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移植前供受者混合 淋巴细胞 反应后转录组测序预测重度急性移植物抗宿主病 本文分为以下几个部分进行探讨: 第一部分 移植前供受者混合 淋巴细胞 反应后转录组测序预测重度急性移植物抗宿主病 研究背景: 异基因造血干细胞 移植(allo-HSCT)是目前治疗多种恶性血液病和非恶性血液病的重要方法,... 刘佳关键词:急性移植物抗宿主病 混合淋巴细胞反应 转录组测序 一种用于混合 淋巴细胞 共培养试验检测的方法和试剂盒 本发明公开了一种用于混合 淋巴细胞 共培养试验检测的方法和试剂盒。本发明的方法和试剂盒可用于混合 淋巴细胞 共培养试验的检测,适用于器官移植前的组织配型试验,免疫力低下患者的免疫功能检测,药物及移植物的免疫排斥作用检测,其他细胞 ... 杜飞ILT基因转染小鼠树突状细胞 抑制混合 淋巴细胞 反应 2016年 通过体外培养扩增受体小鼠来源的骨髓树突状细胞 ,转染ILT基因后体外与供体造血干细胞 移植物混合 培养,通过抑制混合 淋巴细胞 反应,从而改善移植物抗宿主反应;方法 分离培养小鼠DC,以ILT重组腺病毒转染培养的DC,混合 淋巴细胞 反应检测转染细胞 的功能。结果 与对照组相比转染细胞 能明显地抑制混合 淋巴细胞 反应。 胡慧平 王恺 张晋萍关键词:树突状细胞 基因转染 冬虫夏草提取物对混合 淋巴细胞 培养体系Treg/Th17轴的影响 被引量:5 2016年 目的观察冬虫夏草提取物对混合 淋巴细胞 (MLC)培养体系Treg/Th17轴的影响,探讨冬虫夏草提取物的免疫调节机制。方法体外建立单向混合 淋巴细胞 培养体系,用冬虫夏草提取物干预培养体系,在不同的时间点收集细胞 ,采用流式细胞 术检测细胞 中辅助性T细胞 17(Th17细胞 )和CD4+CD25+T调节性T淋巴细胞 (Treg细胞 )的比例,并计算出Th17细胞 与Treg细胞 的比值;采用酶联免疫吸附试验法分别检测培养液白细胞 介素(IL)-17、IL-23、IL-2和IL-6的浓度。结果冬虫夏草提取物干预组12、24、36h三个时间点T细胞 中Treg细胞 比例分别为(13.17±1.25)%、(12.3±1.31)%、(11.89±1.46)%,同时间点对照组T细胞 Treg细胞 比例分别为(11.04±1.32)%、(10.16±1.15)%、(8.91±0.97)%,差异均有统计学意义(P<0.05);干预组T细胞 中Th17细胞 比例分别为(2.81±0.13)%、(4.02±0.38)%、(4.95±0.49)%,同时间点的对照组T细胞 中Th17细胞 比例分别为(4.65±0.31)%、(6.63±0.63)%、(8.03±0.76)%,差异均有统计学意义(P<0.05)。冬虫夏草提取物干预组12、24、36h三个时间点T细胞 中Th17细胞 与Treg细胞 的比例均显著低于同时间点的对照组(P<0.05)。冬虫夏草提取物干预组12、24、36h三个时间点培养液IL-2水平明显高于同时间点对照组(P<0.05),而干预组培养液IL-6、IL-17、IL-23水平低于同时间点的对照组(P<0.05)。结论冬虫夏草提取物能够明显促进MLC体系细胞 中Treg细胞 增殖,抑制Thl7细胞 增殖,降低Th17/Treg细胞 比值,改变Th17/Treg轴的平衡,同时增加IL-2分泌、减少IL-6、IL-17、IL-23分泌,有利于诱导免疫耐受。 杨梅 张岩 金昊 李一夫 夏鹏 郑少玲 蔡勇 陈必成 杨亦荣关键词:冬虫夏草提取物 辅助性T细胞17 调节性T细胞 PDL_1Ig基因修饰的恒河猴肝细胞 在混合 淋巴细胞 反应中的效应研究 被引量:1 2015年 目的探讨恒河猴来源的PDL1Ig在体外混合 淋巴细胞 反应中的作用。方法在Gen Bank中检索到恒河猴目的基因PDL1和Ig G1Fc的序列,采用重叠延伸PCR法合成该目的基因,与p GEM-T连接转化感受态E.coli TOP10,经鉴定得到PDL1Ig基因,p Shuttle-CMV线性化后连接目的基因转化感受态E.coli TOP10,克隆p Shuttle-CMV/PDL1Ig重组穿梭质粒。将p Ad Easy-1和线性p Shuttle-CMV/PDL1Ig共电转至BJ5183细胞 中同源重组,构建重组腺病毒载体p Ad Easy-1/PDL1Ig骨架,以脂质体2000将p Ad Easy-1/PDL1Ig转染至293细胞 中包装成有活性的重组腺病毒。感染恒河猴肝细胞 ,RT-PCR和Western blotting检测目的基因的表达。混合 淋巴细胞 反应(MLR)测定其生物学活性。结果成功构建了PDL1Ig重组腺病毒载体,能感染恒河猴肝细胞 ,RT-PCR和Western blotting检测有目的基因表达,在混合 淋巴细胞 反应中其能抑制T细胞 增殖。结论成功构建了p Ad Easy-1/PDL1Ig重组腺病毒载体,其可在恒河猴肝细胞 中高效表达,该重组蛋白可在体外通过PD-1/PDL1通路抑制T淋巴细胞 增殖。 李鹏 张玉毅 李恒平 丁正华 王毅 赵云 邓仲鸣关键词:腺病毒载体 混合淋巴细胞反应 沉默CD86树突状细胞 在异种胰岛混合 淋巴细胞 培养中的作用研究 2015年 目的探讨沉默CD86的树突状细胞 (DC)在异种胰岛混合 淋巴细胞 培养中的作用。方法分离培养BALB/c小鼠骨髓来源DC,流式细胞 仪鉴定后,以CD86siRNA转染DC。分离纯化SD大鼠胰岛,吖啶橙(AO)/碘化丙啶(PI)双荧光染色方法检测胰岛细胞 活性;提取SD大鼠脾脏淋巴细胞 ,与经siRNA沉默CD86的DC混合 培养,使DC负载SD大鼠抗原。在400胰岛当量SD大鼠胰岛细胞 +1×106个BALB/c小鼠淋巴细胞 (对照组1)基础上,混合 普通DC(负载SD大鼠抗原)(对照组2)或siRNA沉默CD86的DC(负载SD大鼠抗原)(实验组)进行体外培养,另以单纯SD大鼠胰岛细胞 为空白组,培养3d后倒置显微镜下检测细胞 形态学变化,测定上清液中反映淋巴细胞 增殖的细胞 因子白介素(IL)-2、IL-4、IL-10及干扰素(IFN)-γ水平,AO/PI染色观察胰岛活性,并行葡萄糖刺激胰岛素释放实验,计算刺激指数。结果培养所得的细胞 具有典型的DC形态,流式细胞 仪检测DC表面CD11c、CD80、CD86的表达阳性率分别为(86.26±9.73)%、(72.64±8.55)%、(77.18±10.23)%。CD86siRNA转染DC后CD86沉默。SD大鼠胰岛杂质较少,形态正常,细胞 活性>95%。混合 细胞 培养3d后,与对照组1、2比较,实验组的IL-10水平升高(P<0.05),IL-4水平相当(P>0.05),IL-2、IFN-γ均降低(P<0.05),淋巴细胞 增殖最少,胰岛功能最好,刺激指数最高。实验组4种细胞 因子均高于空白组(P<0.05),刺激指数低于空白组(P<0.05)。结论沉默CD86的DC负载供体抗原后,与供体胰岛、受体淋巴细胞 混合 培养,可在一定程度上减轻免疫排斥反应,从而保护供体胰岛功能。 苏安平 田伯乐 张肇达 李全生关键词:树突状细胞 异种胰岛移植 CD80/CD86 表达US3腺病毒载体对混合 淋巴细胞 和NK细胞 反应中γ干扰素和穿孔素表达的影响 2015年 目的探讨表达US3基因的重组腺病毒载体介导其转染供体外周血单个核细胞 (PBMCs)的免疫逃逸活性。方法首先构建表达US3基因的腺病毒载体,扩增纯化后转染供体PBMCs,利用混合 淋巴细胞 和NK细胞 反应,通过检测反应中γ干扰素和穿孔素的表达量,观察表达US3基因重组腺病毒载体的免疫活性。结果表达US3基因重组腺病毒载体r-US3能够明显降低混合 淋巴细胞 和NK细胞 反应中细胞 因子γ干扰素和穿孔素的产量,抑制混合 淋巴细胞 和NK细胞 反应活性。结论表达US3基因腺病毒载体在一定程度上能够介导其转染供体PBMCs的免疫逃逸,降低机体免疫系统对其转染细胞 的排斥反应。 王鹏 阚全程 李玲 潘雪 余祖江关键词:免疫逃逸 Γ干扰素 穿孔素 MG132诱导HL-60细胞 表达共刺激分子CD86及其对混合 淋巴细胞 反应的影响(英文) 2014年 本研究探讨蛋白酶体抑制剂MG132诱导HL-60细胞 表达共刺激分子CD80、CD86及其对混合 淋巴细胞 反应的作用。流式细胞 仪检测MG132诱导HL-60细胞 表达共刺激分子CD80、CD86及细胞 活力;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)分析CD80和CD86 mRNA表达情况;MG132诱导HL-60细胞 表达共刺激分子CD86后,用75 Gy Co-60照射HL-60细胞 ,杀死HL-60细胞 ,保留抗原性作为刺激细胞 ,用健康人外周血单个核细胞 作为反应细胞 ,用不同浓度HL-60细胞 刺激健康人单个核细胞 ,HL-60细胞 对健康人单个核细胞 的增殖作用。结果表明:MG132上调HL-60细胞 表达CD86,MG132诱导HL-60细胞 的凋亡率呈浓度依耐性和时间依耐性。结论:高浓度的MG132对HL-60细胞 有直接杀灭作用,低浓度MG132诱导HL-60细胞 表达共刺激分子CD86,对健康人单个核细胞 有增殖作用。MG132诱导HL-60细胞 表达共刺激分子CD86,能促进健康人单个核细胞 的增殖。 余美霞 刘迅 周咏明 程艳香 程静 邱宇珍 邢晓磊 姚春红 白如君关键词:蛋白酶体抑制剂 共刺激分子 CD86 牙髓干细胞 MHC分子表达与体外混合 淋巴细胞 的增殖 被引量:6 2014年 背景:若牙髓干细胞 诱导分化后仍然具有与未分化时相似的免疫调节能力,则有可能为组织工程提供同种异体种子细胞 来源。目的:观察牙髓干细胞 表面免疫分子的表达以及体外调节淋巴细胞 反应的功能。方法:从C57BL/6小鼠牙髓组织中分离获取牙髓干细胞 ,体外培养至第2代,流式细胞 仪检测免疫分子MHC-Ⅰ、MHC-Ⅱ的表达。以1×105/孔牙髓干细胞 刺激异体淋巴细胞 ,观察细胞 增殖情况。以1×105/孔数量的牙髓干细胞 或经γ-干扰素作用后的牙髓干细胞 加入混合 双向淋巴细胞 反应体系中,观察淋巴细胞 增殖情况。结果与结论:牙髓干细胞 表达MHC-Ⅰ类分子,但未检测到MHC-Ⅱ类分子阳性表达。γ-干扰素刺激48 h后,MHC-Ⅰ表达未见明显增高,MHC-Ⅱ类分子表达明显增高。异体或经γ-干扰素作用的牙髓干细胞 均未能刺激淋巴细胞 体外增殖。说明牙髓干细胞 可在体外调节淋巴细胞 增殖反应,有可能成为组织工程或细胞 治疗中同种异体细胞 来源。 聂姗姗 刘佳 张瑞涵 王璇 李伯琦 孙大磊 热甫卡提 刘奕杉关键词:干细胞 牙髓 牙髓干细胞 混合淋巴细胞培养 MHC抗原 霉酚酸及其衍生物对人T淋巴细胞 及混合 淋巴细胞 免疫应答的影响 被引量:1 2013年 目的探讨霉酚酸及霉酚酸衍生物对人T淋巴细胞 和混合 淋巴细胞 免疫应答的影响。方法从正常人外周血中分离单个核淋巴细胞 (PBMC),在抗CD3刺激下和混合 淋巴细胞 反应体系中,加入或不加霉酚酸及其衍生物共培养,应用ELISA和流式细胞 术检测CD4+和CD8+T细胞 细胞 因子的产生、细胞 活化和增殖情况。结果经抗CD3刺激后,PBMC产生的细胞 因子明显增加,加入霉酚酸及其衍生物后,IFN-γ及TNF-α明显降低,IL-2产生略有增加。在混和淋巴细胞 反应体系中,3种细胞 因子产生皆被抑制。抗CD3刺激和混和淋巴细胞 反应后,T细胞 表面活化分子CD25及CD69表达增加,加入霉酚酸及其衍生物共培养24、48 h后,T细胞 CD25及CD69的表达并未被抑制。霉酚酸及其衍生物可抑制抗CD3刺激下和混和淋巴细胞 反应后T细胞 的增殖。结论霉酚酸及其衍生物对T淋巴细胞 和混合 淋巴细胞 体系中因子的产生和细胞 增殖都有抑制作用,为其在临床自身免疫疾病及移植排斥中的广泛应用提供了理论依据。 孙怡 杨滨燕 王慧 吴长有关键词:霉酚酸 T细胞 混合淋巴细胞培养
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张学光 作品数:1,065 被引量:2,583 H指数:19 供职机构:苏州大学附属第一医院 研究主题:单克隆抗体 树突状细胞 共刺激分子 CD40 T细胞 易善红 作品数:73 被引量:257 H指数:9 供职机构:第三军医大学新桥医院 研究主题:HLA衍生肽 膀胱癌 多药耐药性 血红素氧化酶-1 肾脏 汪泽厚 作品数:112 被引量:252 H指数:9 供职机构:空军总医院 研究主题:肾移植 HLA衍生肽 肾移植术后 免疫抑制剂 免疫耐受 吴雄文 作品数:173 被引量:415 H指数:10 供职机构:华中科技大学 研究主题:实验教学 HLA-A2 可溶性 HLA 教学改革 张艮甫 作品数:244 被引量:566 H指数:10 供职机构:第三军医大学新桥医院 研究主题:肾移植 肾病 移植肾 肾移植受者 排斥反应