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组织蛋白酶B/NLRP3通路对LPS诱导巨噬细胞M1/M2极化的影响
2025年
目的:评价组织蛋白酶B(CTSB)/NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)通路对LPS诱导巨噬细胞极化的影响。方法:体外培养生长状态良好的RAW264.7小鼠单核巨噬细胞系,根据随机数字表法分为3组(n=6):对照组(C组)、LPS组(L组)、LPS+CA074-me(CTSB抑制剂)组(B组)。C组常规培养24 h,L组加入LPS浓度为1μg/ml的培养基培养24 h,B组在LPS诱导前予以CTSB抑制剂CA074-me 30μmol/L预处理1 h后在含LPS 1μg/ml的培养基中共培养24 h。24 h后通过显微镜观察细胞形态变化,通过采用ELISA法测定上清液IL-1β、IL-18的浓度,Western blot检测细胞中组织蛋白酶B前体(pro-CTSB)、成熟组织蛋白酶B(mature-CTSB)、NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)和天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶1(caspase-1)的表达,采用qRT-PCR法检测细胞CD32、诱导型一氧化氮合(iNOS)、精氨酸1(Arg-1)、CD206 mRNA表达水平,流式细胞术检测M1型巨噬细胞表面标志物CD86和M2型巨噬细胞表面标志物CD206阳性表达率。结果:与C组相比,L组和B组细胞形态均改变,细胞变大并出现伪足,细胞上清液中IL-1β、IL-18浓度均上升,pro-CTSB、mature-CTSB、NLRP3、ASC和caspase-1表达升高,CD32、iNOS mRNA表达上调,CD86阳性率、CD206阳性率均上升(P<0.01),B组Arg-1、CD206 mRNA表达上调(P<0.01);与L组相比,B组细胞伪足减少,形态更接近C组,细胞上清液中IL-1β、IL-18浓度下降,mature-CTSB、NLRP3、ASC和caspase-1表达降低,CD32、iNOS mRNA及CD86阳性率下降,pro-CTSB表达、Arg-1、CD206 mRNA表达及CD206阳性率升高(P<0.01)。结论:抑制CTSB/NLRP3通路能够减轻炎症反应,减少LPS诱导的RAW264.7细胞向M1型巨噬细胞极化,促进其向M2型巨噬细胞极化。
王宜博代玉婷蔡江晓李忠林秦伟伟孙立新韩伟
关键词:组织蛋白酶B脂多糖类巨噬细胞
SiRNA下调组织蛋白酶B抑制甲状腺乳头状癌细胞的增殖、迁移及侵袭能力
2025年
目的探究小干扰RNA下调组织蛋白酶B(Cathepsin B;CTSB;CB)对甲状腺乳头状癌TPC-1细胞的增殖、迁移及侵袭能力的影响。方法将TPC-1细胞分成空白对照组、SiRNA-1组(转染CB-siRNA-1);SiRNA-2组(转染CB-siRNA-2);SiRNA-3组(转染CB-siRNA-3);NC组(转染NC-siRNA),通过Western blot法检测CB表达;通过CCK-8、平板单克隆实验、细胞划痕实验及Transwell实验检测细胞增殖、迁移及侵袭能力。结果Western blot结果显示,实验组CB表达较空白组及阴性对照组明显下降,差异有统计学意义(P<0.05)。沉默CB后细胞增殖、迁移及侵袭能力明显减弱,差异有统计学意义(P<0.05)。结论本实验证实利用SiRNA沉默CB后,TPC-1细胞的增殖、迁移及侵袭能力明显减弱,说明CB可能成为PTC基因治疗的有效靶点。
黄婷婷孙坚皓杜君慧吕艳春孙琳琳张凤英
关键词:甲状腺乳头状癌组织蛋白酶B增殖迁移
一种旋毛虫组织蛋白酶B及其编码基因和应用
本发明公开了一种旋毛虫组织蛋白酶B及其编码基因和应用,属于基因工程技术领域。本发明利用食品级L.lactis表达系统,构建TsCB基因的乳酸菌表达系统,通过将L.lactis重组菌株pNZ8149‑TsCB/L.lact...
龙绍蓉姜苗张慧冉廖子漩汪靖靖孙华磊
一种组织蛋白酶B激活型荧光探针、纳米粒子和应用
本发明公开了一种组织蛋白酶B激活型荧光探针,包括双氰基异砜荧光报告单元和组织蛋白酶B特异性切位点GFLG肽链。当CTSB特异性切割GFLG肽链时,会生成具有较强供电子能力氨基的DCO分子,使得探针的荧光发射行为通过一步...
徐冬冬何田尹守春
建鲤真核重组组织蛋白酶B与冷藏鱼片活性氧水平、细胞凋亡的关系及对品质形成的影响
2025年
组织蛋白酶B(cathepsins B,CTS B)是鱼类死后肌肉中最活跃的溶体半胱氨酸蛋白酶之一。同时鱼死后活性氧(reactive oxygen species,ROS)积累可诱导鱼肌肉细胞的凋亡。为探究鱼肉片冷藏期间CTS B与ROS水平、肌肉细胞凋亡之间的潜在关系以及可能对鱼肉片品质形成的影响,该文将真核表达的建鲤CTS B注射于建鲤鱼肉片,4℃冷藏5 d,结果表明冷藏前3 d内,随CTS B活性上升,注射实验组和对照组ROS相对含量、蛋白羰基值、肌肉细胞凋亡率均提高,实验组显著高于对照组,而剪切力与持水力均呈下降趋势,实验组显著低于对照组。冷藏的最后2 d内,2组的细胞凋亡率差异不显著,鱼片品质劣变可能主要与CTS B活性持续显著升高有关。上述结果提示宰后冷藏鱼肉发生肌细胞凋亡,且冷藏初期CTS B活性与ROS氧化可能互相促进、协同发挥作用,加速了鱼肉蛋白氧化和细胞的凋亡。这可能是CTS B除直接的解作用外,导致鱼肉片冷藏期间软化、品质劣变的另一潜在原因。
钱邓帆梁张婕程筝李龙飞汤婕蒋宇维郭淇羽王梓颖吕明哲李冉李树红
关键词:活性氧细胞凋亡鱼肉品质
组织蛋白酶B基因敲除抑制布鲁菌胞内感染
2024年
目的研究组织蛋白酶B(cathepsin B,CTSB)在布鲁菌感染中的作用。方法利用CRISPR/Cas9技术构建ctsb基因敲除的人宫颈癌HeLa细胞株,并检测ctsb敲除对细胞增殖的影响。通过CCK-8法和胞内菌计数检测布鲁菌感染中ctsb敲除对细胞增殖活性和细菌胞内存活的影响,并通过Western印迹检测揭示ctsb调控布鲁菌感染的分子机制。结果成功构建了ctsb基因敲除细胞株;CCK-8结果表明敲除ctsb不影响布鲁菌感染前后的细胞增殖率;胞内菌计数结果显示KO细胞感染4 d后胞内布鲁菌数量显著减少;Western印迹检测结果提示KO细胞在布鲁菌长期感染中自噬相关蛋白表达水平显著下调。结论ctsb基因敲除能够抑制长期感染中布鲁菌的胞内存活,为慢性布鲁菌病的治疗提供了潜在的靶点。
陆菁菁许荷玲张琦黄芳李山虎
关键词:布鲁菌组织蛋白酶B自噬
难治性癫痫儿童血浆激肽释放组织蛋白酶B的表达及其临床意义
2024年
目的:探讨难治性癫痫儿童血浆激肽释放(KLK)、组织蛋白酶B(catB)表达及其临床意义.方法:选取2017年3月至2019年3月河南中医药大学第五临床医学院收治的难治性癫痫患儿43例为研究对象,纳入研究组.选择同期在本院治疗的治疗有效癫痫患儿,同期在本院体检的健康儿童作为对照,分别纳入治疗有效组(n=35)及对照组(n=50).①对3组受试儿血浆KLK、catB,白细胞介素(IL)-6、IL-8、肿瘤坏死因子(TNF)-α水平分别进行统计学分析.②分析研究组患儿血浆KLK、catB水平,分别与其血浆IL-8、IL-6、TNF-α水平的相关关系.③受试者工作特征(ROC)曲线的曲线下面积(AUC),对难治性癫痫的诊断截断值、诊断灵敏度及特异度.④采取多因素非条件Logistic回归分析难治性癫痫临床诊断的独立影响因素.结果:①研究组患儿血浆KLK、catB、IL-6、IL-8、TNF-α水平,均显著高于对照组、治疗有效组,并且差异均有统计学意义(P<0.05).②研究组患儿血浆KLK、catB水平与其IL-6、IL-8、TNF-α水平,均呈正相关关系(r=0.625、0.628、0.657,0.634、0.619、0.664,P<0.05).③血浆KLK、catB水平ROC曲线的AUC分别为0.889、0.856,对难治性癫痫的诊断截断值分别为3.99 U/mL、3.66 U/mL,二者单独诊断难治性癫痫的灵敏度分别为72.10%、72.10%,特异度分别为92.00%、94.00%;二者联合诊断的AUC为0.950,灵敏度为86.00%,特异度为90.70%.④血浆KLK高表达(OR=2.652,95%CI:1.668~4.218,P<0.05),以及catB高表达(OR=2.635,95%CI:1.704~4.075,P<0.05),均是导致患儿发生难治性癫痫的独立危险因素.结论:难治性癫痫儿童血浆KLK、catB水平高表达,对难治性癫痫患儿的临床诊断具有重要参考价值.
刘竹清姜亚召刘园
关键词:难治性癫痫激肽释放酶组织蛋白酶B
豌豆蚜组织蛋白酶B基因的鉴定及功能研究
豌豆蚜(Acyrthosiphon pisum)是世界范围内重要的农业害虫之一,其利用刺吸式口器直接吸食宿主植物的韧皮层汁液,严重时可导致寄主植物枯萎或死亡,从而使农产品质量或产量大幅降低。此外,豌豆蚜还是许多植物病毒的...
马瑞
关键词:豌豆蚜组织蛋白酶B繁殖RNAI
一种组织蛋白酶B靶向激活型PET分子探针及其应用
本发明涉及一种组织蛋白酶B靶向激活型PET分子探针及其应用,属于化学技术领域。本发明提供了一种靶向组织蛋白酶B的分子探针,此分子探针是通过在刺激响应型生物正交反应支架的基础上引入标记基团NOTA以螯合放射性核素,并连接组...
林建国邱玲刘清竹彭莹李惠蓉
连接组织蛋白酶B裂解的10-氨基喜树碱类化合物及其合成方法和应用
本发明公开了式I所示的连接组织蛋白酶B裂解的10‑氨基喜树碱类化合物前药中间体及其合成方法和应用。本发明还公开了式III所示的组织蛋白酶B裂解型10‑氨基喜树碱类衍生物前药及其合成方法和应用。本发明还公开了一种药物组合物...
朱书雷吕伟丁梦园

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黄智铭
作品数:378被引量:901H指数:13
供职机构:温州医科大学
研究主题:肝硬化 应激性溃疡 表达及意义 褪黑素 早期肠内营养
萧树东
作品数:619被引量:8,591H指数:41
供职机构:上海交通大学医学院附属仁济医院
研究主题:幽门螺杆菌 胃癌 幽门螺杆菌感染 胃肿瘤 根除幽门螺杆菌
徐昌隆
作品数:75被引量:300H指数:9
供职机构:温州医科大学
研究主题:溃疡性结肠炎 肝细胞肝癌 组织蛋白酶B 基因多态性 肠道气体
赵小凡
作品数:123被引量:425H指数:13
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研究主题:棉铃虫 中国对虾 抗菌肽 家蝇 基因转化
王金星
作品数:167被引量:683H指数:15
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