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实时聚合酶链反应
2006年
当Kary Mu11is设计聚合酶链反应(PCR)并使它于十九世纪八十年代的某一晚登陆加州海岸时,他根本就没有想象到这种方法会在分于生物学和医学遗传学的多个领域中变得如证重要。最初PCR技术由于缺乏精良的设备和试剂因而发展受到限制,但是没过多久,这种方法在几个小时内从少至单个细胞开始,扩增数十亿选择性脱氧核糖核酸(DNA)片段的能力,显然对于核酸研究和操作具有无法估量的价值。
关键词:实时聚合酶链反应脱氧核糖核酸医学遗传学PCR技术单个细胞生物学
胃液实时聚合酶链反应检测儿童幽门螺杆菌及宿主基因型的临床研究被引量:5
2022年
目的探讨胃液实时聚合酶链反应(real-time PCR)检测儿童幽门螺杆菌(HP)感染、克拉霉素敏感性和宿主CYP2C19基因代谢型方法的准确性,旨在寻求一种方便、快速、准确检测儿童HP感染,克拉霉素敏感性和CYP2C19基因代谢型的方法。方法选取2013年7月至2014年11月北京儿童医院消化科123例13C呼气试验检查阳性的胃炎或消化性溃疡患儿进行电子胃镜检查,胃镜下取胃黏膜并收集胃液标本。从胃液中提取DNA,然后通过聚合酶反应(PCR)扩增Rnase P和cag H以检测幽门螺旋杆菌的存在。通过PCR限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)分别检测HP23SrRNA和宿主CYP2C19基因代谢型。研究共利用5对引物和9条探针进行HPcag H基因和23SrRNA基因,以及人Rnase P基因和CYP2C19*2、CYP2C19*3基因检测。将胃液结果与胃黏膜活检标本HP培养和E-test药敏试验及CYP2C19基因代谢型检测结果进行比较分析。结果以胃黏膜HP培养、E-test药敏试验及CYP2C19基因代谢型检测结果为金标准,胃液实时PCR检测HP感染诊断敏感度为100%(94/94)、准确度为76.4%(94/123);检测克拉霉素是否耐药敏感度为98.9%(90/91)、特异度为66.7%(2/3),阳性符合率为98.9%(90/91)、阴性符合率为66.7%(2/3)、准确度为97.9%(92/94);检测宿主CYP2C19基因代谢型的准确度为90.0%(90/100)。结论胃液实时聚合酶链反应是检测儿童HP感染、克拉霉素敏感性和宿主CYP2C19基因代谢型有效方法,儿童临床值得推广。
李东丹彭贤慧房永利王国丽周锦于飞鸿官德秀郭景何利华张建中周丽雅张晶徐樨巍
关键词:幽门螺杆菌胃液耐药儿童
一种通过实时聚合酶链反应检测突变基因的方法
本发明涉及在PCR产物的末端上互补结合探针的情况下,利用抑制DNA聚合酶的5'‑皮瓣内切核酸(FEN)活性的特性来检测单核苷酸多态性(SNP)的方法。更具体地涉及将实时聚合酶链反应(real‑time PCR)中使用的...
金载钟 车善浩 林时圭
实时聚合酶链反应在妊娠晚期孕妇GBS感染诊断中的应用观察被引量:2
2020年
目的探讨妊娠晚期孕妇B族溶血性球菌(GBS)感染诊断中应用实时聚合酶链反应(real-time PCR)的价值。方法选取2018年8月至2019年8月在濮阳市妇幼保健院产检的380例妊娠晚期孕妇。所有孕妇入院时采集阴道及直肠分泌物,进行real-time PCR法与细菌培养法检测。GBS感染诊断金标准为两种方法联合诊断结果,比较两种诊断方法阳性检出情况,并分析其诊断的敏感性、特异性和准确性。结果 380例妊娠晚期孕妇中,经real-time PCR法联合细菌培养法诊断有30例GBS感染者,阳性率为7.89%;real-time PCR法诊断有29例GBS感染者,阳性率为7.63%;细菌培养法诊断有9例GBS感染者,阳性率为2.37%。real-time PCR法阳性检出率高于细菌培养法,差异有统计学意义(P<0.05)。real-time PCR法检测的敏感性、特异性和准确性较细菌培养法高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论妊娠晚期孕妇GBS感染诊断中应用real-time PCR法的诊断效能高,可为临床诊疗提供可靠依据。
崔明
关键词:革兰氏阳性菌感染孕妇婴儿
实时聚合酶链反应与细菌培养在妊娠晚期孕妇B族球菌感染诊断中应用价值被引量:6
2019年
目的探讨妊娠晚期孕妇B族球菌感染(GBS)诊断中实时聚合酶反应(PCR)与细菌培养的应用价值。方法回顾性分析2016年10月至2018年9月于我院行产前检查的520例妊娠晚期孕妇临床资料,采用细菌培养与实时PCR技术进行GBS检测,以实时PCR法联合细菌培养判定结果为“金标准”,比较2种检测结果及诊断效能。结果 520例妊娠晚期孕妇中,经PCR法或细菌培养判定最终确诊GBS感染者41例,阳性率为7.9%(41/520);细菌培养确诊GBS感染者12例,阳性检出率为2.3%(12/520),实时PCR法确诊GBS感染者39例,阳性检出率为7.5%(39/520),细菌培养与PCR法阳性检出率相比,差异有统计学意义(P<0.05);实时PCR法诊断敏感度、特异度及准确性均高于细菌培养法,差异有统计学意义(P<0.05)。结论与细菌培养相比,实时PCR法在妊娠晚期孕妇GBS感染诊断中具有更高的应用价值,利于为临床干预治疗提供有力依据。
安淑霞史九波荆菁华徐静
关键词:妊娠末期链球菌属聚合酶链反应
双重等位基因特异性实时聚合酶链反应检测三氯乙烯药疹样皮炎患者HLA-B*13:01基因被引量:2
2017年
目的应用双重等位基因特异性实时聚合酶链反应(PCR)检测三氯乙烯药疹样皮炎患者携带人白细胞抗原等位基因(HLA-B*13:01)情况。方法选取2014年1月至2016年10月入院接受诊疗的20名三氯乙烯药疹样皮炎患者作为病例组,并随机选取2016年1至10月接受健康检查的20名体检正常者作为对照组。采集所有研究对象的外周肘静脉血并提取基因组DNA,用双重等位基因特异性实时PCR检测DNA样本是否含有HLA-B*13:01基因,并比较分析病例组携带肌HLA-B*13:01基因情况与对照组的差异。结果病例组患者年龄中位数为25.0岁,对照组中位数为27.0岁,差异无统计学意义(Z=0.30,P〉0.05)。病例组男性占60.0%,与对照组(70.0%)差异无统计学意义(Х^2=0.44,P〉0.05)。病例组患者接触三氯乙烯平均时长为30.8d,对照组人群均未接触三氯乙烯。病例组HLA—B*13:01基因频率(80.0%)高于对照组(20.0%),差异有统计学意义(Х^2=14.40,P〈0.01),OR值为16.00。结论双重等位基因特异性实时PCR可能用于检测三氯乙烯药疹样皮炎患者HLA-B*13:01基因研究。
林大枫杨炎桦王佃鹏李培茂张志敏张艳芳黄先青
关键词:三氯乙烯药疹样皮炎聚合酶链反应
利用5’‑瓣状内切核酸活性被抑制的DNA聚合酶并通过实时聚合酶链反应来检测突变基因的方法
本发明涉及在PCR产物的末端上互补结合探针的情况下,利用抑制DNA聚合酶的5'‑瓣状内切核酸(FEN)活性的特性来检测单核苷酸多态性(SNP)的方法。更具体地涉及将实时聚合酶链反应(real‑time PCR)中使用的...
金载钟 车善浩 林时圭
利用单管巢式实时聚合酶链反应(PCR)的改良结核菌诊断方法
本发明涉及一种利用单管巢式实时聚合酶链反应(PCR)的改良结核菌诊断方法,尤其是一种利用两组结核菌特殊引物(Primer)的单管巢式PCR方法,本发明的方法诊断迅速,有利于特异且具有高敏感性的结核菌诊断。
李惠泳
实时聚合酶链反应的集成分析系统和DNA芯片以及使用其的集成分析方法
本申请提供实时聚合酶链反应的集成分析系统和DNA芯片以及使用其的集成分析方法,更具体地涉及实时聚合酶链反应的集成分析仪器和DNA芯片以及使用其的集成分析方法。根据本发明的生物材料的集成分析方法,可在单反应器中进行基因扩增...
徐圣民李都富李仲焕白文哲具秀珍
利用单管巢式实时聚合酶链反应(PCR)的改良结核菌诊断方法
本发明涉及一种利用单管巢式实时聚合酶链反应(PCR)的改良结核菌诊断方法,尤其是一种利用两组结核菌特殊引物(Primer)的单管巢式PCR方法,本发明的方法诊断迅速,有利于特异且具有高敏感性的结核菌诊断。
李惠泳

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马道新
作品数:297被引量:656H指数:11
供职机构:山东大学齐鲁医院
研究主题:双自杀基因 杀伤作用 自杀基因 白血病 基因治疗
肖白
作品数:131被引量:571H指数:12
供职机构:新疆生产建设兵团
研究主题:聚合酶链反应 基因诊断 产前诊断 基因 基因突变
刘敬忠
作品数:189被引量:736H指数:13
供职机构:首都医科大学附属北京朝阳医院
研究主题:基因诊断 聚合酶链反应 产前诊断 PCR 基因
黄晓军
作品数:1,178被引量:5,890H指数:28
供职机构:北京大学人民医院
研究主题:造血干细胞移植 移植后 异基因造血干细胞移植 异基因造血干细胞 白血病
王云贵
作品数:61被引量:147H指数:9
供职机构:浙江大学
研究主题:急性髓系白血病 髓样 高三尖杉酯碱 白血病 ABL