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实时荧光定量TaqMan PCR检测减蛋综合征病毒方法的建立以及初步应用: 2025年; 研究旨在建立1种检测减蛋综合征病毒的实时荧光定量TaqMan PCR技术。以减蛋综合征病毒JL-EDSV-629株DNA为模板,建立检测EDSV的实时荧光定量PCR方法。以上述EDSV目的片段的DNA作为标准品,与本实验室所保存的鸭瘟病毒等多种病毒通过该方法进行特异性检测;以10倍比稀释的EDSV标准品建立标准曲线,测定该方法的敏感性;采用5个稀释度的标准品验证该方法的批内和批间重复性。结果:建立的实时荧光定量TaqMan PCR方法仅在EDSVDNA样本中检出荧光信号;最低检出量为6.45×10^(2)copies/μL,是常规PCR的100倍,线性范围达10个数量级;批内和批间的变异系数均在0.7%以下。以上结果表明,研究建立的EDSV实时荧光定量PCR检测方法特异性强、灵敏度高和重复性好,可用于减蛋综合征病毒的临床检测,为诊断该病毒提供分子生物学方法。; 常海霞刘湘崔雪志王友令张旭刘兆洁刘文静曾小辉蔡广娣熊金光; 关键词：禽腺病毒减蛋综合征病毒实时荧光定量PCR

高分辨率熔解曲线检测三种虫媒病毒方法的建立: 2025年; 本文建立三种虫媒病毒(登革病毒、寨卡病毒、基孔肯雅病毒)高分辨率熔解曲线检测方法。分别针对三种虫媒病毒设计特异性引物,建立高分辨率熔解曲线检测方法,并对该方法的特异性、检测下限、重复性、符合率进行评价。建立的高分辨率熔解曲线检测方法,重复性良好,寨卡病毒的检测下限为1.0×10^(3)拷贝/mL,而登革病毒和基孔肯雅病毒的检测下限均为1.0×10^(2)拷贝/mL,能特异性地扩增这三种虫媒病毒,而对其他可致发热反应的病原体,包括甲型H1N1流感病毒、甲型H3N2流感病毒、乙型流感病毒、新型冠状病毒等无特异性扩增;盲样检测结果符合率达100%。本研究建立的高分辨率熔解曲线检测方法灵敏度高、特异性好、重复性好,可为这三种虫媒病毒检测提供可行的方法。; 徐君婷许显芳周海棠汪海波陈新彬; 关键词：特异性引物虫媒病毒高分辨率熔解曲线

逆转录重组酶介导等温扩增检测乙型流感病毒方法的建立: 2025年; 应用逆转录-重组酶介导等温扩增技术(Reverse transcription recombinase-aided isothermal amplification,RT-RAA)建立一种乙型流感病毒(Influenza B virus,FLU B)的快速检测方法。在NCBI检索乙型流感病毒的基因序列,利用DNAstar软件进行序列比对,根据比对结果选择较为保守的HA基因进行引物和探针的设计并验证,同时评价该方法特异性、灵敏性、重复性并进行临床样本检测。成功建立了乙型流感病毒荧光RT-RAA的快速检测方法,最佳反应温度为42℃,最佳引物浓度为10μmol/L,最佳探针浓度为25μmol/L,20min内即可完成检测,极大的缩减了检测时间,最低可检测出浓度为3.16×100 copies/μL的重组质粒,并且与其他呼吸道病原体等无交叉反应,具有较好的特异性,应用本研究所建立的荧光RT-RAA方法对20份FLU B样本进行检测。检测结果表明,本研究建立的荧光RT-RAA方法对20份阳性样本均可检出,证明所建立方法可用于FLU B的临床检测,本研究成功建立了快速检测FLU B的荧光RT-RAA方法,具有良好的特异性、灵敏性、重复性,为FLU B的检测提供了有力工具。; 杨森张瑾冯茹荔刘迪滕新栋

实时荧光定量TaqManRT-PCR检测番鸭呼肠孤病毒方法的建立以及初步应用: 2025年; 研究旨在建立一种适用于番鸭呼肠孤病毒检测的实时荧光定量TaqMan RT-PCR技术。以番鸭呼肠孤病毒(Muscovy duck reovirus strain815-12 segmentS4)RNA为模板,建立检测番鸭呼肠孤病毒的实时荧光定量RT-PCR方法。制备含有上述MDRV目的片段的RNA作为标准品,以10倍比稀释的标准品建立标准曲线,测定敏感性。同时采用标准品检测该方法的批内和批间重复性,并与本实验室所保存的多种病毒进行特异性检测。结果:建立的实时荧光定量TaqManRT-PCR方法能在番鸭呼肠孤病毒RNA样本中检出荧光信号。最低检出量为9.46×10^(1)copies/μL,敏感性良好,是常规RT-PCR的1000倍;线性范围达11个数量级。该方法重复性良好,批内变异系数和批间变异系数均在1%以下。经试验证明该方法具有良好的特异性、敏感性和重复性,可用于MDRV的临床鉴别诊断以及流行病学调查,有效阻止MDRV在鸭群间的传播。; 王一帆刘湘韦良孟张旭刘兆洁刘文静曾小辉蔡广娣熊金光; 关键词：番鸭呼肠孤病毒实时荧光定量RT-PCR TAQMAN探针

一种防病毒方法、装置、设备及计算机可读存储介质: 本发明公开了一种防病毒方法、装置、设备及计算机可读存储介质，应用于存储安全技术领域，包括：利用防病毒代理组件接收存储端通过长连接通信通道发送的扫描请求，并对扫描请求进行解析，得到防病毒程序格式信息；利用防病毒代理组件根据...; 位风杰

信迪利单抗联合靶向及抗病毒方法治疗乙型肝炎病毒相关性肝细胞癌在病毒学及免疫功能方面的效果研究被引量：1: 2024年; 目的观察程序性细胞死亡受体1抑制剂信迪利单抗联合靶向及抗病毒方法治疗乙型肝炎病毒(HBV)相关性肝细胞癌在病毒学及免疫功能方面的效果。方法选取2021年3月至2022年4月新乡医学院第一附属医院收治的HBV相关性肝细胞癌患者70例。完全随机分为对照组和观察组,各35例。对照组给予丙酚替诺福韦+靶向治疗,观察组在对照组基础上给予信迪利单抗治疗。观察患者治疗前和治疗第1、3、6个周期的病毒学及免疫功能指标变化。结果治疗第3、6个周期,观察组HBV DNA定量转阴率高于对照组[71.4%(25/35)比37.1%(13/35)、94.3%(33/35)比54.3%(19/35)],差异均有统计学意义(均P<0.01)。治疗前和治疗第1、3、6个周期观察组和对照组HBV表面抗原定量差异均无统计学意义(均P>0.05),但治疗第1、3、6个周期观察组HBV表面抗原定量水平下降幅度大于对照组。治疗第1、3、6个周期,对照组CD_(4)^(+)T淋巴细胞、CD_(8)^(+)T淋巴细胞、自然杀伤细胞数目较治疗前逐渐减少,而观察组较治疗前逐渐增多,观察组均多于对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论信迪利单抗联合靶向及抗病毒方法治疗HBV相关性肝细胞癌患者效果良好,在降低病毒的复制能力、提高机体免疫能力方面优于单纯抗病毒联合靶向治疗。; 申娇杨道坤王燕平刘佳魏帅陈宝鑫; 关键词：肝细胞癌乙型肝炎病毒免疫功能

利用假病毒模型制备高滴度重组流感病毒方法及其应用: 本发明提供了利用假病毒模型制备高滴度重组流感病毒方法及其应用，高滴度的流感病毒制备疫苗可有效的缩短疫苗制备的周期和降低疫苗制备的成本。具体地，本发明提供了将低滴度H5亚型流感病毒改造为高滴度H5亚型流感病毒的方法，在实例...; 王桂芹王海坤常小艳卢洪洲张国良刘冬平

重组酶介导等温核酸扩增结合核酸试纸条即时检测猪流行性腹泻病毒方法的建立: 2024年; 本文旨在建立一种基于重组酶介导等温扩增技术(Recombinase aided amplification,RAA)结合核酸试纸条的猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)可视化检测方法,以应用于养殖场内部实现现场快速检测。选择PEDV N基因保守序列为模板,设计特异性引物及荧光探针,对引物进行对比筛选,对反应条件、引物浓度、探针浓度进行优化,并对其特异性、敏感性和重复性进行评价。将建立的检测方法应用于临床样品,并与荧光定量PCR方法进行比较。结果表明:建立的方法在38℃恒温10 min扩增反应以及5 min侧流向层析后,即可完成检测,与猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪瘟病毒、伪狂犬病毒、猪圆环病毒2型、猪德尔塔冠状病毒、猪轮状病毒、猪传染性胃肠炎病毒均无交叉反应,最低检测限可达101拷贝/μL。应用该方法检测20份阴性和20份阳性,共40份临床样本,检测结果与荧光定量PCR方法保持一致。本研究建立的RAA结合核酸试纸条的方法具有特异性好、灵敏度高、耗时短、仪器设备简便等优点,适用于基层现场快速检测。; 易玮婕李嘉豪赵伊然单衍可刘斐; 关键词：猪流行性腹泻病毒

分子信标荧光定量PCR检测非洲猪瘟病毒方法: 本发明属于生物医药领域，具体涉及一种分子信标荧光定量PCR检测非洲猪瘟病毒方法。本发明根据非洲猪瘟病毒(ASFV)的B646L基因的保守特异性区域，设计了特异性的引物和分子信标探针，结合实时荧光定量PCR的方法进行非洲猪...; 杨吉飞牛庆丽钟健豪田占成关贵全殷宏

MIRA-CRISPR/Cas13a结合磁珠量子点传感器快速检测甲型流感病毒方法的建立: 2024年; 目的将多酶恒温快速扩增(MIRA)、成簇的规则间隔短回文重复序列及其相关蛋白Cas13a(CRISPR/Cas13a)与研发的磁珠量子点(MBQD)传感器相结合,建立一种甲型流感病毒(IAV)快速检测方法。方法针对IAV的M基因设计并筛选MIRA扩增引物、CRISPR RNA(crRNA)、荧光报告探针及连接探针,对反应条件进行优化,建立MIRA-CRISPR/Cas13a-MBQD检测体系;评价该体系的检测灵敏度与特异性;比较建立的方法与实时荧光RT-PCR(RT-qPCR)法的一致性。结果建立的检测体系可以在60 min内完成检测,对IAV的检测灵敏度达1 copy RNA分子/反应;特异性试验表明其与新型冠状病毒(SARS-CoV-2)、乙型流感病毒(IBV)、呼吸道合胞病毒(RSV)、人偏肺病毒(HMPV)、副流感病毒(PIV)、腺病毒(ADV)、肺炎支原体(MP)均无交叉反应;临床样本检测结果显示,MIRA-CRISPR/Cas13a-MBQD与RT-qPCR法具有极高的检测一致性(Kappa=1.00)。结论建立的MIRA-CRISPR/Cas13a-MBQD检测体系可快速检测IAV,灵敏性、特异性较好。; 杨宁马君妍赵康辰吴涛朱小娟乔乔王烁虎歌吴斌崔仑标葛以跃; 关键词：甲型流感病毒

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