搜索到9182篇“ 细胞外调节蛋白激酶“的相关文章
- β_(2)-肾上腺素能受体通过β-抑制蛋白/细胞外调节蛋白激酶通路在病毒性心肌炎中的机制研究
- 2025年
- 目的:探究β_(2)-肾上腺素能受体(β_(2)-AR)通过β-抑制蛋白(β-arrestin)/细胞外调节蛋白激酶(ERK1/2)通路在病毒性心肌炎(VMC)小鼠心肌损伤中的可能作用机制。方法:将40只小鼠随机分为:对照组、VMC组、抑制β_(2)-AR组及抑制β-arrestin组,每组10只。超声心动图检测小鼠Tie指数、射血分数(EF)及左室短轴缩短率(FS)。HE染色检测心肌组织病理结构;Tunel试剂盒检测心肌凋亡水平;免疫荧光染色检测心肌组织β_(2)-AR、β-arrestin、ERK1/2蛋白水平;ELISA试剂盒检测血清肌酸激酶(CK)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)含量。结果:与对照组比较,VMC组小鼠Tie指数增加,EF、FS减少(均P<0.05),小鼠心肌组织结构疏松紊乱、炎性细胞大量浸润,心肌细胞凋亡增加,心肌组织β_(2)-AR、β-arrestin及ERK1/2表达增加,血清CK与AST含量增加(均P<0.05);与VMC组比较,抑制β_(2)-AR组小鼠Tie指数减少,EF、FS增加(均P<0.05),小鼠心肌组织损伤改善,心肌细胞凋亡减少,心肌组织β_(2)-AR、β-arrestin及ERK1/2表达减少。与VMC组比较,抑制β-arrestin组小鼠心肌组织β-arrestin及ERK1/2表达减少,血清CK与AST含量减少(均P<0.05)。结论:抑制β_(2)-AR可通过下调β-arrestin/ERK1/2通路改善VMC小鼠心功能异常及心肌损伤。
- 孙艳艳师艳莉程浩洋沈玉珏田洪森
- 关键词：病毒性心肌炎心肌损伤心功能小鼠
- 丝裂原活化蛋白激酶/细胞外调节蛋白激酶通路在动静脉内瘘术后内膜增生部位血管组织和细胞中的表达及意义
- 2024年
- 目的探讨丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)/细胞外调节蛋白激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)通路在动静脉内瘘术后内膜增生部位血管组织中的表达及意义,初步探索抑制MAPK/ERK通路对肌成纤维细胞自噬及增殖过程的影响。方法选取2023年1月至3月期间在海南医学院第一附属医院肾内科行动静脉内瘘重建术的患者6例,观察组收集动静脉内瘘重建术患者内膜增生严重部位的静脉血管组织,对照组为重建术中需结扎的侧支正常静脉组织。术前收集患者的一般资料,超声测量拟切取部位血管内径及内膜厚度,蛋白质印迹法检测血管组织中磷酸化细胞外调节蛋白激酶(phosphorylation-extracellular regulat-ed protein kinases 1/2,p-ERK1/2)、B细胞淋巴瘤/白血病-2蛋白相互作用蛋白1(myosin-like B cell lymphoma/lewkmia-2 interacting protein1,Beclin^(-1))、增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)蛋白的表达水平,并分析其与静脉内膜厚度的相关性。以肌成纤维细胞为研究对象,尿毒症血清培养,并予ERK1/2抑制剂去氢钩藤碱(Corynoxeine)干预,提取细胞总蛋白及RNA,蛋白质印迹法及实时定量PCR检测Beclin^(-1)及PCNA的表达变化。结果入组患者透析过程中均存在血流量不足,灰阶超声提示动静脉内瘘狭窄处静脉内膜明显增厚[(0.143±0.014)cm比(0.097±0.016)cm],血管腔内径为(0.166±0.028)cm。蛋白质印迹法结果显示,与正常侧支部位血管组织相比较,内膜严重增生部位血管组织中p-ERK1/2、Beclin^(-1)、PCNA蛋白的表达明显增加,差异有统计学意义(均P<0.05)。观察组静脉内膜厚度与p-ERK1/2、Beclin^(-1)、PCNA蛋白的表达水平均呈正相关(R2=0.929、0.702、0.789,均P<0.05)。在细胞模型上,与正常对照组相比较,尿毒症血清组自噬相关指标Beclin^(-1)及增殖相关指标PCNA的表达明显升高,差异有统计学意义(均P<0.05)。而加入ERK特�
- 王自强韦泽丰郑金花朱永俊程颖吕潇阳
- 关键词：丝裂原活化蛋白激酶细胞外调节蛋白激酶动静脉内瘘内膜增生
- 烟曲霉感染时糖尿病小鼠中性粒细胞经细胞外调节蛋白激酶1/2通路调控NADPH氧化酶2影响细胞内活性氧的研究
- 2024年
- 目的探讨烟曲霉感染时糖尿病小鼠中性粒细胞经细胞外调节蛋白激酶1/2(ERK1/2)通路对NADPH氧化酶2(NOX2)调节进而影响细胞内活性氧的产生。方法选取5周龄雄性C57BL/6小鼠24只,体质量(18±2)g,体质量范围为16~20 g,分为对照组(n=12,正常雄性C57BL/6小鼠)与糖尿病组(n=12,按照2型糖尿病小鼠模型建立)。烟曲霉菌丝分别与对照组和糖尿病组小鼠中性粒细胞进行孵育6 h,比较p47phox、gp91phox和抗磷酸化p47phox(P-p47phox)相对表达量。采用免疫荧光法对中性粒细胞染色,比较gp91phox和P-p47phox的阳性率。烟曲霉菌丝分别与对照组和糖尿病组小鼠中性粒细胞共孵育6 h,在刺激前后分别检测中性粒细胞ERK1/2蛋白和抗磷酸化ERK1/2(P-ERK1/2)相对表达量的表达。对照组与糖尿病组中性粒细胞分别加入和不加入PD98059(20μmol/L),处理30 min,之后每组均加入烟曲霉菌丝刺激6 h,检测P-ERK1/2、P-p47phox和gp91phox的表达及细胞内活性氧相对量,比较上清液中瘤坏死因子-α(TNF-α)与白细胞介素-1β(IL-1β)含量。结果孵育后,糖尿病组+烟曲霉gp91phox(1.040±0.088)高于对照组+烟曲霉(0.810±0.066),糖尿病组+烟曲霉P-p47phox(0.690±0.059)高于对照组+烟曲霉(0.538±0.044),糖尿病组+烟曲霉gp91phox阳性率[(33.9±3.8)%]高于对照组+烟曲霉[(22.0±3.0)%],糖尿病组+烟曲霉P-p47phox阳性率[(28.8±3.3)%]高于对照组+烟曲霉[(18.7±2.6)%],糖尿病组+烟曲霉P-ERK1/2(0.890±0.075)高于对照组+烟曲霉(0.694±0.057),对照组+PD98059+烟曲霉的P-ERK1/2(0.133±0.020)、P-p47phox(0.151±0.033)、gp91phox(0.112±0.019)低于对照组+烟曲霉[(0.712±0.072)、(0.455±0.016)、(0.356±0.066)],糖尿病组+PD98059+烟曲霉的P-ERK1/2(0.379±0.078)、P-p47phox(0.281±0.030)、gp91phox(0.291±0.062)低于糖尿病组+烟曲霉[(0.910±0.084)、(0.606±0.011)、(0.515±0.058)],糖尿病组+PD98059+烟曲霉细胞内活性氧相对量[(2.438±0.261)A.U.]低于糖尿病组+烟曲霉[(3.2
- 许向华赵红伟付营
- 关键词：糖尿病中性粒细胞活性氧
- 厚壳贻贝细胞外调节蛋白激酶基因McERK的克隆及其在附着变态中的作用被引量：1
- 2024年
- 为解析细胞外调节蛋白激酶(extracellular regulated protein kinases,ERK)基因(McERK)在厚壳贻贝(Mytilus coruscus)附着变态过程中的作用机制,采用RACE技术、系统进化分析和Real-time PCR等方法,对McERK基因分子特点和表达情况进行了研究。结果表明:McERK基因序列全长为1236 bp,开放阅读框为846 bp,可编码281个氨基酸,具有典型的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶结构域S_TKc;系统进化树分析显示,厚壳贻贝与加州贻贝(M.californianus)、地中海贻贝(M.galloprovincialis)和欧洲贻贝(M.edulis)的ERK聚为一支,且与欧洲贻贝序列的一致性最高(74.27%);荧光定量PCR分析显示,McERK基因在厚壳贻贝成贝各组织中广泛表达,在外套膜、唇瓣、鳃和血细胞中均有较高的表达量,其在担轮幼虫到稚贝的各个发育阶段均有表达,且在眼点幼虫阶段的表达量显著高于稚贝阶段(P<0.05);利用RNA干扰技术敲降眼点幼虫McERK基因后,幼虫变态率显著降低(P<0.05)。研究表明,McERK基因可能参与调控厚壳贻贝幼虫附着变态过程,本研究结果可为探究McERK调控厚壳贻贝的发育过程提供数据支持。
- 刘甜甜侯金杞马蕃杨金龙梁箫
- 关键词：厚壳贻贝基因克隆
- 细胞外调节蛋白激酶通路在氟康唑耐药白色念珠菌阴道炎中的作用
- 尹玉君
- Y-box结合蛋白1通过细胞外调节蛋白激酶信号通路介导肝癌细胞对索拉非尼耐药被引量：1
- 2023年
- 目的探讨Y-box结合蛋白1(YB-1)在肝癌细胞对索拉非尼耐药中的作用及其可能的机制。方法分别构建过表达及敲低YB-1的慢病毒载体,单独或联合索拉非尼刺激人肝癌细胞株HepG2、Huh7细胞。过表达部分实验共计分为4组:过表达对照组(Lv-NC)、YB-1过表达组(Lv-YB-1)、过表达对照联合索拉非尼孵育组(Lv-NC+sorafenib)、YB-1过表达联合索拉非尼孵育组(Lv-YB-1+sorafenib)。敲低部分实验也分为4组:敲低对照组(Lv-shNC)、YB-1敲低组(Lv-shYB-1)、敲低对照联合索拉非尼孵育组(Lv-shNC+sorafenib)、YB-1敲低联合索拉非尼孵育组(Lv-shYB-1+sorafenib)。末端脱氧核苷酸转移酶介导的脱氧三磷酸尿苷缺口末端标记染色检测细胞凋亡的发生情况,蛋白质印迹法检测细胞外调节蛋白激酶(ERK)信号通路的关键蛋白磷酸化(p)-ERK、ERK的蛋白表达水平,并通过ImageJ软件进行定量分析。进行裸鼠皮下成瘤实验,并予索拉非尼治疗,在体内验证YB-1对索拉非尼疗效的影响。2组数据之间的比较采用独立样本t检验;3组及以上数据间的比较应用单因素方差分析。结果索拉非尼可以促进肝癌细胞凋亡的发生,而过表达YB-1抑制细胞凋亡,同时还可以抵抗索拉非尼对凋亡的促进作用;相反,敲低YB-1可促进细胞凋亡,还可以增强索拉非尼对细胞凋亡的诱导作用。此外,索拉非尼孵育可下调p-ERK的水平(HepG2:Lv-NC 0.685±0.143,Lv-NC+sorafenib 0.315±0.168,P<0.05;Huh7:Lv-NC 0.576±0.078,Lv-NC+sorafenib 0.150±0.131,P<0.01),过表达YB-1可抵抗索拉非尼所诱导的p-ERK的降低(HepG2:Lv-NC+sorafenib 0.315±0.168,Lv-YB-1+sorafenib 0.688±0.042,P<0.05;Huh7:Lv-NC+sorafenib 0.150±0.131,Lv-YB-1+sorafenib 0.553±0.041,P<0.05);而敲低YB-1可进一步增强索拉非尼引起的p-ERK下调(HepG2:Lv-shNC+sorafenib 0.911±0.252,Lv-shYB-1+sorafenib 0.500±0.201,P<0.05;Huh7:Lv-shNC+sorafenib 0.577±0.082,Lv-shYB-1+sorafenib 0.350±0.143,P<0.05),并在裸鼠体内得到进一
- 刘婷谢肖立陈圣雄王一军姜慧卿
- 关键词：肝细胞癌细胞外调节蛋白激酶索拉非尼
- Hsa_circ_0000392靶向miR-145-5p/CRKL轴调控细胞外调节蛋白激酶通路影响宫颈癌的辐射敏感性
- 2023年
- 目的探讨hsa_circ_0000392(circ_0000392)对宫颈癌细胞放疗敏感性的影响及其潜在作用机制。方法收集2016—2019年于河南大学淮河医院首次经病理诊断明确的42例宫颈癌患者的宫颈癌组织和癌旁正常组织,根据患者对放射治疗的反应,将癌组织分为放疗敏感和放疗耐受。采用实时荧光定量聚合酶链反应和Western blot法检测宫颈癌放疗敏感和放疗耐受肿瘤组织及宫颈癌Hela、SiHa细胞中circ_0000392、miR-145-5p、CT10激酶调节子样蛋白(CRKL)的表达。将siRNA circ_0000392、miR-145-5p mimic、miR-145-5p inhibitor、pcDNA 3.1-CRKL及其阴性对照分别转染至Hela和SiHa细胞,细胞经辐射诱导后,采用克隆形成实验检测细胞存活能力,流式细胞术检测细胞凋亡情况,Western blot检测Bax和Bcl-2、磷酸化细胞外调节蛋白激酶(p-ERK)1/2和细胞外调节蛋白激酶(ERK)1/2的表达。双荧光素酶报告基因实验验证circ_0000392、miR-145-5p和CRKL之间的靶向关系。裸鼠成瘤实验观察circ_0000392对宫颈癌体内放疗敏感性的影响。结果circ_0000392和CRKL在宫颈癌放疗耐受组织和癌细胞中均呈高表达,miR-145-5p在宫颈癌放疗耐受组织和癌细胞中呈低表达(均P<0.05)。si-circ_0000392#1+6 Gy组Hela和SiHa细胞的克隆形成数分别为(78.67±10.97)个和(71.00±9.54)个,均低于si-Ctrl+6 Gy组[分别为(176.00±22.27)个和(158.33±17.56)个,均P<0.05],细胞凋亡率分别为(41.55±3.40)%和(31.41±3.29)%,均高于si-Ctrl+6 Gy组[分别为(15.91±1.37)%和(13.70±1.89)%,均P<0.05],si-circ_0000392#1+6 Gy组细胞中Bax蛋白表达水平高于si-Ctrl+6 Gy组,Bcl2蛋白表达水平低于si-Ctrl+6 Gy组(均P<0.05)。si-circ_0000392#1+miR-145-5p inhibitor+6 Gy组Hela和SiHa细胞的克隆形成数分别为(171.33±25.01)个和(137.00±21.66)个,均高于si-circ_0000392#1+inhibitor NC+6 Gy组[分别为(84.67±17.79)个和(71.00±11.00)个,均P<0.05],细胞凋亡率分别为(17.41±2.58)%和(15.96±1.25)%,均低于si-circ_000039
- 田君王宁王琛吴大鹏王晨辉丁肖杰王玙珂
- 关键词：宫颈肿瘤放疗敏感性
- 辣蓼黄酮乙酸乙酯部分抑制炎症因子产生及p38丝裂原活化蛋白激酶和细胞外调节蛋白激酶1/2蛋白磷酸化调节猪圆环病毒2型诱导的炎症反应被引量：2
- 2023年
- 本研究旨在探索辣蓼黄酮乙酸乙酯部分(FEA)抵御猪圆环病毒2型(PCV2)感染猪肺泡巨噬细胞(3D4/2细胞)诱导的炎症反应的分子机理。试验共设置7个组,分别为空白对照组、PCV2感染组、脂多糖阳性对照组、芦丁阳性对照组和FEA药物组(25、50和100μg/mL),每组4个重复。检测不同浓度FEA作用3D4/2细胞后的细胞活性;接种PCV2后,检测白细胞介素-6(IL-6)、干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素-10(IL-10)含量及环氧合酶-1(COX-1)、环氧合酶-2(COX-2)活性;定量PCR检测COX-2、IL-6、IL-10、原癌基因(c-myc和c-fos)、氨基酸端激酶(c-jun)、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)和细胞外调节蛋白激酶1/2(ERK1/2)的mRNA相对表达水平;Western-Blotting检测p38 MAPK、ERK1/2的蛋白相对表达水平。结果表明,25、50和100μg/mL的FEA对3D4/2细胞活力无显著影响(P>0.05)。与PCV2感染组相比,25、50和100μg/mL FEA药物组的IL-6、IL-10和IFN-γ含量显著或极显著降低(P<0.05或P<0.01),25和100μg/mL FEA药物组的COX-1和COX-2活性显著降低(P<0.05),25、50和100μg/mL FEA药物组的IL-6、IL-10、COX-2和c-fos的mRNA相对表达水平显著或极显著降低(P<0.05或P<0.01),25和100μg/mL FEA药物组的c-jun、c-myc、MAPK和ERK的mRNA相对表达水平显著或极显著降低(P<0.05或P<0.01),25、50和100μg/mL FEA药物组的p38 MAPK、ERK1/2的蛋白相对表达水平极显著降低(P<0.01)。由此可见,FEA通过减少炎症因子的产生并抑制p38 MAPK和ERK1/2蛋白磷酸化而调节PCV2诱导的3D4/2细胞的炎症反应。
- 陈奇韦玉衡谢小东赵怡王秋华于美玲韦英益胡庭俊
- 关键词：炎症猪圆环病毒2型
- miR-17-5p对缺血性脑卒中大鼠的神经保护作用及其对细胞外调节蛋白激酶1/2信号通路的影响
- 2023年
- 目的:观察miR-17-5p对缺血性脑卒中大鼠的神经保护作用及其对胞外调节蛋白激酶1/2(ERK1/2)信号通路的影响。方法:将大鼠随机数字法分为模型组、miR-17-5p mimics组、miR-17-5p inhibitor组。建模后,模型组经尾静脉注射10 mL/kg生理盐水,miR-17-5p mimics组、miR-17-5p inhibitor组分别经尾静脉注射7μL miR-17-5p mimics、miR-17-5p inhibitor与RNAi脂质体转染试剂的混合溶液。各组大鼠苏醒后的24 h进行神经功能评分,测定脑梗死体积、大鼠脑组织含水量,检测缺血侧大脑皮质细胞凋亡率,caspase-3、Bax、Bcl-2和ERK1/2蛋白表达。结果:miR-17-5p mimics组的神经功能障碍评分、脑梗死体积、脑组织含水量、缺血侧大脑皮质细胞凋亡率明显低于模型组,miR-17-5p inhibitor组的神经功能障碍评分、脑梗死体积、脑组织含水量、缺血侧大脑皮质细胞凋亡率显著高于其他2组;miR-17-5p mimics组大鼠缺血脑组织中caspase-3、Bax蛋白表达明显低于模型组,Bcl-2、p-ERK1/2蛋白表达高于模型组;miR-17-5p inhibitor组大鼠缺血脑组织中caspase-3、Bax、p-ERK1/2蛋白表达显著高于其他2组,Bcl-2蛋白表达低于其他2组。结论:miR-17-5p对缺血性脑卒中大鼠的脑损伤具有一定的保护作用,miR-17-5p可抑制ERK1/2信号通路激活。
- 杨华李金波
- 关键词：缺血性脑卒中神经保护
- 人类白细胞抗原特异性抗体通过活化细胞外调节蛋白激酶信号诱导单核细胞定向分化被引量：1
- 2022年
- 目的探讨肾移植术后抗人类白细胞抗原特异性抗体(HLADSA)诱导人单核细胞向巨噬细胞分化的机制。方法构建人内皮细胞(HAEC)与单核细胞(Mon)体外共培养模型。分为未活化(UT)组、完整HLADSA(Ab)活化组、Ides酶切HLADSA活化组(Fab)组,并添加中和抗体/融合蛋白阻断,流式细胞技术分析HLADSA活化后的HAEC对Mon分化及胞内信号转导的影响。采用方差分析检验。结果Ab活化组Mon胞内细胞外调节蛋白激酶(ERK)1/2T202/Y204磷酸化水平高于UT组(2.163±0.311,F=23.070,MD=-1.163,P<0.01),Fab组ERK仅部分磷酸化(1.211±0.072,F=23.070,MD=-0.211,P<0.05),且低于Ab组(MD=0.952,P<0.05)。U0126可完全阻断Ab和Fab活化组Mon胞内ERK磷酸化(1.045±0.087,F=22.240,MD=0.449,P<0.001;0.992±0.032,F=9.474,MD=0.122,P<0.01)。rPSGL-1-Ig及ICAM-1抗体预处理HAEC均可部分阻断Ab诱导的ERK磷酸化(1.375±0.168,F=11.020,MD=0.410,P<0.01;1.509±0.188,F=11.020,MD=0.277,P<0.01)。单用P-选择素糖蛋白配体1(PSGL-1)抗体、CD18抗体预处理Mon后均可完全抑制Fab活化诱导的ERK磷酸化(1.025±0.035,F=21.050,MD=0.242,P<0.01;0.982±0.031,F=21.050,MD=0.285,P<0.01),而单用CD11a抗体仅能部分抑制(1.117±0.027,F=21.050,MD=0.150,P<0.05),CD11b抗体则无法抑制(1.205±0.033,F=21.050,MD=0.062,P>0.05)。CD64抗体预处理Mon可部分抑制Ab诱导的ERK磷酸化(1.438±0.045,F=26.250,MD=0.415,P<0.05),但当联合使用CD64及CD32抗体时可完全抑制(1.239±0.049,F=26.250,MD=0.614,P<0.01)。结论Ab活化后的HAEC主要通过激活Mon胞内ERK信号诱导后者分化。
- 解颖欣侯君范琦吴梦涵童玲黄玉华何军侯建全魏雪栋
- 关键词：肾移植单核细胞
