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冬虫夏草提取物对混合淋巴细胞培养体系Treg/Th17轴的影响被引量：5: 2016年; 目的观察冬虫夏草提取物对混合淋巴细胞(MLC)培养体系Treg/Th17轴的影响,探讨冬虫夏草提取物的免疫调节机制。方法体外建立单向混合淋巴细胞培养体系,用冬虫夏草提取物干预培养体系,在不同的时间点收集细胞,采用流式细胞术检测细胞中辅助性T细胞17(Th17细胞)和CD4+CD25+T调节性T淋巴细胞(Treg细胞)的比例,并计算出Th17细胞与Treg细胞的比值;采用酶联免疫吸附试验法分别检测培养液白细胞介素(IL)-17、IL-23、IL-2和IL-6的浓度。结果冬虫夏草提取物干预组12、24、36h三个时间点T细胞中Treg细胞比例分别为(13.17±1.25)%、(12.3±1.31)%、(11.89±1.46)%,同时间点对照组T细胞Treg细胞比例分别为(11.04±1.32)%、(10.16±1.15)%、(8.91±0.97)%,差异均有统计学意义(P<0.05);干预组T细胞中Th17细胞比例分别为(2.81±0.13)%、(4.02±0.38)%、(4.95±0.49)%,同时间点的对照组T细胞中Th17细胞比例分别为(4.65±0.31)%、(6.63±0.63)%、(8.03±0.76)%,差异均有统计学意义(P<0.05)。冬虫夏草提取物干预组12、24、36h三个时间点T细胞中Th17细胞与Treg细胞的比例均显著低于同时间点的对照组(P<0.05)。冬虫夏草提取物干预组12、24、36h三个时间点培养液IL-2水平明显高于同时间点对照组(P<0.05),而干预组培养液IL-6、IL-17、IL-23水平低于同时间点的对照组(P<0.05)。结论冬虫夏草提取物能够明显促进MLC体系细胞中Treg细胞增殖,抑制Thl7细胞增殖,降低Th17/Treg细胞比值,改变Th17/Treg轴的平衡,同时增加IL-2分泌、减少IL-6、IL-17、IL-23分泌,有利于诱导免疫耐受。; 杨梅张岩金昊李一夫夏鹏郑少玲蔡勇陈必成杨亦荣; 关键词：冬虫夏草提取物辅助性T细胞17 调节性T细胞

沉默CD86树突状细胞在异种胰岛混合淋巴细胞培养中的作用研究: 2015年; 目的探讨沉默CD86的树突状细胞(DC)在异种胰岛混合淋巴细胞培养中的作用。方法分离培养BALB/c小鼠骨髓来源DC,流式细胞仪鉴定后,以CD86siRNA转染DC。分离纯化SD大鼠胰岛,吖啶橙(AO)/碘化丙啶(PI)双荧光染色方法检测胰岛细胞活性;提取SD大鼠脾脏淋巴细胞,与经siRNA沉默CD86的DC混合培养,使DC负载SD大鼠抗原。在400胰岛当量SD大鼠胰岛细胞+1×106个BALB/c小鼠淋巴细胞(对照组1)基础上,混合普通DC(负载SD大鼠抗原)(对照组2)或siRNA沉默CD86的DC(负载SD大鼠抗原)(实验组)进行体外培养,另以单纯SD大鼠胰岛细胞为空白组,培养3d后倒置显微镜下检测细胞形态学变化,测定上清液中反映淋巴细胞增殖的细胞因子白介素(IL)-2、IL-4、IL-10及干扰素(IFN)-γ水平,AO/PI染色观察胰岛活性,并行葡萄糖刺激胰岛素释放实验,计算刺激指数。结果培养所得的细胞具有典型的DC形态,流式细胞仪检测DC表面CD11c、CD80、CD86的表达阳性率分别为(86.26±9.73)%、(72.64±8.55)%、(77.18±10.23)%。CD86siRNA转染DC后CD86沉默。SD大鼠胰岛杂质较少,形态正常,细胞活性>95%。混合细胞培养3d后,与对照组1、2比较,实验组的IL-10水平升高(P<0.05),IL-4水平相当(P>0.05),IL-2、IFN-γ均降低(P<0.05),淋巴细胞增殖最少,胰岛功能最好,刺激指数最高。实验组4种细胞因子均高于空白组(P<0.05),刺激指数低于空白组(P<0.05)。结论沉默CD86的DC负载供体抗原后,与供体胰岛、受体淋巴细胞混合培养,可在一定程度上减轻免疫排斥反应,从而保护供体胰岛功能。; 苏安平田伯乐张肇达李全生; 关键词：树突状细胞异种胰岛移植 CD80/CD86

硼替佐米对混合淋巴细胞培养体系细胞活性影响的研究被引量：1: 2009年; 目的:探讨蛋白酶体抑制剂硼替佐米对混合淋巴细胞(MLC)培养体系细胞活性、细胞凋亡率的影响。方法:体外建立单向混合淋巴细胞培养体系,分别用0、2、4、8nmol/L的硼替佐米干预培养体系,在不同的时间点收集细胞,采用CCK-8法检测细胞活性、流式细胞术检测细胞凋亡率、Western印迹法检测胞内NF-κBP65表达。结果:(1)硼替佐米可明显抑制MLC体系细胞增殖(P<0.05),对MLC体系细胞活性的抑制作用表现为剂量依赖关系,8nmol/L硼替佐米作用24h后细胞活性抑制率为41.35%。(2)硼替佐米作用于细胞后细胞凋亡率增加(P<0.05),8nmol/L硼替佐米作用36h细胞凋亡率为(61.67±3.21)%。(3)硼替佐米作用后胞内NF-κBP65的表达下降(P<0.05)。结论:硼替佐米能通过阻断NF-κB的活化而抑制MLC体系细胞活性,诱导细胞凋亡。; 吴圣豪李俊白郑翠萍; 关键词：混合淋巴细胞培养细胞活性硼替佐米小鼠

曲古抑菌素A对小鼠混合淋巴细胞培养中淋巴细胞增殖和IL-2表达的影响被引量：4: 2008年; 目的研究曲古抑菌素A(TSA)对小鼠体外混合淋巴细胞培养中淋巴细胞增殖及IL-2表达的影响,探讨TSA对T细胞免疫功能的影响。方法采用0.16、0.8、4、20、100、500nmol/L倍比浓度TSA作用于BALB/c及C57BL小鼠混合淋巴细胞培养体系,根据不同的OD值测定12、24、48h各浓度TSA对T淋巴细胞增殖的抑制率;相同浓度梯度TSA再作用于经丝裂霉素处理过的BALB/c淋巴细胞与C57BL淋巴细胞单向混合淋巴细胞培养体系,以环磷酰胺作对照,应用流式细胞技术观察其对IL-2表达的影响。结果TSA可以抑制小鼠混合淋巴细胞培养中T淋巴细胞的增殖,这种抑制能力表现出明显的量效及时效依赖性;TSA也显著抑制经刺激激活的小鼠T淋巴细胞的IL-2的表达,并且随着TSA浓度的升高,IL-2表达逐步下降,但与CTX比较有显著性差异(P<0.01)。结论TSA能抑制混合淋巴细胞培养中淋巴细胞的增殖,减少激活T淋巴细胞IL-2的表达,降低T细胞的免疫活性,能够减弱对外来抗原刺激的免疫应答。; 魏强于立新邓文锋叶俊生; 关键词：曲古抑菌素A 混合淋巴细胞培养去乙酰化酶抑制剂白细胞介素-2

硼替佐米对混合淋巴细胞培养体系细胞因子的影响: 2008年; 目的探讨蛋白酶体抑制剂硼替佐米(bortezomib)对混合淋巴细胞培养体系中细胞凋亡、细胞因子水平的影响。方法体外建立单向混合淋巴细胞培养(MLC)体系,分别用2、4、8 nmol/L的硼替佐米干预反应体系,在不同的时间点收集细胞,流式细胞仪检测细胞凋亡率、ELISA法检测培养上清液中白细胞介素2(IL-2)、γ干扰素(IFN-γ)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的含量。结果硼替佐米作用于细胞12、24、36 h后细胞凋亡率逐渐增加,8 nmol/L硼替佐米作用36 h细胞凋亡率为(61.67±3.21)%;硼替佐米作用24 h后上清液中IL-2、IFN-γ、TNF-α浓度减小,8 nmol/L组的IL-2、IFN-γ、TNF-α浓度分别为(88.27±2.76)ng/L、(57.36±2.08)ng/L、(22.19±0.88)ng/L。结论硼替佐米能诱导细胞凋亡,使混合淋巴细胞培养体系细胞分泌的Th1型细胞因子减少。; 吴圣豪李振宇徐开林潘秀英曾令宇; 关键词：混合淋巴细胞培养细胞因子细胞凋亡硼替佐米小鼠

原核表达、稀释复性的可溶性HLA-G1抑制混合淋巴细胞培养中T细胞增殖: 2007年; 目的：探讨原核表达体外稀释复性的可溶性人类白细胞抗原G1（soluble　HLA-G1，sHLA-G1）对体外混合淋巴细胞反应中T细胞增殖的影响。方法利用原核表达的sHIA-G1的重链、轻链及人工合成的九肽，折叠形成正确构象的sHLA-G1．肽复合物；在混合淋巴细胞培养（MLC）体系中加入折叠所得的sHLA-G1-肽复合物及相同浓度的对照物，流式细胞仪检测T细胞的增殖情况。结果sHLA-G1．肽复合物加入到混合淋巴细胞培养中能够抑制T细胞的增殖，3个个体的抑制率分别为28．5％、32．5％及22．1％（Dunnett t检验，P〈0．05）；这种抑制作用可以被HLA-G特异性McAb（G11E5）所逆转。结论通过原核表达，体外稀释复性的方法可以大量制备正确构象的sHLA-G1-肽复合物，该复合物分子能够抑制混合淋巴细胞培养中T细胞的增殖。; 夏芳珍钟茂华张彩娥陆盛军吴雄文梁智辉龚非力; 关键词：T细胞增殖人类白细胞抗原G 混合淋巴细胞反应

AG490对混合淋巴细胞培养中人淋巴细胞增殖及分化的影响被引量：2: 2007年; 目的探讨AG490对混合淋巴细胞培养(mixed lymphocyte culture,MLC)中人淋巴细胞增殖和分化的影响。方法应用MLC法诱导人淋巴细胞产生增殖,观察在不同干预剂(AG490、CsA、FK506)作用下人淋巴细胞增殖的抑制率及淋巴细胞亚群分化的变化。结果AG490在体外实验中,对人淋巴细胞(T、B混合存在)增殖反应均有明显的抑制作用。尤其是对CD3细胞及CD4细胞其抑制作用更为明显。结论AG490可能是一种潜在的免疫抑制剂,具有较大的研究和应用前景。; 王彬冯新顺薛武军; 关键词：AG490 淋巴细胞免疫抑制剂

siRNA干扰ADAR1表达对小鼠混合淋巴细胞培养的影响被引量：3: 2007年; 目的:研究靶向ADAR1基因的siRNA在小鼠双向混合淋巴细胞培养中所扮演的角色.方法:将化学合成的靶向ADAR1基因的siRNA在Lipofectamine 2000介导下转染处于双向混合淋巴细胞培养试验中的小鼠淋巴细胞,观察转染组与未转染组细胞表型的变化;通过RT-PCR检测两组细胞中ADAR1 mRNA的变化;细胞计数和台盼蓝拒染法检测靶向ADAR1基因的siRNA对小鼠淋巴细胞增殖的抑制作用;四甲基偶氮唑蓝(MTT)法评价转染化学合成的靶向ADAR1基因的siRNA后对小鼠淋巴细胞增殖的抑制作用.结果:在经典淋巴细胞混合培养试验中,转染靶向ADAR1基因的siRNA可以明显降低小鼠淋巴细胞内ADAR1的表达,同时ADAR1-siRNA对小鼠淋巴细胞的增殖有抑制作用.结论:在经典淋巴细胞混合培养试验中,化学合成的靶向ADAR1基因的siRNA能有效抑制ADAR1基因在小鼠淋巴细胞中的表达,并对小鼠淋巴细胞增殖有抑制作用.; 蔡磊霍斌亮张巍张福琴赵青川; 关键词：SIRNA 排斥反应

可溶性HLA-G1-肽复合物的体外折叠及其对混合淋巴细胞培养中T细胞增殖的影响: 人类白细胞抗原/(humanleukocyteantigen,HLA/)G基因是1987年由Geraghty等克隆并测序的一类非经典HLA I类基因,可通过不同的剪切方式翻译出七种不同结构的蛋白,包括4种跨膜型和3种可溶...; 夏芳珍; 关键词：人类白细胞抗原G CFSE 混合淋巴细胞反应

抗MHCⅡ单克隆抗体对猪外周血混合淋巴细胞培养的影响: 目的：观察不同浓度抗MHC Ⅱ单克隆抗体对猪外周血混合淋巴细胞的影响. 方法：应用混合淋巴细胞反应(MLR)模型,建立对照组,观察不同浓度抗MHC Ⅱ单克隆抗体预处理供体外周血淋巴细胞,并进一步加入受体淋巴细胞...; 方东林; 关键词：细胞培养混合淋巴细胞

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