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组织重复培养牙周膜干细胞的生物学功能研究
2023年
目的对同一牙周膜组织重复培养获得的原代牙周膜干细胞(periodontal ligament stem cell,PDLSC)的生物学特性和功能进行比较,评价重复培养得到的PDLSC能否用于实验研究和临床治疗。方收集正畸治疗拔除的前磨牙,组织进行PDLSC原代培养。首次传代后收集剩余的牙周膜组织重复进行组织细胞培养,多次培养获得原代PDLSC。每次培养的原代PDLSC进行扩增培养,选取第1、3、5次培养获得的PDLSC分为A、B、C组。分别绘制细胞增殖曲线,STRO-1表面标记物表达的检测鉴定,细胞周期分布检测和观察成骨诱导,测定各组PDLSC端粒长度和端粒酶表达水平。结果三组细胞的STRO-1表达均呈阳性;生长趋势和扩增数量相似;A、B两组细胞周期分布无显著差异(P>0.05),C组与A、B组比较细胞周期分布差异显著(P<0.05);地塞米松诱导三组PDLSC成骨,21d时均有茜素红染色阳性的钙化结节;A、B两组PDLSC端粒长度、端粒酶表达水平均无显著差异(P>0.05),C组PDLSC端粒长度显著长于A、B组(P<0.05),端粒酶表达水平显著高于A、B组(P<0.05)。结论通过同一牙周膜组织培养得到的PDLSC生物学功能相同,但在细胞安全性上是否能够用于实验研究和临床治疗有待进一步的探讨。
张远郑恺忻贺瑞王进涛沈悦钟良军
关键词:牙周膜干细胞组织块法端粒端粒酶
一种组织培养原代干细胞的装置
本实用新型属于细胞培养领域,具体公开了一种组织培养原代干细胞的装置,包括培养筒和堆叠放置在培养筒内的培养皿,培养筒内设置支撑板,支撑板两端安装拉杆,培养筒上端套设密封盖,密封盖中部透气口内覆盖第一透气膜;培养皿侧面开...
李炳根袁牧
组织与酶消化培养人脐带间充质干细胞的比较被引量:3
2021年
目的比较组织与酶消化对分离培养人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)的影响。方选取5根足月妊娠自然分娩的健康婴儿的废弃脐带,采用组织和酶消化进行原代分离培养,比较两种培养方的细胞增殖情况,并测定其细胞表面免疫标志物。结果hUC-MSCs的融合状况:组织培养的第5天,细胞从组织内爬出,培养2周左右细胞融合率可达80%以上;酶消化培养5 d后,可见少量形态不规则的细胞贴壁,培养2周后细胞融合可达40%~50%。hUC-MSCs的增殖情况:组织原代及传代后的hUC-MSCs的增殖速度远高于酶消化,差异有统计学意义(P<0.05)。hUC-MSCs的标志物:组织分离培养的P3细胞CD34、CD45、HLA-DR表达<1%,CD44、CD73、CD90和CD105表达>95%;酶消化分离培养的P3细胞表面CD34、CD45、HLA-DR、CD105表达<1%,CD73、CD90表达>95%。结论组织与酶消化相比,能获得较纯的hUC-MSCs,且方简单、成本低,是获得hUC-MSCs的理想方
袁涛刘文杰王蕾王树玉刘英
关键词:人脐带间充质干细胞酶消化法组织块法生物学特性
对比组织悬液组织建立兔VX2皮下肿瘤模型的差异被引量:3
2020年
背景:目前建立VX2皮下肿瘤模型的方有多种,但建模方各有优劣,能优质高效建立动物肿瘤模型的方方可满足动物肿瘤实验的需求。目的:对比观察不同方建立兔VX2皮下肿瘤模型,探索更简单高效的建模方式,为兔VX2皮下肿瘤实验提供大批量高质量的动物模型奠定基础。方:雄性新西兰大白兔66只。取2只制备VX2荷瘤种兔,再取荷瘤兔肿瘤组织分别制备瘤组织及肿瘤组织悬液备用。实验分为2组:瘤组织悬液组20只,麻醉后于双侧后肢内侧面注射组织悬液0.15 mL;瘤组织组20只,麻醉后于双侧后肢内侧面皮下植入瘤组织。2组分别采用相应接种方式种植2只荷瘤种兔,各传5代。记录并比较2组肿瘤种植时间,采用二维及彩色多普勒超声观察肿瘤形态大小及生长情况,比较2组肿瘤成瘤率及传代情况。实验方案经中国人民解放军第三军医大学动物实验伦理委员会批准(批准号为AMUWE2020016)。结果与结论:①组织悬液肿瘤种植时间(75.70±11.16)s较组织肿瘤种植时间(100.80±9.21)s明显缩短(P=0.00);②组织悬液成瘤率95%显著高于组织成瘤率60%(P<0.05),肿瘤体积显著大于组织(P<0.05);③组织悬液传代成功率95%显著高于组织传代成功率65%(P<0.05);④结果说明,组织悬液建立兔VX2皮下肿瘤模型与瘤相比,更简单高效。
刘娅冯爽益磋余堰澜刘政
关键词:组织块VX2肿瘤模型成瘤率
一种食管胃结合部平滑肌细胞的组织原代培养及鉴定方
本发明涉及一种食管胃结合部平滑肌细胞的组织原代培养及鉴定方,包括以下步骤:获取食管胃结合部的平滑肌组织肌条;将所述平滑肌组织肌条用消化液消化,得到消化后的平滑肌组织;将所述消化后的平滑肌组织转移至培养容器中使所...
高杨刘俊峰赵连梅张胜雷
组织培养长江三角洲白山羊毛囊干细胞的方
本发明提供了组织培养长江三角洲白山羊毛囊干细胞的方,采用该方分离细胞系生长分裂状态良好,呈现典型的铺路石状,原代细胞爬出组织的速度较快,第三天就可以观察到有细胞爬出组织生长,第四天就可以在显微镜视野中观察到每...
李拥军王强尹修远瞿静雯
一种食管胃结合部平滑肌细胞的组织原代培养及鉴定方
本发明涉及一种食管胃结合部平滑肌细胞的组织原代培养及鉴定方,包括以下步骤:获取食管胃结合部的平滑肌组织肌条;将所述平滑肌组织肌条用消化液消化,得到消化后的平滑肌组织;将所述消化后的平滑肌组织转移至培养容器中使所...
高杨刘俊峰赵连梅张胜雷
酶消化组织培养人心房成纤维细胞被引量:3
2018年
目的建立人心房成纤维细胞体外培养的有效方。方无菌条件下将人右心耳标本剪成1 mm3大小组织,经1.25 g/L胰蛋白酶预消化15 min后,用组织贴壁培养。通过倒置显微镜观察培养细胞生长及形态学特点,使用免疫荧光进行细胞鉴定。结果培养3~4 d后可见细胞自组织爬出,7~9 d后细胞可传代,传代后的细胞呈长纺锤形或多边形。免疫荧光染色发现其抗波形蛋白(vimentin)及抗α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)染色阳性,抗血管性血友病因子(v WF)染色阴性,鉴定为肌成纤维细胞。结论酶消化组织培养人心房成纤维细胞/肌成纤维细胞简便、高效,方可行。
张伟王宇任雨洁张蓬勃邓秀玲赵丽梅
关键词:心房成纤维细胞细胞培养免疫荧光技术
酶消化联合组织培养大鼠原代成骨细胞被引量:5
2017年
背景:获取高纯度、高活性的成骨细胞是进行骨代谢研究的基础。目的:探索一种简便、高效的原代成骨细胞培养方。方:将新生24 h内的SD大鼠,分离获取颅骨的顶骨和额骨,预先采取胰酶和胶原酶消化,再进行组织培养的方提取成骨细胞。通过倒置相差显微镜和透射电镜观察细胞形态,细胞计数绘制细胞生长曲线,采用碱性磷酸酶BCIP/NBT染色和茜素红矿化结节染色进行成骨细胞鉴定。结果与结论:(1)细胞形态呈长梭形、三角形、不规则多边形,有两至三个细胞突起;(2)透射电镜下线粒体和内质网在成骨细胞中非常丰富,并且有较多细胞突起,呈现出典型成骨细胞特点;(3)细胞刚接种时生长缓慢,3 d后增殖加快,第7天达高峰;(4)碱性磷酸酶BCIP/NBT染色显著阳性,茜素红钙结节染色橘红色;(5)采用酶消化联合组织提取的细胞具有典型的成骨细胞特征和功能,是一种理想的原代成骨细胞分离培养方
丁香莹蔡劲薇潘吉铭梁敏
关键词:骨细胞原代培养酶消化法组织块法国家自然科学基金
无血清条件下组织培养人角膜上皮细胞的比较
2017年
目的比较无血清条件下不同组织培养人角膜上皮细胞的出膜时间及出膜率。方培养方式:A组:剥除角膜内皮及刮除角膜上皮后组织角膜上皮面向上贴壁;B组:剥除角膜内皮及刮除角膜上皮后组织角膜上皮面向下贴壁;C组:仅剥除角膜内皮后全层组织角膜上皮面向上贴壁;D组:仅剥除角膜内皮后全层组织角膜上皮面向下贴壁。相差显微镜观察细胞形态学变化,对比各组出膜时间及出膜率。结果 A组:细胞爬出时间(7.00±3.00)d,出膜率47.50%(19/40);B组:细胞爬出时间(7.55±2.58)d,出膜率45.83%(11/24);C组:细胞爬出时间(8.43±3.32)d,出膜率63.64%(14/22);D组:细胞爬出时间(7.49±2.20)d,出膜率72.22%(39/54)。卡方检验结果示,A组与D组、B组与D组出膜率相比,差异均有统计学意义(均为P<0.05),余组间两两比较差异均无统计学意义(均为P>0.05)。结论无血清条件下不同组织培养方式细胞爬出时间大致相同,约一周。相比较而言,仅剥除角膜内皮后全层组织角膜上皮面向下贴壁培养出膜率明显较高,且培养的细胞更纯、更稳定。
史小玲王骞鹿晓燕
关键词:角膜上皮细胞组织块法无血清细胞培养

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作品数:71被引量:116H指数:6
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