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一种基于Chelex-100碱裂解的细菌裂解
本发明公开了一种基于Chelex‑100碱裂解的细菌裂解,包括如下步骤:S1、配制裂解液,裂解液中Chelex‑100∶NaOH=0~0.5∶0.5~1;S2、使用步骤S1配置的裂解液进行革兰氏阳性菌和/或革兰...
方海田刘慧燕魏晓博田云
一种基于碱裂解快速纯化质粒的生产工艺
本发明公开了一种基于碱裂解快速纯化质粒的生产工艺,涉及生物技术领域。该生产工艺包括以下步骤:对裂解液进行澄清过滤和浓缩换液,得到浓缩液;对所述浓缩液进行羟基磷灰石层析,得到超螺旋质粒洗脱液;对所述超螺旋质粒洗脱液进行终...
刘红侯国栋胡国健刘国庆李蓓蓓
一种基于碱裂解快速纯化质粒的生产工艺
本发明公开了一种基于碱裂解快速纯化质粒的生产工艺,涉及生物技术领域。该生产工艺包括以下步骤:对裂解液进行澄清过滤和浓缩换液,得到浓缩液;对所述浓缩液进行羟基磷灰石层析,得到超螺旋质粒洗脱液;对所述超螺旋质粒洗脱液进行终...
刘红侯国栋胡国健刘国庆李蓓蓓
一种碱裂解提取细菌质粒的试剂盒及其方
本发明涉及一种碱裂解提取细菌质粒的试剂盒及其方,属于生物技术领域。本发明提供了一种碱裂解提取细菌质粒的试剂盒,在细菌悬浮液中添加了无机盐LiCl和NH<Sub>4</Sub>Ac,使细菌裂解液中RNA容易沉淀去掉,...
黄国文
碱裂解提取滤纸血样中的疟原虫基因组在疟疾临床样本中的应用
【目的】1.探究碱裂解提取疟原虫滤纸血样本基因组抽提,用于疟原虫虫种巢式PCR鉴定,并用于大批量临床样本的疟疾诊断的可能性。2.评价碱裂解的疟疾诊断效率。为今后在基础设施不发达的偏远地区样本的采集、运输和储存提供新的...
王洵
关键词:碱裂解法疟原虫
一种碱裂解提取细菌质粒的试剂盒及其方
本发明涉及一种碱裂解提取细菌质粒的试剂盒及其方,属于生物技术领域。本发明提供了一种碱裂解提取细菌质粒的试剂盒,在细菌悬浮液中添加了无机盐LiCl和NH<Sub>4</Sub>Ac,使细菌裂解液中RNA容易沉淀去掉,...
黄国文
文献传递
基于碱裂解川贝母的鉴别被引量:1
2019年
利用碱裂解提取川贝母DNA,考察不同裂解液配比对川贝母DNA质量与电泳成功率的影响,并与现行方相比较。结果表明,含有200 mmol/L NaCl溶液,5 mmol/L Mg 2 Cl溶液,1%Triton X-100,1%PVP,1%SDS,2 mmol/L EDTA,0.1 mol/L Tris-HCl配比液的碱裂解液具有最佳的DNA提取效果,此碱裂解液提取的DNA电泳条带与现行方一致,可节省15~20 min,单个样品检验成本可降至0.01元。采用该方对25个市售贝母样本进行鉴定,可快速鉴别出川贝母的真伪。
陈玉秀彭必武李雨嫣
关键词:川贝母碱裂解法DNA提取
采用碱裂解提取DNA鉴定细菌和酵母菌被引量:12
2018年
采用碱裂解对分离自四川泡菜的8株细菌和4株酵母菌进行DNA提取,对菌株DNA提取物浓度和纯度、PCR扩增产物质量、核苷酸测序和菌株鉴定结果进行分析,并对该方的测试成本和耗时进行估算。结果表明,采用碱裂解提取菌株DNA的浓度均大于40 ng/μL,A260/A280大于1.9,表明该方下提取菌株DNA的质量较好。12株泡菜菌株被鉴定至种水平,且鉴定结果与试剂盒一致,表现出较高的测试准确性。该方的测试成本估算为50元/100次,测试耗时为50 min,明显优于目前普遍使用的试剂盒
迟原龙唐垚唐垚金璐张凤姚开
关键词:碱裂解法DNA提取四川泡菜菌种鉴定
改良碱裂解和煮沸提取金黄色葡萄球菌DNA效果的比较被引量:6
2018年
目的:建立一种简便经济的金黄色葡萄球菌基因组DNA提取方。方:选取10株耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌,预先以终浓度2 mg/mL溶菌酶处理6 h,再以改良碱裂解提取细菌基因组DNA。同时以常规煮沸制备上述细菌基因组DNA。采用PCR扩增两种模板中金黄色葡萄球菌spa基因、mecA基因和femB基因,比较两种方提取DNA的效果。结果:以改良碱裂解制备DNA为模板,所有10株标本均可扩增出spa基因和mecA基因,4个标本扩增出femB基因;以直接煮沸制备DNA为模板,仅1个标本扩增出spa基因,2个标本扩增出mecA基因,所有标本未扩增出femB基因。结论:改良碱裂解提取基因组DNA效果优于直接煮沸,所提取基因组DNA可以满足PCR扩增的要求。
邹治情王俊玲陈思谢雨Dinsh Kumar K吴亮姜旭淦阴晴陈盛霞许化溪
关键词:金黄色葡萄球菌PCR检测标本处理DNA提取
一种适于PCR扩增的快速提取猪基因组DNA的碱裂解被引量:3
2017年
以大白猪背最长肌、脾脏、耳组织为材料,用碱裂解和酚-氯仿分别提取猪基因组DNA,用紫外分光光度计、琼脂糖凝胶电泳、PCR扩增检测DNA的产量和质量,结果发现2种方提取的DNA产量没有明显差异。通过猪MC4R、TEF-1基因特异引物进行PCR扩增均能得到目的条带。碱裂解提取的DNA原液稀释5倍、10倍后作为模板均获得了较为稳定的扩增产物。该结果表明,简单、快速、无毒的碱裂解适用于动物定性PCR检测时DNA的提取。
赵金艳刘榜王文君张宇张庆德
关键词:碱裂解法PCR扩增

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