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一种降解呕吐毒素的山梨糖脱氢酶及其突变体: 本发明公开了一种具有降解呕吐毒素特性的山梨糖脱氢酶SDH，其核苷酸序列和氨基酸序列分别为SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2。以及酶活提高的定向改造酶SDH<SUP>F103L</SUP>，其核苷酸序列和氨基酸...; 文继开李丹阳邓诣群梁国强母培强吴骏林如琴陈庆梅陈超

L-山梨糖脱氢酶的基因及其应用: 本发明属于酶工程和基因工程技术领域，具体的说一种L‑山梨糖脱氢酶的基因及其应用。1)其核苷酸序列为SEQ ID NO.1～8所示核苷酸序列；或，2)在1)限定的核苷酸序列基础上经碱基缺失、取代、插入或突变而成且具有L‑山...; 张怡轩王彩云李凡

L-山梨糖脱氢酶突变体及其应用: 本发明公开了L‑山梨糖脱氢酶突变体及其应用，属于基因工程和酶工程技术领域。本发明以氧化葡萄糖酸杆菌来源的L‑山梨糖脱氢酶为出发序列，通过定点突变获得了可以提升2‑KLG产量的L‑山梨糖脱氢酶突变体。表达突变体的重组菌株R...; 周景文李冬陈坚李江华曾伟主余世琴

可提升2-KLG产量的L-山梨糖脱氢酶突变体: 本发明公开了可提升2‑KLG产量的L‑山梨糖脱氢酶突变体，属于基因工程和酶工程技术领域。本发明以氧化葡萄糖酸杆菌来源的L‑山梨糖脱氢酶为出发序列，通过定点突变获得了可以提升2‑KLG产量的L‑山梨糖脱氢酶突变体。通过发酵...; 周景文李冬李江华陈坚曾伟主余世琴

L-山梨糖脱氢酶突变体及其应用: 本发明公开了L‑山梨糖脱氢酶突变体及其应用，属于基因工程和酶工程技术领域。本发明以氧化葡萄糖酸杆菌来源的L‑山梨糖脱氢酶为出发序列，通过定点突变获得了可以提升2‑KLG产量的L‑山梨糖脱氢酶突变体。表达突变体的重组菌株R...; 周景文李冬陈坚李江华曾伟主余世琴

一种降解呕吐毒素的山梨糖脱氢酶及其突变体: 本发明公开了一种具有降解呕吐毒素特性的山梨糖脱氢酶SDH，其核苷酸序列和氨基酸序列分别为SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2。以及酶活提高的定向改造酶SDH<Sup>F103L</Sup>，其核苷酸序列和氨基酸...; 文继开李丹阳邓诣群梁国强母培强吴骏林如琴陈庆梅陈超

可提升2-KLG产量的L-山梨糖脱氢酶突变体: 本发明公开了可提升2‑KLG产量的L‑山梨糖脱氢酶突变体，属于基因工程和酶工程技术领域。本发明以氧化葡萄糖酸杆菌来源的L‑山梨糖脱氢酶为出发序列，通过定点突变获得了可以提升2‑KLG产量的L‑山梨糖脱氢酶突变体。通过发酵...; 周景文李冬李江华陈坚曾伟主余世琴

氧化葡萄糖酸杆菌中山梨酮/山梨糖脱氢酶的结构功能解析与改造: 维生素C是一种人类必须从外界获取的营养物质。2-酮基-L-古龙酸（2-keto-L-gulonic acid,2-KLG）是维生素C的直接前体,通过三菌两步发酵法获得。在这个过程中,D-山梨醇通过D-山梨醇脱氢酶（SLD...; 李冬; 关键词：2-酮基-L-古龙酸晶体结构

普通生酮基古龙酸菌中山梨糖脱氢酶和山梨酮脱氢酶的纯化及酶学性质分析被引量：2: 2017年; 【目的】对源于普通生酮基古龙酸菌(Ketogulonicigenium vulgare WSH-001)的山梨糖脱氢酶(Sorbose dehydrogenase,SDH)和山梨酮脱氢酶(Sorbosone dehydrogenase,SNDH)的酶学性质进行分析。【方法】以K.vulgare WSH-001基因组DNA为模板,PCR扩增得到山梨糖脱氢酶基因(sdh)和山梨酮脱氢酶基因(sndh),构建重组表达质粒p ET28a-sdh、p ET28a-sndh,并分别转入大肠杆菌BL21(DE3)中。利用镍柱亲和层析和凝胶过滤层析得到纯化的SDH和SNDH。【结果】成功构建产SDH和SNDH的大肠杆菌BL21(DE3)并对目的酶进行纯化。SDS-PAGE分析结果表明,SDH和SNDH的大小分别为64 k Da和48 k Da,与理论预测值一致。显色法测得SDH酶活为3.15 U/mg,最适反应温度为30°C,最适反应pH为8.0左右;SNDH酶活为6.12 U/mg,最适反应温度为35°C,最适反应pH为8.0左右。在pH 3.0、4.0、5.0的偏酸性条件下,2个酶的酶活受到显著影响。【结论】表达并纯化了来源于普通生酮基古龙酸菌来源的SDH、SNDH,并进行了酶学性质分析,为利用SDH、SNDH实现维生素C前体2-酮基-L-古龙酸的一步法发酵生产提供了必要的参考。; 高媛曾伟主周景文陈坚; 关键词：氧化葡萄糖酸杆菌 2-酮基-L-古龙酸山梨糖脱氢酶

山梨糖脱氢酶基因在酮古龙酸菌中的过表达被引量：1: 2016年; 目的在酮古龙酸菌中克隆并过表达山梨糖脱氢酶基因,以便提高单菌发酵产2-酮基-L-古龙酸的能力。方法从酮古龙酸菌DSM4025基因组中克隆获得山梨糖脱氢酶基因(sorbose dehydrogenase,sdh),酶切连接到含有双亲本接合转移关键基因即可移动基因(mobilization,mob)的p BBR1MCS-2质粒上,构建p BBR1MCS-2-sdh重组质粒;再将p BBR1MCS-2、p BBR1MCS-2-sdh分别转入供体菌大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)S17-1中,以酮古龙酸菌(Ketogulonigenium sp.)Rif-B-003为受体菌进行双亲本接合转移。挑取利福霉素(Rifamycin,Rif)和卡那霉素双抗平板上的接合子进行聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)、双酶切和测序验证。取重组菌进行摇瓶发酵,用菌体蛋白的十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)电泳结果来验证阳性克隆的过表达成功,并检测发酵终点2-酮基-L-古龙酸的产量。结果构建的重组质粒p BBR1MCS-2-sdh成功转入酮古龙酸菌(Ketogulonigenium sp.)Rif-B-003中,SDS-PAGE检测到,发酵终点菌体蛋白在58 ku(目标蛋白)处条带有加深,重组菌株发酵终点2-酮基-L-古龙酸产量相比于对照菌株酮古龙酸菌(Ketogulonigenium sp.)Rif-B-003提高了20.86%。结论山梨糖脱氢酶基因在酮古龙酸菌Rif-B-003里过表达成功,可以提高发酵终点2-酮基-L-古龙酸的产量。; 王威勋李燕李野张天园张怡轩; 关键词：山梨糖脱氢酶 2-酮基-L-古龙酸

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