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一种感染柯萨奇病毒A16的小鼠模及其构建方法
本发明公开一种感染柯萨奇病毒A16的小鼠模及其构建方法,具体步骤为把Rosa26位点的左同源臂LHA连接到质粒pCAG‑GFP‑N1上,成功构建出质粒pCAG‑GFP‑N1‑Rosa26 LHA。然后使用高保真酶PC...
黄璋琼吴海婷范胜涛叶尤松黄真张艺薇王子鸥江勤芳李云
穿心莲内酯体外抗肠道病毒71柯萨奇病毒A16的作用
2025年
目的观察穿心莲内酯体外抗肠道病毒71(enteroviruses 71,EV71)和柯萨奇病毒A16(coxsackievirus A16,CA16)的作用效果。方法采用细胞病变(cytopathic effect,CPE)法和噻唑蓝(thiazolyl blue tetrazolium bromide,MTT)法测定穿心莲内酯对人恶性胚胎横纹肌瘤细胞(human rhabdomyosarcoma cells,RD)的最大无毒剂量和穿心莲内酯对感染细胞后的EV71和CA16体外抑制作用;通过荧光定量PCR法检测穿心莲内酯溶液对EV71和CA16中VP1基因,RD细胞中3种促炎因子IL-1β、IL-6和TNF-α在基因水平的变化。结果MTT结果显示穿心莲内酯对RD细胞的最大无毒剂量为78μg/mL;手足口病毒感染细胞,随后分别经78.00、39.00、19.50、9.75、4.88、2.44μg/mL的穿心莲内酯溶液处理,感染EV71病毒的细胞存活率增加至(82.41±1.76)%、(79.54±2.91)%、(81.02±1.99)%、(71.81±2.26)%、(52.87±1.51)%和(50.41±0.93)%,感染CA16病毒的细胞存活率增加至(81.00±0.64)%、(79.72±1.38)%、(61.59±3.47)%、(53.37±0.53)%、(52.41±1.37)%和(43.69±0.40)%,表明穿心莲内酯能明显降低EV71和CA16引起的细胞病变效应;手足口病毒感染后,用78.00、39.00、19.50、9.75μg/mL的穿心莲内酯溶液给药,显示EV71和CA16中VP1,RD细胞中促炎因子IL-1β、IL-6和TNF-α表达量与病毒对照组相比均有明显降低,结果表明手足口病毒感染后,用穿心莲内酯溶液给药,对手足口病毒的VP1基因表达产生明显抑制作用,且能降低IL-1β、TNF-α、IL-6在mRNA水平的表达。结论穿心莲内酯具有明显的体外抗EV71和CA16病毒的效果,其可能通过抑制促炎因子IL-1β、TNF-α、IL-6的表达,从而发挥抗EV71和CA16病毒的作用。
纪洵敏梁宇恒何炽明肖微彭晓放谭丽容曾宏强唐颜柯昌文张磊
关键词:穿心莲内酯手足口病肠道病毒71型柯萨奇病毒A16型抗病毒作用
用于柯萨奇病毒A16纯化的层析工艺缩小模的评价
2024年
目的验证柯萨奇病毒A16(coxsackie virus A16,CV-A16)凝胶过滤层析和离子交换层析缩小规模与生产规模的工艺性能的等价性。方法采用线性缩小的方法,分别使用缩小规模和生产规模凝胶过滤层析和离子交换层析进行3批CV-A16病毒浓缩液的纯化,并对收集液进行病毒蛋白、抗原、牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA)、宿主细胞蛋白(host cell protein,HCP)含量、粒径、体积排阻-高效液相色谱(size exclusion column-high performance liquid chromatography,SEC-HPLC)、SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)分析。基于层析峰图和收集液检测结果,进行凝胶过滤层析和离子交换层析缩小规模和生产规模的等价检验(two-one-sided test,TOST)统计分析。结果凝胶过滤层析缩小规模和生产规模柱效均合格,层析图谱保持一致,缩小规模和生产规模抗原含量、抗原回收率、蛋白含量、杂蛋白去除率、BSA含量、BSA去除率、HCP含量和HCP去除率均等价(P均<0.05)。离子交换层析缩小规模和生产规模柱效合格,缩小规模和生产规模抗原含量、抗原回收率、蛋白含量、杂蛋白去除率、BSA含量、BSA去除率、HCP含量和HCP去除率均等价(P均<0.05)。缩小规模和生产规模粒径、SEC-HPLC和SDS-PAGE纯度相关工艺性能指标均具有可比性。层析图谱峰高只有均值等价,存在非等价风险。结论CV-A16凝胶过滤层析和离子交换层析缩小规模与生产规模工艺性能具有等价性。
万鑫游磊彭峰孟胜利郭靖王泽鋆申硕
关键词:柯萨奇病毒A16型凝胶过滤层析离子交换层析
一种快速检测柯萨奇病毒A16、肠道病毒71的RDA方法及试剂盒
本发明公开一种快速检测柯萨奇病毒A16、肠道病毒71的RDA方法及试剂盒,包括特异性引物对以及RDA荧光标记探针,以实现对柯萨奇病毒A16(CA16)、肠道病毒71(EV71)进行安全、特异、灵敏、简便的检测,从...
陈翀刘华勇谢婵芳黄嘉恩
柯萨奇病毒A16保护性单克隆抗体的制备及其应用
本发明提供了柯萨奇病毒A16保护性单克隆抗体的制备及其应用,具体地,本发明公开了一株针对CVA16病毒的单克隆抗体、编码抗体和抗体片段的核酸序列及其制备方法。体外实验证实本发明的抗体对CVA16病毒都显示很强的预防和治...
黄忠张超石金平
2011-2020年天津市健康人群柯萨奇病毒A16血清中和抗体动态变化研究
2024年
目的 了解天津市健康人群CVA16中和抗体动态变化,为防控手足口病提供依据.方法 采集7 934名天津市健康人的血清进行CVA16中和抗体测定,对检测结果进行分析.结果 CVA16中和抗体阳性率为84.04%,0~5岁年龄组的抗体阳性率最低为65.58%.不同年份间的抗体阳性率有统计学意义;不同区域间、不同年龄组的抗体阳性率均有统计学意义;不同年龄组的抗体滴度有统计学意义,其中5岁及以下年龄的儿童抗体滴度仅0~0.5岁年龄组与其他年龄组抗体滴度有统计学意义.以健康人群CVA16中和抗体阳性率作为应变量,对健康人群的年龄及环境等进行Logistic回归分析,发现半年内去医院和年龄增长是感染CVA16的危险性因素.CVA16中和抗体阳性率与病原阳性率呈负相关关系,第一年的抗体阳性率高第二年的CVA16病原阳性率则低.结论 5岁及以下儿童和流动人口较多地区应作为手足口病防控的重点,CVA16抗体阳性率可以做为估测CVA16流行趋势的依据.
李佳萌吕莉琨谭昭麟张颖
关键词:中和抗体
柯萨奇病毒A16YY157病毒株的遗传特征分析
2023年
目的了解柯萨奇病毒A16YY157病毒株的基因特征和繁殖特性,探讨其用于疫苗开发的可能性。方法利用RT-PCR方法扩增YY157病毒株全基因组,对PCR产物进行序列测定并拼接为全长序列。利用Lasergene及MEGA软件对所获序列进行同源性比较和进化树分析。结果YY157病毒株与国内其他流行株在核苷酸水平的同源性介于75.0%~98.8%,氨基酸水平的同源性介于87.8%~99.2%。结论柯萨奇病毒A16YY157病毒株与其他国内流行株高度同源,主要抗原位点保持一致,可用于疫苗开发研究。
高丽美周康凤朱莲唐彩华
关键词:全基因组测序柯萨奇病毒A16型同源性
柯萨奇病毒A16核酸检测试剂国家参考品的建立
2023年
目的 建立柯萨奇病毒A16(coxsackievirus A16,CA16)核酸检测试剂国家参考品,并制定其质量标准。方法收集并筛选CA16核酸阳性和阴性样本,分装、冻干后,建立CA16核酸检测试剂国家参考品。采用不同企业的试剂对参考品进行协作标定,根据协作标定结果确定参考品的质量标准,并考察其均匀性和稳定性。结果 CA16核酸检测试剂国家参考品由9份阳性参考品,8份阴性参考品,1份检测限参考品和1份精密度参考品组成。其质量标准为:阳性参考品符合率≥8/9;阴性参考品符合率为8/8;最低检测限为稀释度不低于1∶103;精密度参考品稀释100倍后重复检测10次,结果均为阳性,且Ct值的CV≤5%。该参考品均匀性符合要求,室温(25℃)放置1 d、反复冻融3次均未影响参考品的稳定性。结论 建立了首批CA16核酸检测试剂国家参考品,并制定了质量标准,为相关试剂的质量控制和评价提供了依据。
郝晓甜李曼郁李克坚周诚
关键词:柯萨奇病毒A16型参考品
2021年济宁市柯萨奇病毒A16流行特点及全基因组特征被引量:2
2023年
目的 了解济宁市2021年柯萨奇病毒A16(CV-A16)流行特点和全基因组特征。方法 2021年1月至12月采集济宁市疑似手足口病患者粪便标本513份,进行CV-A16病毒核酸检测和病毒分离,对分离的4株CV-A16进行全基因组测序和生物信息学分析。结果 共检出CV-A1636例,阳性率为7.02%(36/513),其中7~9月阳性率最高。4株毒株VP1基因位于B1a和B1b两个进化分支。与原株G-10(CAU05876)相比,4株毒株核苷酸和氨基酸同源性分别为77.5%~78.0%和94.7%~94.9%。4株毒株编码蛋白均发生多处氨基酸变异。结论 CV-A16是2021年引起济宁市手足口病的主要病原体之一,在济宁市流行的主要是B1a和B1b两个亚,需要加强手足口病监测力度。
王珊焦伯延冯强段延华温红玲
关键词:手足口病柯萨奇病毒A16全基因组测序
云南省保山市2022年手足口病病例柯萨奇病毒A16基因特征被引量:3
2023年
目的分析云南省保山市2022年手足口病(hand,foot and mouth disease)病原监测结果,并对主要流行株柯萨奇病毒A16(coxsackievirus A16,CVA16)基因特征进行分析,为手足口病防控提供科学依据。方法对2022年云南省保山市送到云南省手足口病实验室的标本进行处理,提取病毒核酸,用引物(MD91/OL68-1)扩增肠道病毒(Entero⁃virus,EV)VP4/VP2结合区基因并测序,序列在GenBank进行BLAST搜索确定病毒别,再用各病毒的相关引物扩增VP1区全序并测序,使用肠道病毒在线定工具(Enterovirus Genotyping Tool Version 1.0)进行病毒别鉴定。按参考文献下载肠道病毒标准序列,制作进化树,进行基因特征分析,对检测结果进行统计学分析。结果本研究对保山市2022年手足口病临床诊断标本307例进行检测,实验室确诊280例,检出率91.21%(280/307),其中CVA16为55.05%(169/307),肠道病毒71(Enterovirus A71,EV-A71)为3.58%(11/307),其他肠道病毒为32.57%(100/307)。对送检的206份手足口病例标本,扩增肠道病毒VP4/VP2结合区和VP1区基因测序和鉴定,获得29株肠道病毒,肠道病毒阳性率为14.08%(29/206),均为A病毒,未检测到B、C、D组病毒。送检病毒株分为3个血清,其中CVA16有27株,占93.10%(27/29);EV-A71有1株,占3.45%(1/29);柯萨奇病毒A10(coxsackievirus A10,CVA10)有1株,占3.45%(1/29)。保山市2022年手足口病病例CVA16基因的VP4/VP2结合区、VP1区检测阳性率为13.11%(27/206),基因进化分析表明27株CVA16为B1a亚,并可分为2个进化分支。结论2022年云南省保山市手足口病主要流行毒株为CVA16基因,属于B1a亚,该亚又可分为2个分支,2022年保山市存在2个传播链流行。今后应加强监测,提高监测质量,掌握病毒流行特征。
李希尚赵丽娟伏晓庆姜黎黎周晓芳李胜国寸建萍周永明
关键词:手足口病柯萨奇病毒A组16型基因特征分析

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李雅静
作品数:38被引量:2H指数:1
供职机构:北京科兴生物制品有限公司
研究主题:柯萨奇病毒 病毒 手足口病 疫苗 单克隆抗体
顾美荣
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尹卫东
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