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卵母细胞玻璃化冷冻损伤的缓解策略
2025年
卵母细胞的冷冻保存是人类和动物辅助生殖中长期储存遗传资源的重要策略之一。然而,由于卵母细胞的表面积/体积比小、细胞渗透性差,在冷冻过程中极易受到冰晶形成、渗透性休克、氧化应激和冷冻保护剂毒性等损伤,严重降低其解冻后的发育能力。与其他动物相比,卵母细胞中丰富的脂滴含量降低了其低温耐受性,冷冻保存难度更大。尽管可以从玻璃化未成熟卵母细胞中获得活仔,但与新鲜卵母细胞相比,玻璃化冷冻卵母细胞的发育能力还有待进一步提升。本文主要从玻璃化冷冻卵母细胞的损伤类型、受损机制、缓解冷冻损伤的策略等方面进行综述,为进一步建立和完善卵母细胞玻璃化冷冻保存方案提供参考。
孙雅雯陈思颍李伉冷璇王栋庞云渭
关键词:卵母细胞玻璃化冷冻冷冻损伤
一种EPA对卵母细胞体外成熟的影响方法及系统
本发明属于生物技术领域,公开了一种EPA对卵母细胞体外成熟的影响方法,本发明结果显示有37个与凋亡和程序性死亡等信号通路相关基因在转录水平被显著降低,而与有丝分裂通路相关的基因在转录水平显著提高。收集MII期的EPA处...
黄娇娇杜雪芳张华涛孙一博李新雨
一种调节剂在提高冷冻卵母细胞成熟质量中的应用
本发明涉及一种调节剂在提高冷冻卵母细胞成熟质量中的应用,所述调节剂为N‑(2‑(2‑(4‑氯苯基)噻唑‑4‑基)乙基)丁酰,所述调节剂通过提高冷冻卵母细胞体外成熟后的线粒体功能从而提高冷冻卵母细胞成熟质量。本发明提...
吴国权相德才贾宝瑜贺珍付晶穆德孟浦仕奇权国波邵庆勇
一种调节剂在提高冷冻卵母细胞成熟质量中的应用
本发明涉及一种调节剂在提高冷冻卵母细胞成熟质量中的应用,所述调节剂为N‑(2‑(2‑(4‑氯苯基)噻唑‑4‑基)乙基)丁酰,所述调节剂通过提高冷冻卵母细胞体外成熟后的线粒体功能从而提高冷冻卵母细胞成熟质量。本发明提...
吴国权相德才贾宝瑜贺珍付晶穆德孟浦仕奇权国波邵庆勇
阿戈美拉汀对卵母细胞体外成熟及手工克隆胚胎发育潜能的影响
2025年
该试验在卵母细胞体外成熟的前20~22 h培养过程中添加10^(-11)、10^(-10)、10^(-9)和10^(-8)mol/L的阿戈美拉汀,不添加阿戈美拉汀的作为对照组,对巢中收集到的卵母细胞进行体外培养。卵母细胞体外成熟后,利用2',7'-二氯双氢荧光素二乙酸酯(DCHF-DA)染色方法检测卵母细胞中活性氧水平,采用绿色荧光素标记花生凝集素(FITC-PNA)染色方法检测卵母细胞中皮质颗粒分布情况;手工克隆重构胚激活后在第2天统计裂率、第7天统计囊胚发育率和囊胚细胞总数,采用实时荧光定量PCR法检测囊胚中多能性基因表达情况。结果表明院与对照组相比,添加10^(-11)、10^(-10)mol/L的阿戈美拉汀能显著降低卵母细胞内活性氧水平(P<0.05),且10^(-10)mol/L的阿戈美拉汀显著促进了卵母细胞皮质颗粒分布类型I比例(P<0.05)。10^(-11)、10^(-10)mol/L浓度的阿戈美拉汀添加都可以促进徒手克隆胚胎的裂率、囊胚率和囊胚细胞数,但10^(-10)mol/L浓度下促进效果显著(P<0.05),据此确定卵母细胞体外成熟液中添加阿戈美拉汀浓度为10^(-10)mol/L。定量PCR结果显示,阿戈美拉汀组囊胚细胞中多能性基因NANOG、POU5F1、SOX2的mRNA的表达量均显著高于对照组(P<0.05)。可见,卵母细胞体外成熟液中添加10^(-10)mol/L的阿戈美拉汀可提高卵母细胞的体外成熟质量,改善克隆胚胎的体外发育潜能。
张家庆沈开元孙如玉胡湘云刘明君刘征李仕彦张冰吕玲燕
关键词:阿戈美拉汀卵母细胞发育潜能
莱鲍迪苷A对卵母细胞体外成熟的应用研究
卵母细胞的质量是体外胚胎工程是否能产生可用胚胎的关键影响因素之一,但体外成熟培养(In vitro maturation,IVM)的卵母细胞胚胎发育能力往往低于体内来源的卵母细胞,因此寻得一种有效的抗氧化剂来提升IVM...
王蕊彬
关键词:猪卵母细胞小鼠胚胎发育
一种添加尿苷恢复卵母细胞质量的培养液及其应用
本发明涉及一种添加尿苷恢复卵母细胞质量的培养液,包括基础培养液和尿苷;所述基础培养液含10%泡液、0.57mM半胱氨酸、0.5IU/mLLH、0.5IU/mL FSH、10ng/mL表皮生长因子、1%双抗的TCM ...
葛伟李文文高晨曦李兰程顺峰王俊杰沈伟
罗汉果甜苷Ⅲ延缓卵母细胞体外老化的作用机制被引量:1
2024年
【目的】验证罗汉果甜苷Ⅲ是否具有延缓卵母细胞体外老化进程的功效,为采用植物提取物延缓卵母细胞体外老化提供参考依据。【方法】以体外培养44 h获得的卵母细胞为研究对象,通过孤雌激活筛选出罗汉果甜苷Ⅲ对卵母细胞的有效作用浓度;然后设新鲜卵母细胞(Fresh)、老化卵母细胞(Aging)及老化卵母细胞添加罗汉果甜苷Ⅲ(MogⅢ)3个处理组,采用免疫荧光染色和实时荧光定量PCR等分别检测卵母细胞的线粒体数量和分布、腺嘌呤核苷三磷酸(ATP)含量、线粒体膜电位、活性氧(ROS)水平、DNA损伤、抗氧化相关基因表达及早期凋亡水平等指标。【结果】老化导致卵母细胞孤雌激活后的胚胎分裂率及囊胚发育率极显著下降(P<0.01,下同),而添加罗汉果甜苷Ⅲ能有效提高老化卵母细胞孤雌激活后的胚胎分裂率和囊胚发育率,尤其以添加25.0µmol/L罗汉果甜苷Ⅲ的效果最优,故确定25.0µmol/L为罗汉果甜苷Ⅲ的有效作用浓度。与Fresh组卵母细胞相比,Aging组卵母细胞线粒体荧光强度显著下降(P<0.05,下同)、ATP含量极显著下降、线粒体膜电位显著下降、抗氧化相关基因相对表达量极显著下降,而ROS水平、γ-H2AX荧光强度和Annexin-V阳性率均极显著上升;但添加25.0µmol/L罗汉果甜苷Ⅲ后上述问题均得到有效改善,即罗汉果甜苷Ⅲ能有效缓解卵母细胞的老化进程。【结论】罗汉果甜苷Ⅲ通过改善老化卵母细胞线粒体数量和ATP含量的异常、恢复ROS平衡、上调抗氧化相关基因表达,以及缓解卵母细胞老化引起的DNA损伤和早期凋亡,而有效延缓卵母细胞的老化进程,进而提高卵母细胞的体外发育能力。
赵磊曾筱乔高祖维吴诗瑶彭珂严煜钧万润田梁兴伟
关键词:卵母细胞氧化应激
一种降低卵母细胞氧化应激成熟培养液制备方法与应用
本发明公开了一种降低卵母细胞氧化应激成熟培养液制备方法与应用,方法包括使用含有褪黑素的体外成熟培养液对卵母细胞进行体外成熟培养;本发明所述的卵母细胞的体外成熟培养液,包括常规培养体系和褪黑素,所述常规培养体系包括:...
徐妲潘晓燕刘丽梅王雪楠魏泽锋齐琦李爽刘晶晶
β-谷甾醇对卵母细胞体外成熟和胚胎发育的影响被引量:2
2024年
旨在探索一种自然植物提取的抗氧化分子——β-谷甾醇(β-sitosterol,SITO)对卵母细胞体外成熟效率和早期胚胎体外发育质量的影响。本研究以在卵母细胞体外成熟培养基中添加不同浓度SITO为试验组,不添加SITO(含0.16%DMSO)的培养基为对照组,对屠宰场所得巢中收集到的卵母细胞进行体外培养,试验组浓度分别为10、20、40μmol·L~(-1),不同浓度各重复3次,每组培养卵母细胞150~200枚。培养46 h后,对卵母细胞成熟率进行统计,并收集成熟卵母细胞进行活性氧、细胞凋亡、线粒体膜电位染色以及相关基因的实时荧光定量PCR;对成熟卵母细胞进行孤雌激活,2 d后统计裂率,7 d后统计囊胚率,并统计囊胚细胞总数。结果发现,20μmol·L~(-1)SITO处理显著提高了卵母细胞的体外成熟率,且促进了孤雌激活后囊胚的形成并增加了囊胚细胞数,降低了卵母细胞中ROS含量,提高了抗氧化应激基因SOD和CAT的表达;同时,SITO降低卵母细胞的凋亡水平,增加抗凋亡基因BCL-2的表达,降低促凋亡基因Caspase 3和BAX的表达。此外,SITO可增强线粒体膜电位(ΔΨm),增加TFAM基因的表达。综上所述,本研究结果表明,在卵母细胞体外成熟培养基中添加20μmol·L^(-1)SITO能够显著促进卵母细胞的体外成熟率、提高胚胎的体外发育能力和胚胎质量。
蓝昕蕊赵宝宝张碧菡林晓语马会明王勇胜
关键词:Β-谷甾醇猪卵母细胞胚胎发育ROS凋亡

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作品数:224被引量:566H指数:12
供职机构:广西大学
研究主题:卵母细胞 猪卵母细胞 体外成熟 水牛 胚胎培养
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作品数:604被引量:1,158H指数:14
供职机构:广西大学
研究主题:水牛 卵母细胞 体外成熟 猪卵母细胞 体外受精
芮荣
作品数:186被引量:446H指数:11
供职机构:南京农业大学动物医学院
研究主题:猪卵母细胞 卵母细胞 体外成熟 小鼠 体外受精
卢克焕
作品数:338被引量:998H指数:15
供职机构:广西大学动物科学技术学院
研究主题:卵母细胞 体外受精 水牛 体外成熟 猪卵母细胞
张德福
作品数:368被引量:923H指数:14
供职机构:上海市农业科学院
研究主题:卵母细胞 冷冻保存 猪卵母细胞 精液冷冻 玻璃化冷冻