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O-GlcNAc转移酶介导的Kruppel样因子5 O-GlcNAc糖基化修饰调控细胞周期 {1 }D 1 参与结直肠癌发生、发展实验研究 被引量：3 2023年 细胞周期 {1 }D 1 (CCD N1 )表达参与结直肠癌(CRC)发生、发展的分子机制。方法:采用生物信息学方法分析KLF5 mRNA和蛋白在CRC组织中的表达。采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测CRC细胞 中KLF5的表达水平,CCK-8法检测细胞 增殖,流式细胞 仪检测细胞周期 。通过生物信息学方法分析KLF5的靶基因和潜在结合位点,并通过双荧光{1 }酶实验证实KLF5蛋白可与CCD N1 结合,采用RT-qPCR检测KLF5对CCD N1 mRNA的影响。抑制KLF5并过表达CCD N1 ,分析KLF5是否通过正调控CCD N1 促进细胞 增殖和促进细胞 进入G 1 期。采用生物信息学分析KLF5蛋白是否存在O-GlcNAc糖基化位点,OGT mRNA和蛋白在结直肠癌组织中的表达以及OGT和KLF5表达的相关性。使用OGT抑制剂OSMI-1 处理CRC细胞 ,蛋白质免疫印迹法(Western blot)分析KLF5蛋白表达,O-GlcNAc糖基化蛋白表达水平通过免疫荧光实验检测。并用Western blot法检测OSMI-1 和放线菌酮(CHX)处理后KLF5蛋白的稳定性。最后抑制OGT并过表达KLF5,分析OGT是否通过正调控KLF5促进CCD N1 表达。结果:KLF5 mRNA和蛋白在CRC中高表达。KLF5在CRC细胞 中高表达并可促进细胞 增殖和促进细胞 进入G 1 期。CCND 1 是KLF5的靶基因并可与CCND 1 靶向结合。KLF5通过正调控CCND 1 促进细胞 增殖和促进细胞 由G 1 期向S期转化。生物信息学分析证实KLF5蛋白存在O-GlcNAc糖基化位点。OGT mRNA和蛋白在CRC中高表达,并且OGT和KLF5表达水平呈正相关。抑制OGT表达可降低O-GlcNAc糖基化蛋白和KLF5蛋白水平,并可降低KLF5蛋白的稳定性。OGT通过正调控KLF5上调CCND 1 表达。结论:KLF5通过正调控CCND 1 促进CRC细胞 增殖,并促进细胞 进入G 1 期。OGT通过O-GlcNAc糖基化修饰稳定KLF5并上调CCND 1 表达。关键词：细胞周期素D1 细胞周期 细胞周期 {1 }D 1 对HBV转录和复制的影响被引量：3 2023年 细胞周期 {1 }D 1 (cyclin D 1 ,基因名CCND 1 )对HBV复制的影响及其机制。方法 利用GSE84044数据集,采用Spearman秩相关分析HBV相关肝纤维化患者肝组织基因表达水平与血清HBV D NA载量之间的相关性。在HBV细胞 复制模型中瞬时表达cyclin D 1 及cyclin D 1 持续激活突变体(T286A)蛋白,使用时间分辨免疫荧光及实时荧光定量PCR实验分别检测细胞 培养上清液中的HBsAg、HBeAg及HBV D NA水平,Western blot检测细胞 内HBV core蛋白,反转录-实时荧光定量PCR法检测细胞 内HBV RNA,双荧光{1 }酶报告基因实验检测cyclin D 1 对HBV基本核心启动子(BCP)活性的影响。利用GSE831 48数据集,分析CCND 1 与HBV相关调控因子表达的相关性。正态分布的计量资料两组间比较采用独立样本t检验;非正态分布的计量资料两组间比较采用Mann-Whitney U检验。结果 在GSE84044数据中,HBV相关肝纤维化患者的肝组织中有7个细胞周期 调控基因与HBV D NA载量呈显著负相关(r值均<-0.3,P值均<0.05),其中包括CCND 1 基因(r=-0.474,P<0.001 )。外源表达cyclin D 1 及cyclin D 1 T286A突变体能降低HBV复制细胞 模型培养上清液中的HBsAg、HBeAg及HBV D NA水平,以及细胞 内core蛋白和HBV RNA水平;外源表达cyclin D 1 显著抑制了HBV BCP的转录活性;且慢性乙型肝炎患者肝组织中CCND 1 表达水平与抑制HBV复制的APOBEC3G(r=0.575,P<0.001 )、SMC5(r=0.341 ,P<0.001 )和FOXM1 (r=0.333,P<0.001 )表达呈显著正相关,而与HBV进入受体NTCP(r=-0.51 1 ,P<0.001 )和HBV复制正向调控转录因子HNF1 α(r=-0.430,P<0.001 )表达呈显著负相关。在HepG2细胞 中过表达cyclin D 1 降低HNF1 α及NTCP转录水平。结论 cyclin D 1 抑制HBV的转录和复制,可能与其下调HNF1 α及NTCP表达有关。关键词：乙型肝炎病毒 细胞周期蛋白D1 病毒复制 基因转录 位点特异D NA甲基化调控{1 }素 D 1 基因 2023年 D NA甲基化是基因表达调控的重要方式,一般被认为以CpG岛形式发挥作用;近年的研究表明,位点特异的D NA甲基化以元件(cis-regulatory element)的形式在生物微进化以及基因精细调控中发挥重要作用。我们的研究结果显示,曲古抑菌素 A(trichostatin A,TSA)导致细胞周期 蛋白D 1 基因表达下调,以及其核心启动子的+65到+77之间的两段串联CpG序列发生D NA甲基化。报告基因结果显示,由细胞周期 素 D 1 核心启动子片段驱动的报告基因活性在TSA处理后下降到原来0.1 2,而前段(A)突变与后段(B)突变时,报告基因活性分别下降到原来1 /7.6与1 /8.36,双突变则下降到原来1 /7.51 。对于CMV启动子嵌合1 5 bp片段驱动的报告基因活性,野生型、A、B与AB双突变型报告基因活性分别下降1 /1 .48、1 /1 .1 7、1 /1 .51 以及1 /1 .21 。体外甲基化研究结果显示,与对照组相比,M.SssⅠ处理组的启动子活性中,野生型活性下降到原来1 /8800,A突变型活性下降到原来1 /2700,B突变型活性下降到原来1 /41 56,双突变型活性下降到原来1 /6222。应用M.HhaⅠ处理进一步区分甲基化位点,A和B突变型报告基因活性分别下降到原来1 /1 .1 1 和1 /1 .40。有趣的是,比对发现劳亚兽总目的+66位点为T。由此,我们联合应用D NA定点突变与体外D NA甲基化模拟技术,研究了细胞周期 蛋白D 1 基因位点D NA甲基化元件的作用。我们的研究表明,细胞周期 蛋白D 1 基因核心启动子的+65位点的甲基化在转录调控过程中可能发挥关键作用,为位点特异甲基化在基因精细调控的机制研究提供实验数据。关键词：转录调控 结直肠腺癌术后组织中细胞周期 {1 }A1 、E与磷酸酶及张力蛋白同源蛋白的关系 被引量：1 2018年 细胞周期 {1 }(Cyclin)A1 、Cyclin E和磷酸酶及张力蛋白同源蛋白(PTEN)的表达,分析三者在不同临床病理特征中的意义及相关性。方法 1 02例结直肠腺癌术后组织为观察组,距肿瘤边缘>5 cm的非肿瘤性结肠黏膜组织23例为对照组。应用免疫组化SP法检测两组中Cyclin A1 、Cyclin E和PTEN的表达。结果观察组中Cyclin A1 和Cyclin E的表达明显高于对照组,PTEN表达明显低于对照组(P<0.01 )。观察组中Cyclin A1 、Cyclin E和PTEN阳性率均与肿瘤最大径和增殖指数相关,Cyclin A1 、Cyclin E表达与肿瘤浸润深度和脉管累犯相关。相关性分析显示观察组中Cyclin A1 和Cyclin E表达呈正相关。结论结直肠腺癌组织中Cyclin A1 、Cyclin E和PTEN异常表达对肿瘤形成和进展均有一定促进作用。Cyclin A1 和Cyclin E具有正向协同作用。关键词：胃腺癌 细胞周期素E 细胞周期 {1 }D 1 与增殖细胞 核抗原在人脑胶质瘤中表达被引量：2 2018年 细胞周期 {1 }D 1 (Cyclin D 1 )与增殖细胞 核抗原(Proliferating cell nuclear antigen,PCNA)在脑胶质瘤的表达及其意义。方法应用免疫组织化学法检测1 6例正常脑组织、28例低级别脑胶质瘤组织和20例高级别脑胶质瘤中Cyclin D 1 与PCNA的蛋白表达及其差别,并采用Spearman等级相关法分析Cyclin D 1 与PCNA与脑瘤发生的相关性。结果正常脑组织、低级别脑胶质瘤组织和高级别脑胶质瘤中,Cyclin D 1 蛋白的阳性比例分别为3/1 6、1 4/28和1 5/20,3组之间均有显著性差异(P<0.01 )。PCNA蛋白阳性的比例分别为4/1 6、1 3/28和1 6/20,3组之间差异有统计学意义(P<0.01 )。用Spearman等级相关法证实Cyclin D 1 与PCNA在低级别脑胶质瘤和高级别脑肿瘤中正相关(P<0.05),而在正常脑组织中无相关性(P>0.05)。结论 PCNA与Cyclin D 1 在脑胶质瘤细胞 中表达增加并与肿瘤级别呈正相关,提示二者可以在临床上作为肿瘤发生及级别的指征。关键词：胶质瘤 细胞周期蛋白D1 增殖细胞核抗原 细胞周期 {1 }D 1 G870A基因多态性与胃癌易感性关系的Meta分析被引量：1 2018年 细胞周期 {1 }D 1 （CCND 1 ）基因G870A多态性与胃癌易感性的关系。[方法]通过关键词与主题词检索Pub Med,Ovid,CNKI,维普和万方数据库中有关CCND 1 基因G870A多态性与胃癌易感性的相关性研究,数据分析应用Review Manager5.3和STATA 1 0.0软件。[结果 ]纳入6篇文献,包括7个病例-对照试验研究,共计1 283例胃癌患者为病例组与1 760例非肿瘤患者为对照组。Meta分析结果显示,总人群中,CCND 1 基因G870A多态性与胃癌发生风险之间无显著相关性（A vs G：OR=0.90,95%CI：0.77~1 .06,P=0.21 ;AA＋AG vs GG：OR=0.85,95%CI：0.60~1 .21 ,P=0.37;AG＋GG vs AA：OR=1 .1 5,95%CI：0.97~1 .37,P=0.1 0）。在种族与肿瘤类型的亚组分层分析中,结果同样显示CCND 1 基因G870A多态性与胃癌的发生风险无明显相关性。[结论 ]CCND 1 基因G870A多态性可能与胃癌的发生风险无关。关键词：胃肿瘤 细胞周期蛋白D1 多态性 META分析 聚焦超声治疗外阴上皮内非瘤变后对细胞周期 {1 }D 1 和周期 {1 }依赖性蛋白激酶4表达的影响 被引量：3 2018年 D V)后{1 }素 D 1 (Cyclin D 1 )和周期 素 依赖性蛋白激酶4(cyclin-dependent kinase 4,CD K 4)的表达及意义。方法回顾性分析201 5年8月至201 6年7月西南医科大学附属医院妇产科收治的20例NNED V患者的皮损标本,设为病例组,经聚焦超声治疗后5~1 2月(平均8月)在原活检部位再次取材;选取因各种外阴疾病就诊局部活检后经病理证实为正常组织者1 0例为正常组。采用免疫组织化学法研究NNED V患者聚焦超声治疗前后皮损中Cyclin D 1 和CD K 4蛋白的表达。结果 NNED V组织中Cyclin D 1 和CD K 4蛋白阳性表达组织学评分治疗前高于治疗后及正常组(P<0.05),治疗后与正常组比较差异无统计学意义(P>0.05)。治疗前NNED V患者Cyclin D 1 和CD K 4在上皮组织棘{1 8}层/基底{1 8}层阳性表达组织学评分比值均高于治疗后及正常组(P<0.05),治疗后与正常组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论聚焦超声可以有效阻断NNED V组织中Cyclin D 1 、CD K 4的高表达而达到治疗目的,治疗后Cyclin D 1 和CD K 4阳性{1 8}在NNED V的上皮组织各层中的分布趋于正常。关键词：细胞周期素D 聚焦超声 信号转导与转录激活因子3、细胞周期 {1 }D 1 在胆管癌组织中的表达及意义 被引量：2 2017年 细胞周期 {1 }D 1 (Cyclin D 1 )在胆管癌组织中的表达并分析其临床意义。方法采用免疫组织化学技术检测STAT3、Cyclin D 1 在70例胆管癌组织和1 5例非肿瘤胆道上皮组织中的表达情况。结果免疫组织化学结果显示70例胆管癌组织和1 5例非肿瘤胆道上皮组织中STAT3、Cyclin D 1 阳性表达率分别为61 .4%、33.3%和42.9%、1 3.3%。STAT3、Cyclin D 1 蛋白在胆管癌组织中的表达均明显高于非肿瘤胆道上皮组织(P<0.05)。STAT3蛋白表达与胆管癌的临床分期、淋巴结转移和组织学分级明显相关(P<0.05);胆管癌组织中Cyclin D 1 蛋白表达与淋巴结转移和组织学分级明显相关(P<0.05)。STAT3与Cyclin D 1 表达呈明显正相关关系(P<0.05)。STAT3、Cyclin D 1 蛋白共阴性表达组生存时间明显长于共阳性表达组(P<0.01 )。结论 STAT3、Cyclin D 1 可能是反映胆管癌发生发展的重要生物学指标。关键词：胆管肿瘤 转录激活因子3 细胞周期素D1 氨磷汀在细胞周期 {1 }D 1 高表达类型肿瘤中的应用 细胞周期 {1 }D 1 （CyclinD 1 ）高表达类型肿瘤中的应用。本发明人通过研究发现氨磷汀具有靶向抑制癌基因CyclinD 1 表达的抑制...丹参含药血清调节大鼠肝星状细胞 TGF-β1 及{1 }素 CyclinD 1 的机制研究 2016年 细胞 内转化生长因子β1 (transforming growth factorβ1 ,TGF-β1 )及{1 }素 CyclinD 1 的机制。方法:将20只Sprague-D awley(SD )大鼠按照随机数字表法随机分为丹参低剂量组(1 .04 g/kg)、中剂量组(2.08 g/kg)、高剂量组(4.1 7 g/kg)、空白组,并分别制备含药血清。体外传代培养肝星状细胞 经1 0 ng/ml血小板衍生生长因子-BB(platelet-derived growth factor-BB,PD GF-BB)诱导后,再给予相应的含药血清干预,37℃培养24 h后收集细胞 。经高效液相色谱法(HPLC)检测血清中丹参成分,q RT-PCR测定视黄酸受体-α(retinoic acid receptorα,RXR-α)及TGF-β1 mRNA,用Western blot法检测α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、Ⅰ型胶原蛋白(CollagenⅠ)及{1 }素 CyclinD 1 蛋白的表达情况。结果:丹参不同剂量处理组中,RXR-α mRNA表达量逐渐增加,而TGF-β1 mRNA、α-SMA蛋白、CollgenⅠ蛋白和CyclinD 1 蛋白表达逐渐降低,且与对照组比有统计学差异。结论:丹参含药血清可能通过促进RXR-α表达,抑制TGF-β1 及CyclinD 1 表达,抑制肝星状细胞 的增殖,进而抑制肝纤维化。关键词：视黄酸受体 细胞周期素D1 肝星状细胞
