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一种环形泰勒虫裂殖体转化细胞的培养方法与应用: 本发明涉及细胞生物学技术领域，具体公开了一种环形泰勒虫裂殖体转化细胞的培养方法与应用。本发明的培养方法包括：细胞复苏后于含10％牛血清的第一培养基中，进行传代扩增培养；之后依次接种到含8％、5％、3％牛血清的第二培养基中...; 马全英李志施朱宜赵帅阳韩元罗建勋

哈密市牛环形泰勒虫病诊断与治疗: 2024年; 为了探讨环形泰勒虫病诊断与防治效果,试验采用临床诊断、病理剖检、血液涂片染色镜检、PCR检测及硬蜱形态学鉴定等方法,针对2023年5月哈密市部分养殖户的牛出现发热、淋巴结肿大等症状,病死率达43.6%,为尽快控制病情,采集病牛血样60份,分别进行血液涂片检测和PCR诊断。结果表明:血液涂片的阳性率为55%;PCR检测阳性率为65%,进行测序比对分析发现,病原为环形泰勒虫,两种检测方法的阳性符合率为81.8%,其中养殖场的发病率高于散养户,改良牛的感染率明显高于本地牛,以2岁以下牛发病较为多见。对病死牛剖检肉眼可见,可视黏膜苍白或黄染、心脏外膜出血点、肝脏淤血、肿大,有暗红色病灶等病理变化。采集患牛体表寄生硬蜱,通过形态学鉴定确定为小亚璃眼蜱。说明针对不同病程,使用不同的处方治疗,牛环形泰勒虫病可得以控制。现提出诊断、治疗及预防措施,以期为环形泰勒虫病的防控提供参考。; 李文罗生金张梦圆樊新丽; 关键词：环形泰勒虫

牛环形泰勒虫病的流行特点及防治措施分析: 2024年; 环形泰勒虫病是一种人畜共患寄生虫病,人类和牛都可以感染该病。人类主要通过食用被感染的且未煮熟的牛肉感染该病,牛则主要通过摄入被感染的食物或水源患病。以该病为研究对象,围绕其流行特点、鉴别诊断和防治措施展开讨论,指出要想降低牛患病的概率,关键要从环境、饮食、卫生、养殖方式等角度出发,根据实际情况采取恰当的手段及措施。; 刘剑陈连生李细林郑建新孙振宇; 关键词：环形泰勒虫病

基于TashHN基因的牛环形泰勒虫病PCR诊断方法的建立: 2024年; 根据Genbank已发表的环形泰勒虫TashHN基因序列设计合成引物,以此建立基于环形泰勒虫TashHN基因的PCR检测方法,对该方法的特异性、敏感性、稳定性进行验证,并用建立的方法对宁夏固原地区各县共计135份牛血样进行检测。结果表明:建立的基于TashHN的PCR检测方法与中华泰勒虫、东方泰勒虫、牛巴贝斯虫、双芽巴贝斯虫均无交叉反应;可检测的最低模板浓度为1.64×10^(2) copies/μL;环形泰勒虫的DNA在-20℃冰箱放置8个月后仍可检测出目的条带;该方法利用已有文献中的PCR方法进行一致性检测,从135份牛血样中检测出5份阳性,说明该方法准确可靠。因此,试验建立的基于环形泰勒虫TashHN基因的PCR检测方法具有特异性强、敏感性高、稳定性强的特点,适用于临床上环形泰勒虫早期感染检测以及流行病学的调查。; 周子成赵洪喜; 关键词：环形泰勒虫 PCR

小亚璃眼蜱生物学特性及其携带牛环形泰勒虫进化分析: 2024年; 为了解小亚璃眼蜱的生物特性,掌握牛环形泰勒虫病在媒介蜱体内的传播规律,在实验室构建媒介蜱的人工宿主,进行叮咬传播试验,并分析携带病原情况。结果显示,饱血的幼蜱、若蜱、成蜱均检测出病原,由卵直接孵化的幼蜱和卵未检测出病原。对病原基因序列进行系统发育分析,获得的各龄期蜱源性环形泰勒虫与甘肃株最近,相似性为98%。实验表明,小亚璃眼蜱可阶段性(经期)传播但不能垂直(经卵)传播牛环形泰勒虫病。; 王志斌戚月基格尔·扎尼尔加那尔·努和买提朱马别克·胡斯曼谢小婉; 关键词：生物学特性龄期牛环形泰勒虫进化分析

环形泰勒虫分子检测方法的建立及耐药虫株的分布评估: 环形泰勒虫病是全球分布的血液原虫病之一,由多种蜱传播,其病原体为环形泰勒虫(Theileria annulata),牛感染后主要表现为高热、贫血、食欲不振、淋巴结肿大等临床症状。在我国,该病主要存在于新疆和内蒙古等地区,...; 苏书晓; 关键词：环形泰勒虫 SHERLOCK

牛环形泰勒虫烯醇化酶重组蛋白对小鼠免疫应答的研究: 2024年; 为了评估牛环形泰勒虫(Theileria annulata)烯醇化酶(enolase)原核重组蛋白对实验动物体液免疫水平和细胞免疫水平的影响,用His纯化柱和超滤管对pET-32a-enolase进行纯化和浓缩,应用Western blot分析蛋白的反应原性;另外利用牛环形泰勒虫烯醇化酶重组蛋白(r Ta-enolase)免疫Balb/c鼠制备多克隆抗体,经间接ELISA检测血清中重组蛋白的特异性抗体水平。免疫后,取小鼠脾脏制备淋巴细胞悬液,用流式细胞术检测脾脏T细胞亚群情况;用MTT试剂盒检测体外刺激后T淋巴细胞增殖情况;用Spss ANOVA单因素检验进行差异显著性分析。Western blot表明,enolase重组蛋白可与阳性血清发生特异性反应。ELISA检测免疫鼠特异性IgG/IgG1和IgG2a抗体均与对照组差异极显著(P<0.01);流式细胞术检测表明,免疫组(2.53±0.11)与对照组(1.85±0.11)CD4^(+)/CD8^(+)T细胞的比值差异极显著(P<0.01);用r Ta-enolase重组蛋白刺激小鼠脾脏淋巴细胞后明显促进其增殖(P<0.05)。研究结果表明r Ta-enolase免疫小鼠能够诱导小鼠产生极高的体液免疫水平以及细胞免疫应答水平,细胞免疫应答偏向于CD4^(+)T细胞,为后续其在疫苗中的免疫功能提供数据资料。; 郑会珍甘露刘燕何文文葛晓敏李永畅巴音查汗郭庆勇; 关键词：牛环形泰勒虫烯醇化酶特异性抗体水平

新疆一例牛环形泰勒虫、念珠菌和绵羊无浆体混合感染的病例初报: 2024年; 2021年8月17日,新疆托克逊县一头西门塔尔母牛出现高热、瘤胃胀气、肌肉震颤、呼吸急促、结膜黄染和血红蛋白尿等临床症状。为确认发病原因,采集该牛全血和体表蜱虫样品进行光学显微镜观察、血常规检测和聚合酶链式反应(PCR)检测。血涂片镜检结果显示,患牛疑似牛环形泰勒虫、念珠菌和绵羊无浆体混合感染;血常规检测显示,血红蛋白、血红细胞压积、平均血红蛋白浓度和中性粒细胞等指标下降,血小板和淋巴细胞百分比等指标上升,提示该牛机体存在贫血和炎症反应;血液样品PCR结果显示,牛环形泰勒虫、念珠菌和绵羊无浆体检测均呈阳性;蜱虫样品PCR结果显示,牛环形泰勒虫检测为阳性。综上,患牛最终被诊断为牛环形泰勒虫、念珠菌和绵羊无浆体混合感染。目前,此3种病原共同感染牛的案例极为少见。本研究为今后牛混合感染牛环形泰勒虫、念珠菌和绵羊无浆体的临床诊断提供了参考。; 葛婷宋瑞其; 关键词：牛环形泰勒虫念珠菌

环形泰勒虫SHERLOCK-LF检测方法的建立与初步应用被引量：1: 2024年; 为快速、准确、简便地对环形泰勒虫感染进行检测,选取环形泰勒虫子孢子表面抗原基因作为靶标分子,设计特异性RPA引物及crRNA(CRISPR RNA)序列,建立环形泰勒虫的特异性高灵敏酶报告基因解锁(specific high-sensitive enzymatic reporter unlocking,SHERLOCK)-LF检测方法,并分析该方法的特异性、敏感性和符合率。结果显示:该方法可特异性检测环形泰勒虫基因组,与中华泰勒虫、东方泰勒虫、牛巴贝斯虫和双芽巴贝斯虫基因组均无交叉反应,且检测灵敏度达到1.42 copies/μL;与行业标准PCR方法检测结果相比,其符合率达到86.96%。本研究建立的SHERLOCK-LF检测方法可在1.5 h内完成对环形泰勒虫的检测,为该病的现场诊断及防控提供了技术支撑。; 苏书晓赵帅阳刘军龙张楚晗朱浩瀚关贵全殷宏罗建勋; 关键词：环形泰勒虫 RPA

环形泰勒虫Tams1单个B细胞抗体的制备及鉴定: 2024年; 本研究旨在利用单个B细胞抗体技术制备环形泰勒虫Tams1蛋白特异性单克隆抗体并对其反应性进行鉴定。构建重组质粒pET-30a-Tams1,并进行蛋白原核表达与纯化。纯化的Tams1蛋白免疫健康黄牛,第4次免疫后结合流式分选技术,从外周血单个核细胞获得分泌抗Tams1特异性单克隆抗体的B淋巴细胞(Ig M-/CD21+/抗原+B淋巴细胞)。经单细胞裂解及反转录后,通过巢式PCR扩增获得Ig G天然配对的轻/重链可变区域序列,并克隆至包含Ig G轻/重链恒定区域的真核表达载体。配对质粒共转染HEK-293T细胞后,收集细胞培养上清,Western-blot结果显示所得8株抗体均能与Tams1蛋白结合。同时IFA结果证明8株抗体可与裂殖子表面抗原Tams1特异性结合。上述结果表明,本研究成功获得8株Tams1特异性单克隆抗体,为后续该蛋白的功能研究及单个B细胞抗体制备技术平台的建立奠定了基础。; 张楚晗赵帅阳朱浩瀚苏书晓关贵全罗建勋殷宏刘军龙; 关键词：环形泰勒虫

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