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一种快速识别禽白血病病毒的方法: 本发明涉及禽病毒检测领域，公开了一种快速识别禽白血病病毒的方法，包括：S1、样本采集与预处理，先通过采集禽类样本，S2、微流控芯片装载，之后把预处理后的样本注入微流控芯片；S3、微流控LAMP扩增在微流控芯片获得足够产物...; 肖承志周源龚存芳张英杰鲁海安

J亚型禽白血病病毒的研究进展: 2025年; J亚型禽白血病病毒是一种对全球禽类产业构成严重威胁的肿瘤病毒,自其首次在禽类中被发现以来,流行范围和影响不断扩大。该文综述了J亚型禽白血病病毒的最新研究进展,重点讨论了其病原学与流行病学特征、致病机制、临床表现与诊断技术,以及防控与治疗策略。J亚型禽白血病病毒因其病毒基因组的变异性和进化特征,以及不同地区流行株的差异性,给该病毒的防控带来了巨大挑战。; 朱明月; 关键词：J亚型禽白血病病毒流行病学

禽白血病病毒抗体间接ELISA检测方法的建立与应用: 2025年; 为了建立一种禽白血病病毒(ALV)抗体检测方法,利用原核表达禽白血病病毒的p27蛋白建立一种检测ALV抗体的间接ELISA方法。结果显示,p27蛋白以包涵体形式表达,Western blot检测显示p27蛋白具有良好的反应活性,以p27蛋白为包被抗原建立的间接ELISA方法检测NDV、IBDV、IBV、AIV-H9、ILTV阳性血清均为阴性,最低抗体检出效价为1︰12800,与进口试剂盒的符合率为94.87%,检测临床血清样品的阳性率为14.02%。结果说明该研究建立的间接ELISA方法特异性强、敏感性高、符合性好,可为ALV的检测和净化等提供一种简单快速的方法。; 苏晓月吕转平沈亚安赵明明唐思静; 关键词：禽白血病病毒间接ELISA方法抗体检测

江汉鸡J亚群禽白血病病毒分离鉴定及致病性分析: 2025年; 为了解禽白血病病毒(ALV)在江汉鸡中的遗传进化方向和致病性,对来自湖北省武汉市疑似感染ALV的江汉鸡进行病理剖检、病毒分离鉴定,并对分离毒株进行env基因遗传进化分析以及致病力评估。结果表明,病鸡脾脏肿大,肝脏表面肉眼可见肿瘤;匀浆组织接种DF-1细胞后,经ELISA和IFA检测发现P27抗原均呈阳性,PCR亚型鉴定仅扩增出J亚群特异性条带,成功分离出1株ALV-J毒株,命名为HB18449株;分离株env基因的遗传进化分析显示分离株与山东商品蛋鸡分离株SD13QJ03遗传关系最近,且和多数地方鸡分离株一样与英国原型株HPRS103处于同一大分支。此外,致病性试验结果表明,HB18449感染雏鸡会抑制其生长、免疫器官发育、引起病毒血症、降低血液中CD4~+/CD8~+T淋巴细胞比例以及体液免疫应答水平。; 许云澎汪最窦俊峰李丽卢琴金鑫鑫凌小淳汪宏才翟新国罗青平李芸轩; 关键词：禽白血病病毒遗传进化

6种不同J亚群禽白血病病毒检测试剂盒的比较: 2025年; 为了比较6种不同J亚群禽白血病病毒(ALV-J)检测试剂盒的检测结果,以更好地实施禽白血病净化和鸡苗洁净度评估。本试验首先将ALV-J参考株以卵黄囊接种感染无特定病原体(SPF)鸡胚构建雏鸡携带ALV-J模型,对出壳雏鸡逐一采集胎粪和抗凝血,随后分别将胎粪滤液和血浆接种鸡胚成纤维传代(DF-1)细胞进行病毒培养,维持7 d时收取细胞上清,以A、B、C三家公司的ALV p27抗原酶联免疫吸附测定(ELISA)试剂盒以及商品化的磁微粒化学发光检测试剂盒、胶体金试纸条和实时荧光定量PCR检测试剂盒分别对胎粪、不同稀释度胎粪样品、胎粪病毒分离细胞上清和血浆病毒分离细胞上清进行检测。结果显示,6种不同试剂盒对胎粪、胎粪病毒分离细胞上清和血浆病毒分离细胞上清的检测结果判定总体一致,其中以磁微粒化学发光检测试剂盒读数判定最为直观,其阳性样品与阴性样品的读值区分明显、易于判断。对不同稀释度胎粪样品的检测结果显示,以A公司ALV p27抗原ELISA试剂盒、磁微粒化学发光检测试剂盒和实时荧光定量PCR检测试剂盒相对灵敏,可检出低滴度病原。结果表明,不同检测方法对ALV-J检测的整体判定差异不显著,但针对低滴度样品检测时不同方法的检出率有差异,需要根据情况选择方法。; 赵方钰崔慧珍王一新常爽任志浩崔文平赵鹏; 关键词：P27抗原胶体金试纸条

F亚群禽白血病病毒SYBR GreenⅠ荧光定量PCR方法的建立: 2025年; 为精准检测F亚群禽白血病病毒(ALV⁃F),该研究针对ALV⁃F流行毒株env基因设计了一对特异性引物F1/F2,建立了ALV⁃F的SYBR GreenⅠ荧光定量PCR检测方法。条件优化试验结果显示,该方法最适退火温度为64.5℃,最适引物浓度为0.4μM。利用最适反应条件建立的标准曲线方程为y=-3.303x+42.525,R2=0.997,扩增效率E=100.8%,重组质粒标准品拷贝数与Ct值具有良好的线性关系。特异性试验结果表明,该方法仅能特异性检测ALV⁃F,对ALV⁃A、ALV⁃B、ALV⁃J、ALV⁃K、禽流感病毒(AIV)、马立克病毒(MDV)、网状内皮组织增生病病毒(REV)和鸡传染性贫血病病毒(CIAV)无交叉反应;敏感试验结果表明,该方法最低检测限度为4.67×10^(2)拷贝/μL,敏感性是普通PCR的1000倍;稳定性试验结果表明,批间和批内稳定性试验的变异系数均小于2%。利用该方法、ALV p27 ELISA和普通PCR方法分别对23份七彩山鸡胚所制备的原代细胞(PEF)样品进行检测,结果显示该方法和普通PCR方法阳性检出率均为95.65%(22/23),而ALV p27 ELISA阳性检出率仅为39.13%(9/23),该方法与普通PCR总符合率为100%,与ALV p27 ELISA总符合率为43.48%;进一步利用该方法、病毒分离法(结合ALV p27 ELISA)和普通PCR方法分别对20份七彩山鸡抗凝血样品进行检测,结果显示该方法和普通PCR方法阳性检出率分别为100.00%(20/20)和75.00%(15/20),两者总符合率为75.00%,而病毒分离法阳性检出率为0.00%(0/20)。本研究建立的方法具有良好的特异性、敏感性和稳定性,能够有效检测临床样品,可以为ALV⁃F的精准检测提供技术支持。; 潘洪艳李锦群李琪袁伊琳曹伟胜; 关键词：禽白血病

一种基于磁微粒化学发光法禽白血病病毒检测试剂盒及其应用: 本发明属于生物检测技术领域，公开了基于磁微粒化学发光法的禽白血病病毒检测试剂盒及其应用。所述试剂盒包括A液、B液、C液、D液校准品和质控品；所述A液包括包被禽白血病病毒抗体的磁微粒，所述B液包括吖啶酯标记的禽白血病病毒抗...; 于海峰张森边野付巧玉蒋永青豆晓霞欧婧孙靖许芳洪永昌

禽白血病病毒p27蛋白单克隆抗体制备及抗原表位的鉴定: 2025年; 为制备禽白血病病毒(ALV)p27蛋白特异性单克隆抗体,利用原核表达系统表达并纯化ALV p27蛋白,将其作为免疫原免疫注射Balb/c小鼠,用杂交瘤细胞融合和ELISA等筛选出阳性单克隆抗体细胞,对制备的单克隆抗体的抗体亚型、效价及特异性进行鉴定,将目的蛋白截短成4段,初步鉴定单克隆抗体识别的抗原表位区域。结果表明,共筛选出4株单克隆细胞,其抗体亚类皆为IgG1型,其中3A1抗体效价为1∶64000,3B2为1∶256000,5F1为1∶128000,5G2为1∶8000;4株单克隆抗体识别的抗原表位在1-60 aa之间。研究结果为进一步建立ALV相关免疫学检测方法提供了重要的材料。; 陈桂娥容芳苟鑫孙荣航李作生陈瑞爱; 关键词：禽白血病病毒 P27蛋白单克隆抗体抗原表位

四个亚群禽白血病病毒微滴式数字RT-PCR检测方法的建立: 2025年; 建立一种A、B、J、K亚群禽白血病病毒(ALV)微滴式数字PCR(ddPCR)检测方法。根据ALV pol基因序列设计特异性引物探针,优化ddPCR方法的反应条件,并评估其敏感性、特异性和重复性。结果显示:引物和探针浓度分别为900和250 nmol/L、退火温度为55℃时ddPCR反应效率最高,该方法检出限和定量限分别为1.999和6.664 copies/μL,通过梯度稀释得到的标准曲线的相关系数为0.994 1,不与常见的禽病毒发生交叉反应,重复性好,ddPCR方法的最低检测限约为1 copies/μL,相同测试条件下,qPCR方法的最低检测限约为100 copies/μL,ELISA方法的检测限约为1×10^(4)copies/μL。结果表明:建立的ddPCR方法的灵敏度高于qPCR和ELISA方法,可用于A、B、J、K亚群ALV的临床检测以及定量检测。; 雷晨莹陈亚娜张洁崔灿马岩原霖田克恭; 关键词：禽白血病病毒

2021—2022年河南省良凤花种鸡禽白血病病毒感染状况和流行特征: 2025年; 采用ELISA方法对2021—2022年采自河南省6个市(漯河、驻马店、南阳、新乡、安阳、商丘市)良凤花种鸡的1 342份精液、1 611份泄殖腔拭子、8 187份种蛋和284份胎粪进行ALV-p27(禽白血病病毒-p27)抗原检测,512份母鸡血清进行ALV-A/B和ALV-J亚群抗体检测,利用DF-1细胞从雏鸡胎粪中分离ALV,采用PCR扩增分离毒株的gp85基因,并将基因序列与ALV-J亚群不同毒株进行比对和遗传进化分析,为河南省良凤花种鸡禽白血病的防控与净化提供数据支撑。结果表明,精液、泄殖腔拭子、种蛋、胎粪样品中ALV-p27抗原阳性率分别为13.11%(176/1 342)、7.70%(124/1 611)、2.39%(196/8 187)、2.81%(8/284);母鸡血清样品中ALV-A/B和ALV-J抗体阳性率分别为16.60%(85/512)和15.23%(78/512);而且,河南省6个市良凤花种鸡群ALV阳性率差别不大,其中,安阳市最高(4.90%,82/1 675),商丘市最低(3.56%,64/1 798),这表明河南省不同市良凤花种鸡群均有外源性ALV的感染。母鸡泄殖腔拭子、同期所产种蛋、相应雏鸡胎粪的ALV-p27抗原阳性率分别是4.00%(4/100)、1.08%(1/92)、1.15%(1/87),提示雏鸡感染ALV是由垂直传播和水平传播共同造成的,根据种蛋ALV感染情况评估种鸡群中ALV的垂直传播更客观。分离到1株ALV-J毒株HN2022,与参考毒株HLJ09MDJ-1、HuB09-1、SX090912J、CAUHM01和HPRS103在同一进化分支。ALV-J亚群不同毒株gp85基因核苷酸序列同源性和编码氨基酸序列同源性分别为92.7%~97.8%和88.6%~91.8%。gp85基因编码氨基酸序列同源性比对结果显示,分离毒株gp85基因编码氨基酸的变异主要发生在序列高频率变异区Hr 1和Hr 2。综上,试验结果不仅表明河南省良凤花种鸡群中ALV感染比较普遍,而且丰富了ALV遗传变异特性数据,为后续该病毒的研究和该品种鸡禽白血病的净化提供了数据支撑。; 王汝都邓祖丽颖乔宏兴张菡边传周罗俊彭志锋; 关键词：禽白血病病毒 P27抗原病毒分离

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