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- 用于实时荧光定量PCR的组合物及其应用
- 本发明提供一种用于实时荧光定量PCR的组合物及其应用,属于核酸或微生物的测定或检验领域。本发明提供的用于实时荧光定量PCR的组合物,包括特异性正向引物、特异性反向引物和特异性探针,其中,特异性正向引物和特异性反向引物用于...
- 肖冰冰赵雨航陈超唐羚容
- 一种实时荧光定量PCR数据处理方法及装置
- 本发明提供一种实时荧光定量PCR数据处理方法及装置,所述方法包括:获取采集的目标样本中每个循环节点所对应的实测荧光数据,通过预设串扰校正模型对实测荧光数据进行校正,得到消噪荧光数据;针对消噪荧光数据做线性拟合处理,得到目...
- 张芷齐李树力李金泽姚佳郭振李超周恒
- 实时荧光定量PCR快速检测药品中大肠埃希菌
- 2025年
- 目的 建立一种药品中大肠埃希菌的实时荧光定量PCR快速检测方法。方法 根据大肠埃希菌malB基因序列,设计通用引物和探针,优化扩增反应体系,进行实时荧光定量PCR扩增,当出现C_t值时,说明供试品中检出大肠埃希菌。结果 大肠埃希菌基因组DNA检测限可达10^(-3 )ng,药品中大肠埃希菌检测限达3 cfu/g(ml),仅需24 h即可完成检测,采用该方法检测20批药品,结果与药典方法一致。结论 方法检测特异性强、所需时间短、灵敏度高,可作为《中国药典》大肠埃希菌检查法的补充方法。
- 李杰张华林鹏王家芳肖艳霞钱云开
- 关键词:中国药典药品大肠埃希菌实时荧光定量PCR
- 核酸提取产物中乙醇对实时荧光定量PCR的影响
- 2025年
- 目的研究核酸提取产物中乙醇对实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)的影响,为更高灵敏度核酸检测提供乙醇浓度界限。方法建立重铬酸钾氧化法检测两种商品化磁珠法核酸提取试剂盒提取产物的乙醇残留,检测其是否对qPCR产生影响,再将不同浓度乙醇溶液混合核酸模拟提取产物溶解冷冻干燥处理的qPCR试剂(以下简称冻干试剂)并进行扩增,观察其灵敏度变化,并对Ct值、荧光增益强度和扩增效率进行统计学分析。结果两种试剂盒的提取产物中残留3%~9%乙醇,对扩增均造成影响,有可能会导致灵敏度下降。对于人巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV),乙醇浓度达到4.38%时,荧光增益强度差异有统计学意义(P<0.001),扩增效率出现明显差异;对于呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV),乙醇浓度达到2.63%时,荧光增益强度差异有统计学意义(P=0.004);乙醇浓度达到3.50%时,Ct值差异有统计学意义(P=0.004),扩增效率出现明显差异。结论乙醇会影响qPCR灵敏度、Ct值、荧光增益和扩增效率。为进行更高灵敏度的核酸检测,建议乙醇在提取产物中的残留不超过3.50%。
- 龚向莲黄玉麟林伟春杨连威胡祐邵珊张东旭
- 关键词:乙醇实时荧光定量PCR冷冻干燥
- 花椰菜实时荧光定量PCR内参基因的筛选与评价
- 2025年
- 为筛选适合花椰菜稳定表达的内参基因,利用实时荧光定量PCR技术,分析检测9个候选内参基因ACT1、ACT2、ACT7、TUB、EF-1α、EF-1β、GAPDH、UBQ和HIS在花椰菜不同组织、不同品种和花球不同发育时期处理下mRNA的表达稳定性。利用3个数据分析软件(geNorm,NormFinder和BestKeeper)综合评价9个候选内参基因的表达稳定性。结果表明,在花椰菜不同组织、不同品种和花球不同发育时期处理下,候选内参基因的表达稳定性存在差异。ACT2和EF-1α在不同组织处理下表达最为稳定;ACT7和TUB在不同品种处理下表达稳定性最好;ACT7和GAPDH在花球不同发育时期处理下被筛选为最合适的内参基因组合。结果表明,在特定条件下,获得合适的内参基因为花椰菜新基因表达分析的准确性提供了保障,并为十字花科芸薹属植物关键基因的挖掘提供了有益的参考。
- 林珲裘波音张前荣李大忠温庆放
- 关键词:花椰菜内参基因实时荧光定量PCR
- 实时荧光定量PCR快速检测食品中沙门氏菌的研究
- 2025年
- 目的:构建快速检测食品中沙门氏菌的实时荧光定量PCR法。方法:以沙门氏菌核酸DNA提取物为模板开展荧光检测实验,建立快速检测手段,用于阳性培养液及食品中沙门氏菌检测分析。结果:该方案能在30批食品样本中成功扩增出沙门氏菌特异性片段,最低检出浓度15CFU/mL,检测时长<24h。结论:本研究提出的实时荧光定量PCR法具有高效、快速、灵敏、精准的特点,可广泛应用于食品中沙门氏菌的快速筛查与检测,为食品安全监控提供强有力的技术支持。
- 刘占生张莉王嫘
- 关键词:实时荧光定量PCR沙门氏菌
- 一锅法实时荧光定量PCR检测miRNA的引物组及方法
- 本发明提供了一锅法实时荧光定量PCR检测miRNA的引物组及方法,引物组包括特异性茎环引物LP,特异性Linker引物、通用上游引物F、通用下游引物R以及特异性探针P,能够保证扩增的特异性;所有反应所需试剂一次加入反应体...
- 杜维杨林杨松涛苏畅苏柏文
- 实时荧光定量PCR对乙型肝炎病毒DNA定量检测效果分析
- 2025年
- 通过实时荧光定量PCR技术尝试解析其在乙型肝炎病毒DNA检测方面的效益。方法 选择了800名乙型肝炎患者作为样本,分为两组:一组400名患者采用传统检测手段,而另一组400名患者则采用了实时荧光定量PCR技术进行检测分析。结果 综合研究结果表明,与传统检测手段相比,运用实时荧光定量PCR技术的组别在HbeAg,HbsAg,HbeAb等血清标志物诊断准确率及阳性检出率上有显著优势(P<0.05),这更进一步印证了实时荧光定量PCR技术对乙型肝炎病毒DNA的检测具有着出色的灵敏度和特异度。结论 实时荧光定量PCR技术应用于乙型肝炎病毒DNA定量检测,准确度高,能更有效地辅助临床对乙型肝炎的诊断,对于疾病防控和治疗方案的选择具有重要参考价值。
- 黄驾
- 关键词:实时荧光定量PCR乙型肝炎病毒DNA疾病防控
- 一种天冬实时荧光定量PCR内参基因的筛选方法及应用
- 本发明公开了一种天冬实时荧光定量PCR内参基因的筛选方法及应用,涉及分子生物学技术领域;步骤1,材料的获取:选取天冬植株进行采样,采样包括不同生长年限和不同组织部位;步骤2,天冬样品RNA的提取和cDNA模板的制备:将采...
- 沈刚张桐鄢贵宋启瑞殷洪林谭庆刍郑午曹冬
- 一种基于单标记荧光探针的实时荧光定量PCR及其应用
- 本发明公开了一种基于单标记荧光探针的实时荧光定量PCR及其应用。本发明提供了DNA分子组合,由DNA分子Ⅰ和DNA分子Ⅱ组成;DNA分子Ⅰ为具有荧光基团修饰的单链DNA分子,其中荧光基团修饰位于一个特定核苷酸,该特定核苷...
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