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结合并中和委内瑞拉脑炎病毒的单结构域抗体
本文描述了单结构域抗体,其可作为用于检测或治疗委内瑞拉脑炎病毒(VEEV)的常规单克隆抗体的替代品。
J·L·刘D·扎贝塔基斯E·R·高曼G·P·安德森
用于抑制委内瑞拉脑炎病毒生物活性的蛋白及其应用
本发明公开了用于抑制委内瑞拉脑炎病毒生物活性的蛋白及其应用,所述蛋白为所述蛋白为LDLRAD3突变体,所述蛋白为:P1)将序列表中SEQ ID No.51第1‑70位所述的氨基酸的第30位、第34位、第39位、第41位...
向烨章新政马丙婷黄翠清
重组委内瑞拉脑炎病毒疫苗的研制现状被引量:5
2020年
委内瑞拉脑炎病毒引起的委内瑞拉脑炎是一种自然疫原性疾病。该病毒可诱导感染的宿主产生细胞、体液和粘膜免疫应答,可通过分子生物学技术改造为理想的疫苗载体,从而表达病毒和细菌的多种蛋白。这些病原体包括Ⅰ型人类免疫缺陷病毒、流行性感冒病毒、人乳头瘤病毒16型、Norwalk样病毒、埃博拉病毒、苏丹病毒尔堡病毒、拉沙病毒、麻疹病毒、炭疽杆菌和金黄色葡萄球菌等,本文综述委内瑞拉脑炎病毒介导的病原体疫苗的研制现状。
李文桂陈雅棠
关键词:委内瑞拉马脑炎病毒疫苗
委内瑞拉脑炎病毒三种检测方法的建立与初步应用
委内瑞拉脑炎(Venezuelan Equine Encephalitis,VEE)是由委内瑞拉脑炎病毒(Venezuelan Equine Encephalitis Virus,VEEV)引起的高致病性人兽共患传染...
焦翠翠
关键词:间接ELISA双抗体夹心ELISA假病毒
委内瑞拉脑炎病毒E2蛋白的原核表达、纯化及多克隆抗体的制备被引量:1
2017年
原核表达并纯化委内瑞拉脑炎病毒(Venezuelan equine encephalitis virus,VEEV)E2蛋白胞外区,并以此为抗原免疫动物制备多克隆抗体。利用PCR扩增VEEV E2蛋白胞外区基因并将其插入到原核表达载体pET-30a(+),构建重组质粒pET-30a(+)-VEEV-E2,转化至大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导目的蛋白表达。优化诱导条件并对目的蛋白进行亲和纯化,用纯化后的蛋白免疫BALB/c小鼠制备多克隆抗体,通过间接免疫荧光方法检测抗体的结合能力。通过PCR扩增出约为1 023bp的VEEV E2基因胞外区,成功构建重组表达质粒pET-30a(+)-VEEV-E2,在37℃,0.6mmol/L IPTG诱导3h条件下目的蛋白表达量最高且主要以包涵体形式存在;将纯化的目的蛋白免疫BALB/C小鼠成功制备了抗VEEV E2蛋白胞外区鼠源多克隆抗体,经间接免疫荧光鉴定制备的抗体能够特异性识别真核表达的VEEV E2蛋白。VEEV E2基因胞外区在大肠杆菌中获得稳定表达,且表达的目的蛋白具有良好的免疫原性,为VEEV快速诊断方法及新型疫苗的研究奠定了基础。
焦翠翠金宏丽蒋天琪曹增国曹增国吴芳芳李岭邱泊宁吴芳芳黄培王琪赵永坤冯娜迟航高玉伟黄培杨松涛夏咸柱
关键词:委内瑞拉马脑炎病毒原核表达纯化多克隆抗体
委内瑞拉脑炎病毒一步法荧光定量RT-PCR方法的建立被引量:5
2015年
委内瑞拉脑炎(Venezuelan equine encephalitis,VEE)是由委内瑞拉脑炎病毒(Venezuelan equine encephalitis virus,VEEV)复合物引起的一种人兽共患病。我国目前尚无该病,因此建立一种快速准确的检测方法对预防和控制该病至关重要。本研究通过分析委内瑞拉脑炎病毒nsp1基因序列的保守性,设计了一对能检测VEEV复合物所有亚型毒株的特异性引物和Taqman探针。通过反应体系和反应条件优化,建立了检测委内瑞拉脑炎病毒复合物的一步法实时荧光定量RT-PCR方法。该方法检测VEEV经体外转录获得的RNA,检测的灵敏度达3.27×102拷贝/μL。以该方法检测与VEEV同属的东方脑炎病毒(EEEV)和西方脑炎病毒(WEEV)nsp1基因相同区段的RNA以及同属的基孔肯雅病毒(CHIKV),结果均为阴性,表明该方法具有良好的特异性。该方法将为可能在我国出现的委内瑞拉脑炎的侦检提供有效技术手段。
千莎莎何彪涂忠忠郭焕成涂长春
关键词:委内瑞拉马脑炎病毒
委内瑞拉脑炎病毒重组抗原的制备纯化及其胶体金免疫层析检测方法的建立被引量:3
2011年
目的:表达委内瑞拉脑炎病毒E2重组蛋白,并结合胶体金免疫层析技术建立一种简便检测委内瑞拉脑炎病毒特异性抗体的方法。方法:利用已经构建的表达E2抗原的工程菌,用IPTG诱导,表达蛋白主要以包涵体的形式存在。通过一系列条件的变性、复性、透析,所制抗原用以包被硝酸纤维素膜,利用胶体金标记和免疫层析技术,建立委内瑞拉脑炎病毒快速检测方法。对该方法的敏感性、特异性和稳定性作出评价。结果:重组工程菌可表达分子质量为40 kDa的目的蛋白,纯化后的蛋白质经SDS-PAGE显示纯度达95%以上。建立的检测方法可在20 min完成检测。对症状相似及近缘的其他病毒进行检测,均无非特异反应。试纸条在37℃下保存2周,检测结果不变。该方法与R&D公司商品化的ELISA试剂盒灵敏度检测无明显差异;对92份阴性血清进行检测,两种检测方法的符合率为96.7%。结论:重组委内瑞拉脑炎病毒蛋白产生的包涵体变性复性后生具有良好的重复性和稳定性,可作为委内瑞拉脑炎病毒多种检测方法的抗原原料。胶体金免疫层析法具有快速、灵敏、特异、稳定的特点,适用于现场检测。
王振东王林林杨宇杨永莉王静
实时RT-PCR法检测感染小鼠不同组织标本中的委内瑞拉脑炎病毒被引量:2
2006年
目的为委内瑞拉脑炎病毒所致疾病的早期诊断和流行病学研究提供技术支持。方法建立了委内瑞拉脑炎病毒特异、敏感和快速的实时RT-PCR法,并对委内瑞拉脑炎病毒感染昆明小鼠的不同组织标本中的病毒载量进行了定量检测。结果本研究建立的实时RT-PCR法敏感(10TCID50/ml)、特异(对其它甲病毒成员,如东部脑炎病毒和西部脑炎病毒检测为阴性)。该方法可从委内瑞拉脑炎病毒感染小鼠后第1d的血液、脾脏、脑组织中检测到不同含量的病毒核酸,而在感染后第3d仅从脾脏和脑组织中检测到病毒核酸。结论实时RT-PCR法不仅是一种敏感、准确的检测方法,可用来了解病毒感染量与疾病严重程度的关系和评价病毒病疫苗的免疫效果,而且也为VEEV疾病的临床诊断和流行病学监测提供工具。
邓永强姜涛于曼陈水平秦成峰刘伯华祝庆余秦鄂德
关键词:委内瑞拉马脑炎病毒
包含委内瑞拉脑炎病毒复制子载体和副粘病毒蛋白抗原的免疫原性组合物
从被委内瑞拉脑炎病毒复制子颗粒(VRP)群体感染的细胞生产了自增殖性促融合小泡。小泡的所述的自增殖、促融合属性源于编码病毒融合蛋白的异源基因的表达,所述异源基因整合至复制缺陷性的复制子颗粒中。可以从显示严重细胞病变效应...
G·R·科瓦克斯X·莫N·瓦西拉基斯S·巴加瓦T·J·赞布S·A·乌德姆
炭疽、Ebola病毒尔堡病毒以及委内瑞拉脑炎病毒的单独和联合DNA疫苗的比较
2004年
李平忠
关键词:炭疽疫苗DNA疫苗马尔堡病毒脑炎病毒炭疽芽孢

相关作者

陈水平
作品数:118被引量:289H指数:9
供职机构:解放军第307医院
研究主题:登革病毒 登革2型病毒 西尼罗病毒 衣壳蛋白 登革热
秦鄂德
作品数:273被引量:785H指数:14
供职机构:军事医学科学院微生物流行病研究所
研究主题:登革病毒 登革2型病毒 病毒 登革热病毒 引物
邓永强
作品数:121被引量:341H指数:9
供职机构:军事医学科学院微生物流行病研究所
研究主题:登革病毒 西尼罗病毒 病毒 登革2型病毒 衣壳蛋白
姜涛
作品数:189被引量:474H指数:10
供职机构:军事医学科学院微生物流行病研究所
研究主题:登革病毒 引物 西尼罗病毒 病毒 海水浸泡
于曼
作品数:179被引量:511H指数:10
供职机构:军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室
研究主题:登革病毒 登革2型病毒 登革热病毒 病毒 基因组