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- 一种σNS多克隆抗体制备方法
- 本发明涉及σNS蛋白技术领域,具体公开了一种σNS多克隆抗体制备方法,包括以下步骤:pET‑28a‑S3质粒的构建、His标签重组蛋白质的表达与纯化、多克隆抗体的制备与鉴定。本发明提供从纳尔逊海湾正呼肠孤病毒(NBV)中...
- 陶晓莉马巍赵微李永刚田晶孙绿茵马竹萍薛晓玲
- 一种鹌鹑CENP-A多克隆抗体制备方法和应用
- 本发明公开了一种鹌鹑CENP‑A多克隆抗体制备方法和应用,所述鹌鹑CENP‑A多克隆抗体制备方法,包括构建含有如SEQ ID NO.1所示CENP‑A目的基因片段的重组表达载体;将重组表达载体转化至感受态细胞并诱导表达融...
- 白皓庄重郭其新陈世豪常国斌
- 一种兔多克隆抗体及其制备方法和相关应用
- 本发明公开了一种兔多克隆抗体及其制备方法和相关应用,涉及抗体领域。本发明发现将活性成分包括QS‑21和聚肌胞苷酸Poly I:C的新型佐剂应用于兔多克隆抗体的制备,能够更有效地增强抗原的免疫原性,促进更高亲和力和特异性的...
- 方习静陈静陈岭林管子超
- 莱茵衣藻TLP2多克隆抗体制备及其突变体鉴定
- 2025年
- 【目的】制备兔抗莱茵衣藻(Chlamydomonas reinhardtii,C.reinhardtii)类Tubby家族蛋白2(TLP2)多克隆抗体来鉴定莱茵衣藻tlp2突变体,研究莱茵衣藻TLP2的生物学功能。【方法】通过聚合酶链式反应(PCR)获得tlp2目的基因片段,构建原核表达载体pET-28a(+)-tlp2、pMAL-c2x-tlp2。将2种重组质粒通过化学转化的方法转至大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)BL21(DE3),经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(isopropylβ-Dthiogalactoside,IPTG)诱导表达融合蛋白6×His-TLP2及MBP-TLP2。将纯化后的6×His-TLP2融合蛋白免疫新西兰大白兔来获得抗血清。【结果】通过间接ELISA法测定抗血清效价达1∶51200,对抗血清进行protein A和抗原抗体纯化,在1∶500的稀释条件下,蛋白质免疫印迹表明TLP2抗体能够特异性识别莱茵衣藻TLP2。【结论】作者制备出了高特异性、高灵敏度的兔抗莱茵衣藻TLP2多克隆抗体,并鉴定出一株tlp2突变体,可用于后续莱茵衣藻TLP2在纤毛生成和纤毛信号转导中的功能研究。
- 刘雁霞陶冶张媛媛鲍冬雪樊振川
- 关键词:莱茵衣藻多克隆抗体蛋白质纯化
- 多房棘球蚴Calpain A基因克隆、表达及其多克隆抗体制备
- 2025年
- 目的分析并克隆多房棘球蚴Calpain A(Em-Calpain A)基因开放阅读框(Open Reading Frame,ORF)序列,进行体外诱导表达并制备兔多克隆抗体。方法从WormBase数据库下载多房棘球绦虫Em-Calpain A基因ORF序列。采用ProtParam、SMART等在线工具对其理化性质、蛋白结构域等进行分析和预测;利用MEGA 7.0软件的邻接法构建系统进化树。提取原头蚴总RNA并反转录为cDNA,PCR扩增Calpain A基因,构建pET28a-Em-Calpain A原核表达载体,经异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达重组蛋白,纯化后免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,采用10%SDS-PAGE、Western blot和ELISA对重组蛋白纯度和抗体滴度及反应性进行鉴定。结果序列分析表明Em-Calpain A基因ORF长度为2469 bp,编码822个氨基酸,推测理论分子质量约92.13 ku,等电点为5.3。蛋白结构分析显示Em-Calpain A具有1个高度保守的钙蛋白酶样硫醇蛋白酶结构域(CysPc)、1个钙蛋白酶Ⅲ结构域(CalpainⅢ)和2个E、F的螺旋-环-螺旋结构(EF-hand),说明其属于钙蛋白酶家族。系统进化分析显示Em-Calpain A序列与带科绦虫聚于一类,与肝片吸虫、日本血吸虫、人、犬、牛及原虫亲缘关系较远。重组蛋白主要以包涵体形式表达,蛋白分子质量约为93 ku,与预测分子质量大小基本一致。ELISA检测结果显示制备的多克隆抗体效价达1∶262144;该抗体可特异性识别His-Em-Calpain A和原头蚴天然Calpain A蛋白。结论成功构建Em-Calpain A基因的原核表达系统并制备了其多克隆抗体,为研究该基因的功能奠定了基础。
- 李慧敏张少华张月玥王帅生鸿鹏李雅琪王得先蒋佳颖
- 关键词:多房棘球蚴表达纯化多克隆抗体
- 猪萨佩罗病毒VP4蛋白多克隆抗体制备及功能验证
- 2025年
- 为深入揭示猪萨佩罗病毒(porcine sapelovirus,PSV)致病机制,以毒株SHCM2019为研究对象,原核表达VP_(4)蛋白并制备多克隆抗体。根据VP_(4)氨基酸序列进行PSV遗传进化分析,然后将VP_(4)基因与原核表达载体连接,经诱导表达得到可溶性VP_(4)蛋白。纯化后的VP_(4)蛋白免疫BALB/c小鼠,制备多克隆抗体并进行ELISA、Western blot、间接免疫荧光试验(IFA)验证其反应性。ELISA结果显示,多克隆抗体效价达1∶128000;Western blot和IFA结果表明,其能特异性识别和结合PSV,说明重组VP_(4)蛋白具有较好的免疫原性和反应原性。本研究成功表达了VP_(4)蛋白并制备了多克隆抗体,为VP_(4)蛋白功能研究奠定基础。
- 钟祖昌李本强陶洁陶洁石迎程靖华唐攀焦嘉杰刘佩红
- 关键词:原核表达多克隆抗体
- 一种高覆盖率多克隆抗体制备方法及获得的多克隆抗体
- 本发明属于水产养殖技术领域,具体涉及一种高覆盖率多克隆抗体制备方法及获得的多克隆抗体,包括如下步骤:(S1)、将抗原物质进行充分的分析,并按照某一个或多个特性进行区别、分离,制备出不同组分的抗原;(S2)、利用步骤(S1...
- 俞佳虹
- 一种甘蓝型油菜抗旱基因BnaTZF1A的多克隆抗体及其制备方法
- 本发明属于生物化学技术领域,具体涉及一种甘蓝型油菜抗旱基因BnaTZF1A的多克隆抗体及其制备方法。本发明以甘蓝型油菜抗旱基因BnaTZF1A的DNA片段设计引物对BnTZF1A‑RRF和BnTZF1A‑TZFR,构建重...
- 黄勇潘娇张蕾陈敏阮雨萱刘博宇阮颖皮博艺何小力
- 一种抗乌鳢IgM的抗原表位多肽、多克隆抗体及其制备方法和应用
- 本发明属于鱼类免疫检测技术领域,具体涉及一种抗乌鳢IgM的抗原表位多肽、多克隆抗体及其制备方法和应用。具体的,本发明成功构建了基于乌鳢IgM特异性抗原表位多肽及相应多克隆抗体制备技术体系。同时通过生物信息学表位预测结合免...
- 许国晶郭芳芳陈秀丽姜燕臧金梁徐海强秦玉广曹振杰
- 一种莱茵衣藻NPHP4蛋白的兔多克隆抗体及其制备方法和应用
- 本发明公开了一种莱茵衣藻NPHP4蛋白的兔多克隆抗体及其制备方法和应用,NPHP4蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。制备方法:莱茵衣藻NPHP4蛋白抗原表位的分析与设计,选取859‑1058aa氨基酸片段构建...
- 王亮徐闯蒋林李亚王苏慧钱蕴瑶吴怡琼董周舟苗宸羽
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- 吴秀山

- 作品数:299被引量:410H指数:8
- 供职机构:湖南师范大学生命科学学院
- 研究主题:心脏发育 果蝇 斑马鱼 多克隆抗体 心脏
- 殷宏

- 作品数:697被引量:1,350H指数:18
- 供职机构:中国农业科学院兰州兽医研究所
- 研究主题:泰勒虫 试剂盒 非洲猪瘟病毒 环形泰勒虫 原核表达
- 独军政

- 作品数:222被引量:458H指数:10
- 供职机构:中国农业科学院兰州兽医研究所
- 研究主题:口蹄疫病毒 多克隆抗体 原核表达 蓝舌病毒 单克隆抗体
- 王硕

- 作品数:646被引量:2,135H指数:21
- 供职机构:南开大学医学院
- 研究主题:抗体 分子印迹 人工抗原 食品 分子印迹聚合物
- 樊振川

- 作品数:43被引量:61H指数:5
- 供职机构:天津科技大学
- 研究主题:多克隆抗体 莱茵衣藻 纤毛 原核表达 纯化