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牛分支杆菌抗体荧光微球免疫层析试纸条检测方法的建立: 2024年; 为了建立一种便捷、高效、采用荧光微球免疫试纸条技术的牛分支杆菌检测方法,首先表达、纯化MPB70和MPB83蛋白,并用荧光微球进行标记,组装荧光微球免疫试纸条并进行条件优化、特异性试验、重复性试验以及灵敏性试验,建立一种检测牛分支杆菌的荧光微球免疫试纸条方法。试验表明,试纸条检测时间仅需15 min;试纸条仅对牛分支杆菌抗体阳性血清发生反应,特异性好;变异系数在3.51%~9.23%之间,重复性好;灵敏度与美国爱德士牛分支杆菌抗体检测试剂盒相当,且总符合率高达90.5%。说明建立的牛分支杆菌抗体荧光微球免疫层析试纸条检测方法具有良好的特异性、灵敏性与重复性,可为牛分支杆菌检测提供新技术支持。; 苏华彬亓菲南文龙刘蒙达孙明军焉鑫毛迎雪曲瑶孙淑芳李桂梅樊晓旭; 关键词：牛分支杆菌试纸条

一种枯草芽孢杆菌表达的牛分支杆菌ESAT-6蛋白及其制备方法: 一种枯草芽孢杆菌表达的牛分支杆菌ESAT‑6蛋白及其制备方法，属于微生物领域。针对目前牛分支杆菌ESAT‑6可溶性蛋白制备方法复杂的问题，本发明将牛分支杆菌ESAT‑6基因，插入到pNC‑HisE载体中，得到ESAT‑6...; 李海涛苗利光谷晨晨刘艳环张斌

枯草芽胞杆菌表达牛分支杆菌Mtb8.4抗原摇瓶发酵条件优化: 2018年; 为了建立枯草芽胞杆菌摇瓶发酵表达牛分支杆菌Mtb8.4抗原的制备方法,对已构建的含有pNC-HisE-Mtb8.4质粒的分泌表达载体,在枯草杆菌表达系统中进行分泌性表达,采用单因素影响试验方法,在摇瓶水平上进行了表达产量优化。结果表明,各因素的最佳条件是2SY培养基、接种浓度为6%、18h最佳种子阶段,在33℃的培养温度下振荡培养48h,目的蛋白的表达量能够达到750mg/L。该表达条件的确立,为后期生产工艺放大奠定了基础。; 李海涛张斌刘艳环刘艳环朱言柱闫喜军苗利光; 关键词：枯草芽胞杆菌发酵

牛分支杆菌HBHA基因的克隆及原核表达: 2015年; 应用PCR技术扩增牛分支杆菌肝素结合血凝素(HBHA)基因并原核表达牛分支杆菌HBHA基因,利用在线分析软件对该基因序列及编码蛋白序列进行生物信息学分析。构建原核表达载体pET28a(+)-HBHA,并转化至大肠埃希菌BL21(DE3),经0.6mmol/L IPTG诱导目的蛋白表达,采用镍离子亲和层析纯化目的蛋白,SDS-PAGE及Western blot检测表达结果。结果表明,牛分支杆菌HBHA基因完整的ORF全长600bp,编码199个氨基酸。HBHA蛋白为碱性、亲水性蛋白质,含有12个潜在的磷酸化位点,存在抗原表位,亚细胞定位主要存在于细胞核及线粒体中,蛋白空间结构以α-螺旋、无规则卷曲、β-折叠为主。成功构建了原核表达载体pET28a(+)-HBHA并在大肠埃希菌中得到了高效表达,分子质量大小为28ku,主要以可溶性形式存在。说明牛分支杆菌HBHA蛋白是一种抗原指数较高的亲水性蛋白,在原核系统能高效的表达,为进一步研究提供了理论基础。; 赵子惠温峰琴项海涛曾巧英; 关键词：牛分支杆菌生物信息学分析原核表达

牛分支杆菌ag85a基因重组乳酸菌的构建及免疫研究: 牛结核病(Bovine tuberculosis)是一种威胁着人类健康、妨碍着畜牧业发展的慢性消耗性人畜共患传染病。牛结核病的传染成全球性,发病没有明显的季节性,宿主十分广泛牛最易感,人、猪、禽类和野生动物也可患病。人类...; 刘鑫; 关键词：免疫检测

牛分支杆菌ag85a基因的重组腺病毒的构建与表达: 众所周知，人畜共患病长久以来一直威胁着人类健康、妨碍着畜牧业的发展。牛结核病（Bovine tuberculosis）是一种在世界范围内流行的严重传染病，是以牛结核分枝杆菌(M.bovis)为病原体、宿主范围十分广泛，对...; 关佳宁

生鲜牛奶中牛分支杆菌PCR检测方法的建立: 牛结核病是一种主要由牛分支杆菌引起的人畜共患的慢性消耗性传染病。世界动物卫生组织（OIE）将其列为必须通报的疫病，在我国属二类动物传染病。牛分支杆菌感染牛时的靶器官主要是肺，病菌可以随呼吸道分泌物排到环境中，随着病程的发...; 程亮; 关键词：牛分支杆菌生鲜牛奶

生鲜牛奶中牛分支杆菌PCR检测方法的建立被引量：2: 2013年; 为建立生鲜牛奶中牛分支杆菌的PCR检测方法,选择牛分支杆菌pncA的基因序列中一段大小为423bp的片段作为靶序列,设计并合成一对引物,对所建立的PCR方法进行了特异性、敏感性和重复性试验。结果表明,建立的PCR方法在牛分支杆菌污染模型乳中成功扩增出了423bp的特异性目的条带,而分别添加有沙门菌、大肠埃希菌、无乳链球菌、金黄色葡萄球菌、嗜肺巴氏杆菌、铜绿假单胞菌及枯草杆菌的乳样中均未扩增出任何条带。牛分支杆菌的DNA最低检测限为12.18pg/μL,牛分支杆菌污染牛奶模型的敏感性为3cfu/mL。建立的方法可用于牛奶中牛分支杆菌的检测。; 程亮宁蓬勃张彦明曹伟伟刘伟战仁武; 关键词：牛分支杆菌聚合酶链反应生鲜牛奶

牛分支杆菌ag85b基因的克隆及表达被引量：1: 2013年; 以牛分支杆菌C68001株基因组DNA为模板,克隆免疫优势抗原基因ag85b,构建重组表达质粒pET-28a-ag85b,转化入大肠埃希菌BL21(DE3),IPTG诱导表达重组蛋白,对表达产物进行SDS-PAGE分析和Western blot鉴定。结果表明,构建了ag85b基因的重组基因工程菌株,IPTG诱导表达的重组蛋白分子质量约为33ku,目的蛋白能被His单克隆抗体识别,表达产物主要以包涵体形式存在。; 马玢曾瑾李武刘晓明邓光存; 关键词：牛分支杆菌原核表达

PPD阳性牛与健康牛巨噬细胞抗牛分支杆菌感染的差异研究: 牛结核病(BTB)主要是由牛分枝杆菌(M.boyis)引起的一种慢性进行性传染病，长期以来在世界范围内对畜牧业造成严重危害。为了阐明牛结核引发的机体免疫反应特性，本研究中，我们对结核菌素(PPD)阳性牛和健康牛的单核细胞...; 周向梅王洋林敬钧尹菲许立华黄瑛丁天健赵德明; 关键词：牛结核病分枝杆菌巨噬细胞免疫反应

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