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一种指环病毒感染性克隆的构建方法: 本发明提供了一种指环病毒感染性克隆的构建方法，属于基因工程技术领域。所述的指环病毒感染性克隆的构建方法，分别将2个alpha属的指环病毒全长基因组按照首尾相接的顺序插入到骨架质粒中，获得感染性克隆ANE_alpha3，再...; 李龑鹏姚玮彤黄方张驰宇

带有报告基因的博卡病毒感染性克隆的构建和应用: 本发明提供重组核酸分子，所述核酸分子包含博卡病毒的全部基因组序列和HiBiT报告基因的编码序列。本发明提供博卡病毒感染性克隆，其带有HiBiT报告基因。本发明还提供博卡病毒感染性克隆的构建方法及其应用。本发明构建的HiB...; 陈新文唐婕琳杨琪陈思杰

一种肠道病毒EV71感染性克隆及其构建方法和应用: 本发明公开了一种肠道病毒EV71感染性克隆及其构建方法和应用，属于分子生物学技术领域。本发明通过在核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示的EV71片段的3'UTR之后加入108个poly(A)后得到的pcDNA‑T7‑E...; 王媛董衍明杨暄王悦

基因Ⅰ型日本脑炎病毒GX毒株感染性克隆的构建: 2025年; 通过RT-PCR方法从基因Ⅰ型(GⅠ)日本脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)GX株中扩增覆盖全长cDNA的3段基因片段,将3个基因片段依次克隆到pBR322载体上以获得感染性克隆质粒pGX,测序正确后将该感染性克隆质粒与pCAGGS-T_(7)聚合酶真核表达质粒共转染至BHK-21细胞中进行病毒的拯救。间接免疫荧光和噬斑试验结果显示,成功拯救GⅠJEV rGX;噬斑试验和小鼠感染试验结果显示,拯救的病毒rGX与野生型病毒GX具有相似的复制能力与致病性。结果表明,成功构建了GⅠJEV GX毒株感染性克隆。; 颜梦学叶静曹胜波熊俊垚; 关键词：乙型脑炎病毒感染性克隆致病力

RSV-BA9基因型变异株感染性克隆的构建及应用: 本发明涉及一种RSV‑BA9基因型变异株及其减毒株感染性克隆的构建及应用，通过反向遗传学技术，本发明首先构建并拯救了RSV‑BA9基因型变异株(在G蛋白序列上包含7个氨基酸的延长)，继而通过反向遗传学技术操作，去除该变异...; 张燕王娜宋晶晶

一种嵌合PEDV感染性克隆质粒、PEDV嵌合病毒及其构建方法和应用: 本发明公开了一种嵌合PEDV感染性克隆质粒、PEDV嵌合病毒及其构建方法和应用。本发明首次以PEDV基因组为骨架，成功拯救表达TGEV S蛋白胞外区的嵌合病毒，并发现与表达TGEV S蛋白的嵌合PEDV相比，表达TGEV...; 陈振海潘朔楠魏丽萍牟春晓

携带报告蛋白基因的DENV-2感染性克隆重组质粒及其构建方法和应用: 本发明涉及一种携带报告蛋白基因的DENV‑2感染性克隆重组质粒及其构建方法和应用。本发明的构建方法能成功拯救获得表达mCherry的标记病毒DENV2‑mCherry，与母本野生型病毒wtDENV2相比，mCherry基...; 杜寿文林吉辉刘志成

B亚型禽偏肺病毒B1分离株感染性克隆的构建与鉴定: 2025年; B亚型禽偏肺病毒(avian metapneumovrus,aMPV)可引起鸡肿头综合征,造成免疫抑制,引发严重的继发感染并导致鸡生产性能下降。建立国内aMPV分离株的反向遗传学系统对病毒研究及开发针对性疫苗具有重要意义。将病毒基因组扩增片段分别测序,通过序列拼接获得了完整的aMPV B1分离株基因组序列。根据病毒基因组序列中的酶切位点,将基因组分4段依次连入pTH载体,获得病毒基因组质粒pTH-B1。在病毒基因组的第7474位引入同义突变,沉默原有SalⅠ酶切位点以作为遗传标记,在pTH-B1质粒M与F基因之间引入PmeⅠ酶切位点,并利用该位点插入EGFP基因,获得质粒pTH-B1EGFP。将病毒N、P、M 2.1基因的表达盒共同克隆到pCI-Neo表达载体中,获得辅助质粒pCI-NPM2.1。将L基因单独克隆到pCI-Neo表达载体中,获得辅助质粒pCI-L。将pTH-B1质粒和pTH-B1EGFP质粒分别与两种辅助质粒共转染BSR/T7细胞,然后将转染细胞与Vero细胞共培养并连续传代。结果显示:通过细胞病变(CPE)和绿色荧光观察,以及N基因和遗传标记检测、间接免疫光试验(IFA)和Western blot共同验证,表明构建的rB1株和rB1-EGFP株拯救成功。rB1株和rB1-EGFP株与亲本毒株的增殖水平和趋势相似。本研究通过三质粒拯救系统获得了B亚型aMPV B1株的感染性克隆,M和F基因间的非编码区可插入基因表达序列,为进一步探究B亚型aMPV的致病机理和疫苗研发奠定了必要基础。; 于泽坤姜承源袁洪兴周生段笑笑李彦宋勤叶; 关键词：感染性克隆病毒拯救

一种GI型日本脑炎病毒弱毒疫苗株SD12-F120株及其感染性克隆的构建及其应用: 本发明属于分子生物学领域，涉及一种GI型日本脑炎病毒弱毒疫苗株SD12‑F120株及其感染性克隆的构建与应用。为了克服现有的GIII型的JEV疫苗难以对GI型JEV提供完全的保护，且目前实际应用中缺少GIII型的JEV疫...; 魏建超马志永张海龙王欣张妍邱亚峰刘珂李宗杰李蓓蓓邵东华

带有HiBiT新型报告基因的肠道病毒感染性克隆及其构建方法和应用: 本发明公开了带有HiBiT新型报告基因的肠道病毒感染性克隆及其构建方法和应用，包括带有HiBiT新型报告基因的肠道病毒EVA71、CVA16、CVA10及CVA7感染性克隆，在EVA71、CVA16、CVA7及CVA10...; 章树业徐建青张晓燕喻锐

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