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新型鸭呼肠孤病毒灭活疫苗的制备及其免疫效果评价: 2025年; 为防制新型鸭呼肠孤病毒病,本研究利用新型鸭呼肠孤病毒SDYC株为种毒进行灭活疫苗的研制,并对疫苗的安全性及有效性进行评价。结果表明,5日龄樱桃谷鸭接种疫苗后,在观察期内均健活,未见全身和局部不良反应,表明疫苗安全性良好;疫苗免疫5日龄樱桃谷鸭后21d,免疫鸭血清中和抗体效价几何平均值为1:109.8,使用SDYC株对试验鸭进行攻毒,疫苗对免疫鸭的保护率为100%;疫苗免疫150日龄樱桃谷种鸭后28d,免疫鸭血清中和抗体效价几何平均值为1:356.4;对种鸭所产的种蛋进行孵化,孵化后的子代维鸭血清母源中和抗体效价几何平均值可达1:78.4,对子代维鸭使用SDYC株进行攻毒,攻毒保护率可达100%,表明疫苗具有良好的免疫保护效果,可用于预防新型鸭呼肠孤病毒病。; 徐鑫姜含雨何睿桐仇微红罗开健罗开健; 关键词：新型鸭呼肠孤病毒灭活疫苗免疫效果樱桃谷鸭

新型鸭呼肠孤病毒的分离鉴定及细胞适应性研究: 2025年; 对广西某鸭场临床疑似由新型鸭呼肠孤病毒(Novel duck reovirus,NDRV)感染的雏鸭进行RT-PCR鉴定、NDRV分离、毒株细胞培养特性、雏鸭致病性、S1基因序列测定和遗传进化分析等研究。结果显示,RT-PCR检测组织病料为NDRV阳性,组织样品处理后接种SPF鸭胚,鸭胚出现发育迟缓、死亡,胚体全身及多脏器出血等症状;用鸭胚尿囊液接种雏鸭后出现脾脏坏死的特异性病变。S1基因的同源性与进化树分析结果显示,GX2022株与公布的部分NDRV毒株核苷酸序列相似性为93.7%~98.9%,而与鸭呼肠孤病毒(Muscovy duck reovirus,MDRV)GX2010株、GX110058株、S1133株,与禽呼肠孤病毒(Avian reovirus,ARV)815株、ZJM2000M株同源性很低,在21.8%~28.4%之间。进化树分析显示,该毒株与我国流行的NDRV处在同一个分支上,与MDRV和ARV的距离较远,说明分离到的毒株是新型鸭呼肠孤病毒。毒株接种LMH、CEF、Vero细胞后均产生空泡和细胞崩解等细胞病变。该新型鸭呼肠孤病毒临床感染的致病特征研究,有助于新型鸭呼肠病毒病的防控及疫苗的研发。; 孔冬妮邓永陈孟姣薛麒王嘉杨飞毛娅卿刘丹黄小洁周明旭; 关键词：S1基因遗传进化

新型鸭呼肠孤病毒σC蛋白遗传进化分析及多克隆抗体制备: 2025年; 新型呼肠孤病毒(Novel duck reovirus,NDRV)是可引起番鸭、北京鸭和鹅等多种水禽,发生肝脏、脾脏不规则出血和坏死的传染性疾病,近年来广东地区水禽中该病的发病率呈上升趋势。为了解广东地区新型呼肠孤病毒遗传进化特征,该试验从广东佛山某鸭场发病番鸭中分离得到一株试验毒株,通过对该毒株σC基因序列分析,结果表明该试验毒株与NDRV同处于一个分支,并且核苷酸相似性达95.1%-99.6%;而与典型MDRV和ARV遗传距离较远,且相似性均低于50%。与SH12和DH13毒株相比,该试验毒株出现了15个氨基酸残基的变异。为了解该试验毒株σC蛋白的抗原性,进一步构建了pET32a⁃σC质粒,并建立了重组σC蛋白在BL21(DE3)内稳定表达的方法,通过Western blot鉴定该蛋白能够与NDRV阳性血清和兔多克隆抗体发生特异性结合。为进一步了解NDRV在广东地区水禽中的遗传进化特征以及基因工程疫苗的研发提供参考。; 钟日成林寅盛张济培; 关键词：新型鸭呼肠孤病毒遗传进化分析多克隆抗体制备

新型鸭呼肠孤病毒p18蛋白多克隆抗体区分强弱毒株的研究: 2025年; 【背景】我们前期将新型鸭呼肠孤病毒(novel duck reovirus,NDRV)强毒株NP03在番鸭胚成纤维细胞(muscovy duck embryo fibroblast,MDEF)上进行传代,选育出NDRV弱毒株S,将强弱毒株p18蛋白进行比对发现弱毒p18蛋白C端缺失35个氨基酸。【目的】制备p18蛋白的多克隆抗体并鉴定NDRV强弱毒株p18蛋白的差异。【方法】采用RT-PCR方法扩增NDRV强弱毒株p18基因编码序列,克隆至原核表达载体pET-28a中诱导表达,用镍柱纯化目的蛋白,通过SDS-PAGE和Western Blot对纯化蛋白进行鉴定。进一步用纯化的蛋白免疫小鼠制备p18蛋白多克隆抗体,通过间接ELISA、Western Blot和间接免疫荧光试验(indirect immunofluorescence assay,IFA)对制备的多克隆抗体进行检测鉴定NDRV强弱毒株。【结果】对目的蛋白进行SDS-PAGE和Western Blot鉴定结果表明,分别获得了NDRV强弱毒株p18重组蛋白。对多克隆抗体进行间接ELISA检测,效价达1:51200。Western Blot鉴定显示,制备的p18蛋白多克隆抗体能特异性检测NDRV强、弱毒株感染细胞后表达的p18蛋白,结果表明,强、弱毒株p18蛋白的分子量有明显差异,分别约为18 kDa和14 kDa。IFA结果表明,制备的p18蛋白多克隆抗体可以特异性识别NDRV强、弱毒复制时表达的p18蛋白。【结论】本研究制备的p18蛋白多克隆抗体可用于NDRV强弱毒株p18蛋白检测,并发现NDRV强、弱毒株p18蛋白存在明显差异,为深入研究NDRV p18蛋白生物学功能及致病机理奠定了基础。; 徐鑫游广炬郑欣程晓霞王劭王劭肖世峰郑敏陈少莺郑敏; 关键词：新型鸭呼肠孤病毒多克隆抗体毒力

鸭IFN-α昆虫杆状病毒表达系统的建立及其抗新型鸭呼肠孤病毒活性研究: 2025年; 为利用昆虫杆状病毒表达系统表达鸭干扰素α(inteferon-α,IFN-α),并研究其对新型鸭呼肠孤病毒(novel duck reovirus,NDRV)的抗病毒活性,针对鸭IFN-α序列构建重组质粒PFastBac-DuIFN-α,转化DH10Bac细胞后提取重组杆粒B acmid-DuIFN-α,然后将其转染Sf9昆虫细胞并收集上清,盲传3代后收集病变细胞,经超声纯化获得重组鸭IFN-α蛋白。Western blot鉴定结果显示,鸭IFN-α在细胞质中表达,大小约为23 kDa。经测定,重组鸭IFN-α蛋白效价为2.14×10^(5)U/mL,以其处理鸭胚成纤维细胞(DEF)后,可极显著刺激蛋白激酶R(protein kinase R,PKR)、抗黏病毒蛋白(myxovirus resistant,Mx)和寡腺苷酸合成酶(oligadenylate syntase,OAS)编码基因的表达(P<0.01)。进一步将鸭IFN-α蛋白接种5日龄樱桃谷鸭(2.14×10^(3) U/mL,0.2mL/只),2 d后再进行NDRV攻毒试验(1000 TCID_(50)/0.1 mL,0.2 mL/只),同时设置阴性对照组和仅NDRV攻毒组。组织病理学检测显示,仅肌注NDRV的攻毒组雏鸭脾出现大量淋巴细胞崩解坏死,数量减少;而先肌注鸭IFN-α蛋白后攻毒NDRV的试验组雏鸭病变较轻,仅有少量淋巴细胞坏死。实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)检测发现,试验组雏鸭的排毒量极显著低于攻毒组(P<0.01),且其肝和脾中NDRV载量也极显著低于攻毒组(P<0.01),同时试验组Mx和OAS表达量极显著升高(P<0.01)。结果表明,本研究通过昆虫杆状病毒系统成功表达出了重组鸭IFN-α蛋白,其具有较好的抗NDRV活性。本研究为进一步探索鸭IFN-α对NDRV感染等鸭病毒性疾病的防治机制提供了技术支持。; 孔雨心柳美玲于鲁娜鹿益豪张兆鹏傅绩李宁; 关键词：干扰素Α 昆虫杆状病毒表达系统新型鸭呼肠孤病毒抗病毒活性

2株新型鸭呼肠孤病毒的分离鉴定及全基因组遗传进化分析: 2025年; 为了解广东地区鸭呼肠孤病毒的序列信息,对广东省佛山市和肇庆市疑似呼肠孤病毒感染的病鸭进行检测、分离、鉴定及全基因组测序分析。通过对疑似样本进行剖检发现,病鸭肝脏呈现不规则出血斑块,脾脏和法氏囊出现严重出血、坏死。使用实验室建立好的检测方法对其进行检测,并利用LMH细胞对新型鸭呼肠孤病毒(Novel Duck reovirus,NDRV)进行分离,同时对分离的毒株进行全基因测序及分析。结果显示,在第3代的LMH细胞上出现典型的细胞病变,经检测确定为NDRV。全长扩增显示,所分离的2株NDRV全长均为23419 bp,可分为10个片段,分别为L1~L3、M1~M3和S1~S4。核苷酸同源性与氨基酸同源性分析显示,与国内的NDRV同源性最高,与番鸭呼肠孤病毒(Muscovy Duck reovirus,MDRV)和禽呼肠孤病毒(Avain revirus,ARV)同源性较低。遗传进化关系显示,所分离的2株毒株的10个片段均分布于NDRV大分支,由此表明,分离的2株毒株均为NDRV。该研究丰富了NDRV的序列信息,为广东地区NDRV的防控及特异性生物制品的研究提供了参考依据。; 李长乐姚鑫炎王明月肖毅张雪莲; 关键词：新型鸭呼肠孤病毒全基因组测序遗传进化分析

一种新型鸭呼肠孤病毒σC蛋白抗体及其应用: 本发明公开了，所述抗体包括重链和轻链，所述重链的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示，所述轻链的氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示。本发明的新型鸭呼肠孤病毒σC蛋白抗体在用于检测新型鸭呼肠孤病毒时能够直接针对NDR...; 张成成李婷李薇王寅郭梦娇薄宗义张小荣吴艳涛

一种抗新型鸭呼肠孤病毒的单克隆抗体杂交瘤细胞株、单克隆抗体、试剂或试剂盒与应用: 本发明提供了一种抗新型鸭呼肠孤病毒的单克隆抗体杂交瘤细胞株、单克隆抗体、试剂或试剂盒与应用，属于新型鸭呼肠孤病毒检测技术领域。所述抗新型鸭呼肠孤病毒单克隆抗体杂交瘤细胞株命名为杂交瘤细胞株NDRV Mab‑Sigma C...; 黄小洁刘丹毛娅卿薛麒邓永孔冬妮吴华伟

一株强致病性新型鸭呼肠孤病毒及其卵黄抗体制备和应用: 本发明公开了一株强致病性新型鸭呼肠孤病毒RD240407A及其卵黄抗体制备和应用。具体的，所述新型鸭呼肠孤病毒RD240407A的保藏编号为：CGMCC No.46196。本发明还提供了以该毒株制备所得的灭活疫苗和卵黄抗...; 杜新永刘长太李鹏李晓娟赵豪龙

新型鸭呼肠孤病毒病诊断及防控: 2024年; 20世纪60年代初,从人类和动物呼吸道或肠道中已成功分离出呼肠孤病毒。这种病毒能对人类、家畜、家禽、水生生物、昆虫和植物等造成伤害。新型鸭呼肠孤病毒(Novel Duck Reovirus,NDRV)隶属于呼肠孤病毒科(Reovirdae)、正呼肠孤病毒属(Orthoreovirus),其基因组分阶段,由10个双链RNA片段组成。禽呼肠孤病毒分为鸡源病毒和水禽源病毒。; 颜丙桐; 关键词：禽呼肠孤病毒新型鸭呼肠孤病毒呼肠孤病毒科双链RNA

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