路促进炎因子平衡,推动TJ蛋白m RNA转录,改善黏膜通透性,高剂量组最明显。
姚卫莉陈江
关键词:薏苡附子败酱散通透性
提高微生物细胞通透性的方法以及高通透性的微生物
本申请提供一种提高微生物细胞通透性的方法以及具有高通透性的微生物,其中所述方法包括:将编码穴蛋白的基因导入到微生物菌株中,以构建携带所述基因的重组微生物菌株;培养所述重组微生物菌株并使所述重组微生物菌株表达穴蛋白,以得到...
于慧敏郑煜堃杜岩梁有向王苗苗陈博
一种通过表达异源孔蛋白增强重组希瓦氏菌细胞通透性的方法及用途
本发明公开了一种通过表达异源孔蛋白增强重组希瓦氏菌细胞通透性的方法及用途,涉及合成生物学及环境能源技术领域,具体方法如下:(1)利用聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)获得<I>E...
宋浩张保财邵舒琳李锋石思程
一种细胞通透性短肽T-4及其在制备治疗上皮卵巢癌药物中的应用
本发明公开了一种细胞通透性短肽T‑4及其在制备治疗上皮卵巢癌药物中的应用,细胞通透性短肽T‑4来源于INAVA截短蛋白,通过将INAVA截短蛋白的肽段与细胞穿膜肽偶联,形成一段可以穿透细胞膜的细胞穿膜肽‑INAVA截短...
吕卫国顾凌凯沈璋瑾陈晓静
血管生成素-2通过膜突蛋白介导内皮细胞通透性增高
2024年
目的探讨血管生成素-2(Angiopoietin-2,Ang-2)对内皮细胞通透性的影响及其潜在分子机制。方法内皮细胞培养于Transwell培养皿,给予Ang-2(200 ng/mL)刺激0、12、24和48 h后检测内皮细胞通透性变化;内皮细胞接种到6孔板,Ang-2刺激0、15、30和60 min后检测膜突蛋白(Moesin)的磷酸化;使用moesin siRNA特异敲低moesin后,给予Ang-2刺激,检测内皮细胞通透性的改变,并进一步利用免疫荧光染色检测内皮细胞F-actin以及血管内皮-钙黏蛋白(Vascular endothelial cadherin,VE-cadherin)的变化。结果Ang-2(200 ng/mL)刺激内皮细胞0、12、24和48 h后,细胞通透性以时间依赖的方式逐渐增高;Ang-2显著增加内皮细胞moesin磷酸化,而使用Ang-2受体Tie-2的中和抗体Anti-Tie-2处理细胞后,显著抑制了Ang-2介导的moesin磷酸化;Moesin的特异敲除显著抑制了Ang-2介导的内皮细胞通透性增高、F-actin应力纤维的形成以及VE-cadherin的破坏。结论Ang-2通过moesin介导内皮细胞通透性增高。
袁双双余琴邓鑫游婧璨李永杰陈妮王立群
关键词:血管生成素-2膜突蛋白内皮细胞通透性
METTL3介导的m6A甲基化调控脂多糖诱导的内皮细胞通透性变化
2024年
目的探讨甲基化转移酶3(METTL3)介导的N6-甲基腺苷(m6A)甲基化修饰参与调控脂多糖(LPS)诱导的内皮细胞通透性变化的分子生物学机制。方法选用人脐静脉内皮细胞(HUVECs)进行体外培养,使用50、125、250、500、1000、2000 ng/ml的LPS干预HUVECs 24 h,应用Real-time PCR检测METTL3 mRNA的表达;选用500 ng/ml的LPS干预HUVECs 24 h,检测m6A甲基化水平,应用细胞通透性实验检测细胞通透性,应用Real-time PCR和Western blot检测细胞间连接蛋白(Claudin-5、Occludin和VE-caherin)mRNA和蛋白表达;构建METTL3过表达稳转细胞株,检测METTL3过表达时内皮细胞m6A甲基化水平及通透性的变化。结果与对照组相比,LPS抑制HUVECs METTL3 mRNA表达,使得内皮细胞m6A甲基化下调,细胞通透性升高,细胞间连接蛋白(Claudin-5、Occludin和VE-caherin)mRNA和蛋白表达下降;当METTL3过表达时,内皮细胞m6A甲基化水平增强,LPS诱导的内皮细胞通透性增加得以改善。结论METTL3介导的m6A甲基化能够改善脓毒症诱导的内皮细胞通透性增加。
王建丰余慧林余又新宋均辉孟承颖蒋薇胡德林
关键词:脓毒症内皮细胞通透性脂多糖
PLCE1在机械通气致肺微血管内皮细胞通透性增加中的作用机制研究
2024年
目的对比观察不同磷脂酶CE1(pathogenic role of phospholipase C epsilon-1,PLCE1)表达水平对机械通气(mechanical ventilation,MV)实验大鼠肺组织胞质型磷脂酶A2(cytoplasmic phospholipase A2,C-PLA2)表达及其代谢产物生成的影响,阐明PLCE1在MV致肺微血管内皮细胞(Pulmonary microvascular endothelial cell,PMVEC)通透性增加中的作用。方法SPF级大鼠24只,雌雄不拘,8~10周龄,体重180~200 g,随机均分为4组(n=6):①野生型大鼠+“肺保护”MV组(WPM组);②野生型大鼠+“伤害”MV组(WIM组);③PLCE1+/-杂合子大鼠+“肺保护”MV组(PPM组);④PLCE1+/-杂合子大鼠+“伤害”MV组(PIM组)。对实验大鼠实施时长为2 h的“肺保护”MV[潮气量(tidal volume,VT)=7 mL/kg,呼气末正压(positive end expiratory pressure,PEEP)=5 cmH 2O(1 cmH_(2)O=0.098 kPa)]或“伤害”MV(VT=20 mL/kg,PEEP=0 cmH_(2)O)MV。蛋白免疫印迹(Western-blot)和实时定量聚合酶链式反应(real-time quantitative PCR,Q-PCR)分别检测肺组织PLCE1和C-PLA2蛋白及mRNA表达水平;酶联免疫法测定肺组织花生四烯酸(arachidonic acid,AA)代谢产物前列环素(prostacyclin,PGI2)、血栓素A2(thromboxane A2,TXA2)和白三烯B4(leukotriene B4,LTB4)含量;肺通透性指数和肺湿/干重(W/D)比值评价PMVEC通透性;肺组织病理形态学评分评估肺损伤的严重程度。结果与WPM组及PPM组相比,WIM组及PIM组大鼠肺组织PLCE1和C-PLA2蛋白及mRNA表达明显上调(P<0.05);肺组织PGI2、TXA2和LTB4含量增多(P<0.05);肺通透性指数、肺W/D比值及肺组织病理形态学评分明显增高(P<0.05)。相同通气模式下,PIM组及PPM组大鼠肺组织PLCE1和C-PLA2蛋白及mRNA表达水平、肺内PGI2、TXA2和LTB4含量及肺损伤评价各项指标较WIM组及WPM组大鼠均明显降低(P<0.05)。结论下调PLCE1可以通过抑制C-PLA2活减轻MV导致的PMVEC通透性增加,发挥肺保护作用,提示PLCE1可能是抗VILI治疗的一个潜在干预作用的靶点。
杨国梅王文法王莉田玲芳刘睿罗静
关键词:呼吸机相关性肺损伤内皮细胞
细胞通透性环肽及其用途
本文阐述抑制MDM2或MDM2和MDM4的环肽、含有所述环肽的药物组合物和使用所述环肽抑制MDM2或MDM2和MDM4的方法。
C·派伊J·施沃赫特A·西尔维斯特里

相关作者

李林
作品数:108被引量:90H指数:4
供职机构:南京工业大学
研究主题:荧光探针 纸基 细胞通透性 探针 双光子
黄维
作品数:2,237被引量:1,743H指数:15
供职机构:南京工业大学
研究主题:钙钛矿 铱配合物 共轭聚合物 咔唑 磷光
于海波
作品数:70被引量:12H指数:3
供职机构:辽宁大学环境学院
研究主题:罗丹明 荧光探针 细胞通透性 PH荧光探针 线粒体
郭晓华
作品数:31被引量:124H指数:9
供职机构:南方医科大学
研究主题:晚期糖基化终产物 内皮细胞通透性 肺微血管内皮细胞 内皮细胞 病理学与病理生理学
宋有涛
作品数:235被引量:324H指数:9
供职机构:辽宁大学
研究主题:朊病毒 水力空化 荧光探针 SUB 光催化剂