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异丙基 肾上腺素 诱导小鼠心脏成纤维细胞转分化的特征被引量:1 2022年 目的 探讨异丙基 肾上腺素 (ISO)诱导原代成年C57小鼠心脏成纤维细胞向肌成纤维细胞转分化的特征。方法 应用胶原酶法消化6~8周雄性C57小鼠心脏组织,分离并鉴定心脏成纤维细胞;在不同干预时间、传代数、血清浓度培养条件下,采用qPCR、蛋白质印迹法和固定细胞免疫荧光技术检测ISO(10μmol/L)刺激后成纤维细胞α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原蛋白和纤连蛋白荧光强度、mRNA、蛋白表达水平。分析不同干预时间、传代数、血清浓度培养条件下ISO刺激时心脏成纤维细胞的转分化特点。结果 (1)较长干预时间(48 h)ISO处理可使成纤维细胞转分化标志物α-SMA、Ⅰ型胶原蛋白和纤连蛋白表达水平显著上调(P <0.05),而较短干预时间(24 h)ISO处理成纤维细胞转分化不显著(P> 0.05);(2)不同传代数心脏成纤维细胞对ISO刺激的反应不同,ISO刺激可以引起P1代和P2代心脏成纤维细胞转分化标志物表达水平显著上调(P<0.05),而培养到第3代和第4代,心脏成纤维细胞本身就已表现出了转分化;(3)血清浓度影响ISO引起的心脏成纤维细胞转分化,在0%和2%血清浓度下,ISO刺激引起转分化标志物表达水平上调(P <0.05),而在5%血清浓度下,ISO刺激心脏成纤维细胞与对照组相比转分化标志物表达水平差异 无统计学意义(P> 0.05)。结论 ISO刺激小鼠原代心脏成纤维细胞向肌成纤维细胞转分化时,在P1代和P2代用无血清或2%血清培养,ISO刺激48 h时,转分化标志物α-SMA、Ⅰ型胶原蛋白和纤连蛋白的表达最明显。 王蕊 吴济民 冯姗 徐文丽 陈显达 赵明明 曹宁 王帅星 张咪 谷慧君 肖晗 张幼怡 马克涛关键词:异丙基肾上腺素 心脏成纤维细胞 转分化 Α-平滑肌肌动蛋白 纤连蛋白 miR-497下调MFN2缓解异丙基 肾上腺素 诱导的心肌损伤 2018年 目的探讨microRNA-497(miR-497)对异丙基 肾上腺素 诱导的心肌损伤的作用及机制。方法 30只雄性C57BL/6小鼠随机分为三组:对照组(每日背部皮下注射与模型组同剂量的生理盐水,持续10 d),模型组[每日背部皮下注射5 mg/kg的异丙基 肾上腺素 (ISO),持续10 d]及激动剂组(在注射ISO的同时给予心肌内注射100μl 10nmol的miR-497-5p激动剂),每组各10只。检测三组小鼠心功能[心率(HR)、左室收缩内压(LVESP)、左室舒张内压(LVEDP)、左室内压最大上升速率(±dp/dtmax)及心输出量(CO)]、心肌损伤[心肌肌钙蛋白T(c Tn-T)、心肌肌钙蛋白I(c Tn-I)、N-端脑利钠肽前体(NT-pro BNP)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)及肌红蛋白(Mb)]等指标及心肌中线粒体融合蛋白2(MFN2)、Caspase-3、Fas、Bcl-2及Bax等的表达。结果模型组中LVESP、±dp/dtmax及CO的水平显著低于对照组(P <0. 05),LVEDP、Tn T、Tn I、NT-pro BNP、CK-MB及Mb水平高于对照组(P <0. 05)。而激动剂组的HR、LVESP、±dp/dtmax及CO的水平显著高于模型组(P <0. 05),LVEDP、TnT、TnI、NT-proBNP、CK-MB及Mb水平低于模型组(P <0. 05)。模型组中MFN2、Caspase-3、Fas及Bax的mRNA和蛋白的表达显著高于对照组(P <0. 05),Bcl-2的表达低于对照组(P <0. 05)。而激动剂组中MFN2、Caspase-3、Fas及Bax的表达显著低于模型组(P<0. 05),Bcl-2的表达高于模型组(P <0. 05)。结论 miR-497可改善异丙基 肾上腺素 诱导的小鼠心肌损伤,其机制与抑制MFN2表达并阻止心肌细胞凋亡有关。 刘军辉 习文 杜阿妮关键词:小鼠 异丙基肾上腺素 心肌损伤 MFN2 橙皮素 对异丙基 肾上腺素 诱导大鼠心衰的保护作用 被引量:4 2017年 目的观察橙皮素 对大剂量异丙基 肾上腺素 (ISO)诱导大鼠心衰的保护作用,并探讨其机制。方法将SD大鼠随机分为正常(C)组、橙皮素 对照(H)组、异丙基 肾上腺素 (I)组和橙皮素 治疗+I(T)组,I组和T组接受皮下注射大剂量ISO(150 mg/kg),2周后行超声心动图检测。确定造模成功后,H组及T组给予橙皮素 (100mg/kg)灌胃,I组给予等量的溶剂乙醇,连续给药10d后测定各组大鼠心脏功能包括左室舒张末期内径(LVEDD)、左室收缩末期内径(LVESD)、左室射血分数(EF)、左室缩短分数(FS)变化及血清丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、总抗氧化能力(TAOC)的变化,观察各组大鼠心肌的病理变化。结果与C组比较,I组LVEDD变化不大,LVESD值增大、EF、FS降低,氧化应激指标中MDA值升高,SOD、TAOC降低,各指标差异 有统计学意义(P<0.05);与I组比较,T组大鼠LVEDD无明显变化,LVESD降低,EF、FS升高,血清MDA值降低,SOD、TAOC升高,各指标差异 有统计学意义(P<0.05)。H组各指标较C组无明显变化。结论橙皮素 可能通过减轻氧化应激,降低MDA,升高SOD、TAOC,从而改善心衰大鼠的心脏功能。 曹静 吕吉元 张明升 师锐赞 冯巧爱关键词:心衰 橙皮素 异丙基肾上腺素 氧化应激 异丙基 肾上腺素 不同给药模式对小鼠心脏腺 苷酸活化蛋白激酶活性的影响被引量:1 2016年 目的:探讨β-肾上腺素 受体(β-AR)激动剂异丙基 肾上腺素 (ISO)2种给药模式对小鼠心脏腺 苷酸活化蛋白激酶(AMPK)活性的影响,以及AMPK激动剂在这2种模式中对心脏结构和功能的不同作用。方法:采用皮下植入微渗透压泵的方法给予雄性BALB/c小鼠持续14 d输注ISO(5 mg·kg^(-1)·d^(-1))以及每日皮下注射AMPK激动剂AICAR(250 mg·kg^(-1)·d^(-1))。分别于植入泵14 d后和植入泵14 d并撤泵3 d后,利用超声心动图和血流动力学方法检测心脏功能并收集心脏样本。Western blot检测AMPK的磷酸化水平。结果:持续输注ISO14 d后心脏AMPK的磷酸化水平较对照组明显增加(P<0.05),AICAR并不进一步增加AMPK磷酸化水平,反而有减少ISO引起的心脏AMPK磷酸化水平增加的趋势。AICAR明显抑制ISO引起的心脏重量增加。反映心脏收缩功能的左室短轴缩短率(FS)和左心室压力最大上升速率(+dp/dt_(max))在ISO组显著高于对照组(P<0.05),AICAR并不进一步增加心脏收缩功能。反映心脏舒张功能的左室舒张末压(LVEDP)在各组并无明显改变。持续输注异丙基 肾上腺素 14 d并撤泵3 d后心脏AMPK的磷酸化水平与对照组的差异 无统计学显著性。AICAR明显抑制ISO引起的心脏重量增加。+dp/dt_(max)在ISO组明显低于对照组(P<0.05),提示收缩功能下降。AICAR+ISO组与ISO组相比,有增加+dp/dt_(max)的趋势。反映心脏舒张功能的LVEDP在ISO组明显升高(P<0.05),提示舒张功能明显降低。而AICAR则显著改善了ISO引起的舒张功能异 常(P<0.05)。给予ISO后,AMPK磷酸化水平增加和心率增加的时间曲线一致,均为5 min开始升高,30 min开始下降至基础水平。结论:β-AR持续激动使AMPK活性持续升高,而撤泵后AMPK活性则降至对照水平。观察AMPK激动对心脏功能的改善作用需避免β-AR激动引起的正性变时变力效应的干扰。 肖晗 马晓伟 付勇南 张幼怡 吕志珍关键词:Β-肾上腺素受体 腺苷酸活化蛋白激酶 异丙基肾上腺素 Determination of isoproterenol in pharmaceutical and biological samples using a pyrogallol red multiwalled carbon nanotube paste electrode as a sensor 2016年 Isoproterenol (ISPR) is an important catecholamine‐based drug that is widely used in the treatment of heart disease. However, overdose of this drug is very dangerous to the human body. In this study, a new sensor based on a pyrogallol red modified‐multiwalled carbon nanotube paste electrode (PGRMMWCNTPE) was prepared and used for high sensitivity determination of ISPR in aqueous solution. Electrocatalytic oxidation of ISPR at the PGRMMWCNTPE was investigated by chronoam‐perometry, cyclic voltammetry, and square‐wave voltammetry. The values of the catalytic rate con‐stant, electron transfer coefficient, and diffusion coefficient for ISPR oxidation were then calculated using voltammetric data. A linear calibration curve was constructed for ISPR concentration in the range 0.8–570μmol/L with a detection limit of 0.47μmol/L ISPR. The sensor was then applied to the determination of ISPR in urine and drug samples with satisfactory results. Mohsen Keyvanfard Khadijeh Alizad关键词:ISOPROTERENOL VOLTAMMETRY HIP-55抑制异丙基 肾上腺素 诱导的心脏成纤维细胞ROS产生 被引量:1 2013年 目的研究HIP-55在β-肾上腺素 受体激动剂异丙基 肾上腺素 (Isoproterenol hydrochloride,ISO)诱导心脏成纤维细胞活性氧(reactive oxygen species,ROS)产生中的作用。方法分离培养乳大鼠心脏成纤维细胞,利用HIP-55腺 病毒和HIP-55-shRNA腺 病毒感染乳大鼠心脏成纤维细胞,获得过表达HIP-55或敲减HIP-55的心脏成纤维细胞。ISO刺激后,采用红色荧光探针dihydroethidium(DHE)以及绿色荧光探针二氯荧光黄双乙酸钠(2’,7’-dichlorofluoresce in diacetate,DCFH-DA)的方法检测细胞ROS的产生量。结果过表达HIP-55明显的抑制心脏成纤维细胞ROS的产生,相反敲减HIP-55明显促进心脏成纤维细胞ROS的产生。结论 HIP-55明显抑制ISO诱导的乳大鼠成纤维细胞的ROS的产生。 邢瑞 杨承志 吴济民 鲁海燕 吕志珍 张幼怡 李子健关键词:Β-肾上腺素受体 丹参素 异 丙酯对异丙基 肾上腺素 诱导大鼠心脏纤维化的作用及机制研究 目的:心脏纤维化是多种心血管疾病的共有的一个重要病理变化过程,被认为与心功能障碍、心力衰竭、心律失常及心源性猝死有密切相关性,因此研究并发现防治心脏纤维化的新线索具有重要临床意义。丹参素 异 丙酯(isopropyl3-(3... 鲁海燕关键词:丹参素异丙酯 心脏纤维化 异丙基肾上腺素 心脏成纤维细胞 胶原 文献传递 他汀类药物对异丙基 肾上腺素 致心功能不全大鼠的心肾保护作用 2012年 目的 研究他汀类药物对心、肾损害的防治作用,同时探讨心、肾交互影响的病理机制.方法 24只Wistar 大鼠分为3组:空白对照组(n=4),他汀组(n=10),异 丙肾组(n=10).空白对照组生理盐水2ml/d灌胃;他汀组瑞舒伐他汀4mg/ (kg·d)灌胃;异 丙肾组生理盐水2ml/d灌胃;两周时,空白对照组腹腔注射生理盐水2ml,他汀组与异 丙肾组给予异 丙肾(85mg/kg)腹腔注射2d.15周后用心脏超声评价大鼠心脏功能,测定肾素 -血管紧张素 -醛固酮系统、抗氧化系统、炎症因子部分相关生化指标,心、肾组织行病理切片检查脏器损害情况.结果 他汀组大鼠的心功能明显优于异 丙肾组[左室射血分数:(73.18±7.89) %vs(58.58±6.41)%,P<0.05];他汀组的血管紧张素 Ⅱ水平显著低于异 丙肾组[( 928.50± 536.87)vs(1886.80± 718.89) pg/ml,P<0.05];他汀组的丙二醛[(10.10±0.74) vs( 12.36±2.11) nmol/ml,P=0.073]及白介素 -6[ (44.46±24.57) vs (76.31±20.79) ng/ml,P=0.058]水平与异 丙肾组相比下降,但两组间的差异 没有统计学意义;他汀组大鼠的心脏、肾脏病理异 常改变明显轻于异 丙肾组.结论 在异丙基 肾上腺素 致心功能不全大鼠模型中,瑞舒伐他汀可以改善心脏功能,减轻心脏和肾脏的结构改变.可能通过抑制RAAS系统激活、活性氧损伤和抗炎症的机制削弱心肾之间的不良交互作用. 赵华 周必业 叶平关键词:瑞舒伐他汀 心功能不全 异丙基肾上腺素 异丙基 肾上腺素 充血性心衰大鼠模型NE、AngⅡ的改变被引量:1 2011年 目的建立异丙基 肾上腺素 (ISO)诱导SD大鼠充血性心力衰竭(CHF)模型,观察血浆NE、AngⅡ的变化。方法应用大剂量ISO(170mg/kg)对SD大鼠皮下注射2次,建立CHF模型,造模后18w测量左室舒张末内径(LVEDD)、左室收缩末内径(LVESD)、室间隔厚度(IVST)、左室后壁厚度(LVPWT)、缩短分数(FS)、左室射血分数(LVEF);利用酶联免疫方法检测血浆NE和放免法检测血浆AngⅡ水平,并取心肌观察病理形态学特征。结果与对照组(CON)相比,ISO组大鼠心功能明显下降,血浆NE、AngⅡ显著升高;ISO组大鼠心肌细胞肥大,部分心肌细胞有嗜酸变性和(或)坏死,心肌间质结缔组织增生。结论应用大剂量ISO诱导大鼠CHF模型,该作用可能与血浆NE、AngⅡ升高有关。 赵智明 郭寒 郭郡浩 赵凌杰 蔡辉关键词:异丙基肾上腺素 慢性充血性心力衰竭 心室重构 通瘀化痰法对异丙基 肾上腺素 致大鼠心衰模型的实验研究 被引量:1 2011年 目的:研究通瘀化痰法对异丙基 肾上腺素 (ISO)诱导大鼠慢性心力衰竭(CHF)模型的治疗作用和对血清脑钠肽(BNP)的影响。方法:76只Wistar大鼠(雌雄各半)随机分为空白组和造模组,造模组皮下注射异丙基 肾上腺素 2次(170 mg.kg-1)间隔24小时,空白组皮下注射生理盐水0.25 ml,间隔24小时,6周后应用超声心动图检测,以左室射血分数≤45%确定造模成功,将心衰大鼠模型随机分为模型组、中药低、中、高剂量组及西药组,平均治疗4周后进行心脏超声检查,利用酶联免疫吸附法(ELISA)测定各组大鼠血清BNP的含量。结果:异 丙肾致慢性心衰大鼠心功能下降、心脏重量指数增加、BNP升高明显;经治疗4周,各治疗组均有不同程度改善,其中中药中、高剂量组作用优于西药组,统计有显著性差异 (P<0.01)。结论:通瘀化痰法能显著改善心功能,减轻心衰症状,逆转心室重构,其作用可能与抑制心衰大鼠血清BNP表达有关。 王敏 王晓峰 艾静 徐新利关键词:心力衰竭 脑钠肽 异丙基肾上腺素
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