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鳗鲡病原菌外膜蛋白二联基因工程产物的表达与免疫原性初步研究
鱼类病原菌种类多,同种病原菌又常存在不同的亚种或血清型,因此针对单一菌种研制的鱼类亚单位疫苗存在保护范围窄、保护性较低等问题,很难应用于水产养殖实践。本研究利用课题组近10年分离的不同鳗鲡养殖区的病原性气单胞菌和爱德华氏...
王玉
关键词:气单胞菌迟缓爱德华氏菌外膜蛋白基因鳗鲡免疫原性
利用his-tag纯化和复性基因工程产物肠激酶被引量:3
2006年
构建了融合表达肠激酶轻链(EKLC)的基因工程大肠杆菌,将该菌于37℃在含30mg/L卡那霉素的LB培养基中培养,当细胞密度(OD600)达到0.5~0.6时加入最终浓度为0.4mmol/L的IPTG并降温至26℃进行诱导表达,4h后目的蛋白质的表达量可达菌体总蛋白质的40%以上,但所表达的重组产物大多以包涵体形式存在于菌体中。利用产物N端携带6个组氨酸标签与金属螯合层析介质中镍离子的亲和性,应用镍离子金属螯和层析对样品包涵体进行了纯化和复性研究。实验结果表明,在变性条件下纯化的样品在柱上不经洗脱,直接用复性液洗涤6h,可以使EKLC在得到提纯的同时实现复性,得到了电泳纯度为96%的具有生物活性的EKLC,最高活性为712U。
顾玮彦黄磊徐志南岑沛霖
关键词:牛肠激酶复性
利用his-tag纯化和复性基因工程产物肠激酶
对肠激酶的重组产物进行了诱导表达,分离纯化以及复性研究。结果表明,该工程菌用LB 培养基在37℃扩增至OD6000.5~0.6 时,加入0.4mmol/L IPTG,26℃诱导培养4 小时,此时目的蛋白的表达量可达菌体总...
顾玮彦黄磊徐志南岑沛霖
关键词:牛肠激酶HIS-TAG纯化工艺
酵母表达基因工程产物特性分析被引量:21
2001年
本文阐述了酵母表达系统在表达外源基因特别是大分子真核生物基因方面的优越性 ;分析了酵母表达系统的局限性 :聚合体的存在、信号肽加工不完全、内部降解等而造成的产物不均一现象。同时提出了相应的解决办法。
刘文胡巍王洪海
关键词:酵母基因工程
酵母表达基因工程产物特性分析被引量:8
1998年
阐述了酵母表达系统在表达外源基因特别是大分子真核生物基因方面的优越性,分析了由于酵母表达系统的局限性如聚合体的存在、信号肽加工不完全、内部降解等而造成的产物不均一现象,提出了相应的解决方法。
刘文
关键词:酵母基因工程不均一性
基因工程产物生技霉素对小鼠致畸作用的研究被引量:2
1998年
利用基因重组技术获得的生技霉素对胚胎影响的研究结果表明,生技霉素经口服给药的三个剂量组和阳性对照环磷酰胺组小鼠孕鼠体重均未受明显影响,但环磷酰胺组吸收胎率和死胎率明显增加,活胎率减少,环磷酰胺对胎鼠有明显致畸作用(P<0.001)。生技霉素大剂量对胚胎有一定毒性,所致吸收胎比阴性对照有所增加。
赵春燕孙涛林赴田王以光金文藻
关键词:环磷酰胺致畸作用基因重组
真核细胞基因工程产物人生长激素的纯化研究
1997年
应用反相高效液相色谱法(RP-HPLC)对真核细胞基因表达产物人生长激素进行了纯化研究,发现在71.67%的乙晴浓度下人生长激素可有效地与其它杂蛋白分离,乙晴与人生长激素的短时间接触不影响其放射免疫活性.
于自然俞新大周卫东耿朝晖张宝珠李建民崔同昌
关键词:人生长激素纯化基因工程真核细胞
基因工程产物纯化工艺的设计被引量:14
1995年
基因工程产物纯化工艺的设计徐明波,马贤凯(军事医学科学院基础医学研究所)工艺的设计和操作单元的选择是一个在尝试和失败中不断积累经验的过程,与工艺设计者的知识水平与经验有关。前人工作的总结是获得设计思路的重要途径[1]。一、影响工艺设计的因素分析1.活...
徐明波马贤凯
关键词:基因工程基因工程产物纯化工艺
人骨形成蛋白-2AcDNA基因工程产物诱骨活性的形态学证明被引量:3
1995年
人骨形成蛋白2A(humanbonemorphogeneticprotein2A,hBMP2A)cDNA3′端567个核苷酸插入表达载体PSG4T-2中,在大肠杆菌中获得15%的表达,表达产物为21KD的蛋白质,经包涵体洗涤,尿素变性和复性后,取1ing表达产物,植入小鼠股四头肌中,21天后取植入区进行组织切片观察,证实这种基因工程产物具有良好的异位骨诱导活性。
刘新平张远强陈南春陈苏民
关键词:人骨形成蛋白基因工程产物骨诱导活性
酵母表达基因工程产物不均一性分析及其对策被引量:29
1994年
应用FPLC,SDS-PAGE,Western Blot等技术,揭示了酵母表达系统生产重组人αA干扰素的不均一性,主要表现为聚合体的存在,信号肽加工不完全以及内部降解现象。文中详细分析了酵母表达基因工程产物不均一性的原因,并提出解聚,基因定点突变,抑制蛋白酶活性,改善发酵条件等避免异质性的对策。
王洪海高卜渝陈佩丽董灵李育阳
关键词:酵母干扰素基因工程

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徐志南
作品数:207被引量:550H指数:13
供职机构:浙江大学
研究主题:大肠杆菌 生物合成 Γ-聚谷氨酸 发酵 丁酸
赖仞
作品数:283被引量:282H指数:10
供职机构:中国科学院昆明动物研究所
研究主题:基因 生物医学技术 多肽 生物医学领域 抗菌肽
李昌本
作品数:105被引量:349H指数:9
供职机构:复旦大学
研究主题:CDNA 大肠杆菌 肿瘤坏死因子 人肿瘤坏死因子 基因治疗
赵寿元
作品数:263被引量:588H指数:11
供职机构:复旦大学
研究主题:多肽 核苷酸序列 多核苷酸 制法 蛋白
徐明波
作品数:25被引量:117H指数:6
供职机构:北京双鹤药业股份有限公司
研究主题:纯化 热休克蛋白 折叠 集落刺激因子 基因工程产物