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重组大肠杆菌高效可溶表达司美格鲁肽9-37氨基肽及纯化方法: 本发明公开了重组大肠杆菌高效可溶表达司美格鲁肽9‑37氨基肽及纯化方法，属于基因工程技术领域。本发明通过优化融化蛋白mRNA折叠，减少发夹结构，实现融合蛋白在大肠杆菌中高效可溶表达。该融合蛋白带有SUMO标签、肠激酶切割...; 张荣珍饶志明黄润仪张艺玫

抗菌肽Cecropin A的可溶表达及快速纯化工艺研究: 2025年; 目的通过促溶标签和His tag实现抗菌肽Cecropin A在原核系统中的可溶表达和分离纯化,并评价其对铜绿假单胞菌的抗菌活性。方法将小分子泛素样修饰蛋白标签SUMO以及His tag与Cecropin A融合,构建pET30a(+)-His-SUMO-cecropin A表达载体,通过一步镍亲和层析捕获His-SUMO-cecropin A,经Ulp1酶切后再通过镍亲和层析流穿得到无氨基酸残留的Cecropin A,采用细菌生长浊度法评价Cecropin A对铜绿假单胞菌的活性。结果在BL21(DE3)和Transetta(DE3)感受态中均能表达His-SUMO-cecropin A蛋白,与SUMO标签融合成促进了Cecropin A在上清中的可溶表达。经两步镍亲和层析,可纯化得到0.447 mg·mL^(-1)的Cecropin A,3μmol·L^(-1)的Cecropin A与铜绿假单胞菌作用1 h后的ΔOD_(600)%为66.80%,Cecropin A对铜绿假单胞菌有抗菌活性。结论通过与His-SUMO标签融合,可提高抗菌肽Cecropin A的可溶性,有利于蛋白纯化,纯化的Cecropin A对铜绿假单胞菌有较好的抗菌活性。; 姚欣邹沛璇郑永祥余蓉; 关键词：天蚕素抗菌肽可溶表达 SUMO

重组白蛋白结合肽融合抗EGFR纳米抗体的原核可溶表达、纯化与表征: 2025年; 目的研究长效纳米抗体7D12与白蛋白结合肽融合蛋白(7D12-ABD)在原核体系内的可溶表达水平,并初步评价其活性。方法通过与SUMO促溶标签融合表达,构建白蛋白结合肽融合表皮生长因子受体(EGFR)纳米抗体7D12重组表达载体(pET-32a-His-SUMO-7D12-ABD),用镍亲和层析、疏水层析分离纯化7D12-ABD,采用基质辅助激光解吸飞行时间质谱、圆二色光谱和荧光光谱表征其结构,并通过与人血清白蛋白(HSA)和EGFR体外结合实验评价其活性。结果 7D12-ABD约80%以可溶形式存在于破菌上清液中,获得纯度>95%的融合蛋白。7D12-ABD的分子量和结构折叠正确,能与HSA按1:1结合,与EGFR结合的半数最大效应浓度为5.533 ng·mL^(-1)。结论通过SUMO标签可成功实现7D12-ABD在原核系统胞内的可溶表达;7D12-ABD在体外能与HSA和EGFR高效结合。; 张淑雯陈梓杰余蓉张纯; 关键词：表皮生长因子受体可溶表达层析纯化重组蛋白

一种重组BMP2、可溶表达方法及其应用: 本发明提供一种重组BMP2、可溶表达方法及其应用，将带有蛋白标签的重组人骨形态发生蛋白BMP2在工程菌株Escherichia coli BL21(DE3)中可溶表达并分离纯化，所述BMP2基因经过密码子优化，且该蛋白肽...; 易祥韩双艳柯博文赵风光

GⅡ.2[P16]型诺如病毒P蛋白的可溶表达、纯化及其抗原特性分析: 2024年; 目的获得可溶表达的GⅡ.2[P16]型诺如病毒(norovirus,NV)P蛋白,并分析其抗原特性。方法通过优化合成GⅡ.2[P16]型NV P蛋白基因并克隆至pET-28a(+)载体上,构建重组质粒GⅡ.2-NV-pET-28a,转化DH5α感受态细胞,通过对表达菌种的优化,使P蛋白以可溶性形式表达。表达的P蛋白经Ni-NTA亲和层析纯化后,采用Western blot法检测纯化蛋白抗原性;体积排阻高效液相色谱(size exclusion high performance liquid chromatography,SECHPLC)法检测抗原纯度;ELISA法鉴定抗原抗体结合能力。结果重组BL21 Star(DE3)pLySs工程菌目的蛋白以可溶形式高表达,经亲和层析纯化后,GⅡ.2 P蛋白纯度为95.53%,且抗原性较好。结论用原核表达菌种成功制备了可溶性表达的NV P蛋白,并明确了P蛋白的抗原性,为GⅡ.2[P16]型NV检测试剂盒和重组亚单位疫苗的研制奠定了基础。; 李攀刘术敏刘晓雅程英杰吴常伟黄恩启; 关键词：诺如病毒可溶性表达

可溶表达高酶活嗜盐生物来源蛋白的培养基与方法: 本发明提供了一种用于可溶表达高酶活嗜盐生物来源蛋白的培养基，以及通过所述的培养基可溶表达高酶活嗜盐生物来源蛋白的方法。本发明从嗜盐生物来源的7α‑羟基类固醇脱氢酶7A‑4的发酵体系入手，通过改变培养基中的离子种类、浓度以...; 岑宇科孟祥福张琳薛亚平郑裕国

一种高温诱导酮还原酶可溶表达的质粒及其应用: 本发明公开了一种高温诱导酮还原酶可溶表达的质粒及其应用。本发明公开的质粒的构建方法为从载体pBV220中获取温度诱导型双启动子pL/pR和Cits857调控原件的序列；接着将上述序列的3’端结合上逆向抗冻蛋白XXA的序列...; 请求不公布姓名

抗菌肽-裂解酶融合抗铜绿假单胞菌蛋白的可溶表达与活性评价: 2024年; 目的通过与促溶蛋白融合表达,分离、纯化获得抗菌融合蛋白,并初步评价其抗菌活性。方法将绵羊骨髓细胞抗菌肽SMAP29的N端与源自噬菌体JD010裂解酶LysPA26的C端融合设计新的抗菌蛋白(AL)。通过同源重组构建pCold-His-TF-AL表达质粒。通过Ni-亲和层析和阴离子交换层析分离纯化AL,采用平板计数法初步评价AL的抗铜绿假单胞菌活性。结果在E.coli BL21(DE3)中,质粒pCold-His-TF-AL能明显表达出抗菌蛋白AL,并且90%以上的AL为可溶形式分布于E.coli破菌液的上清液中。可分离纯化得到纯度超95%的AL。0.05 mg·mL^(-1) AL在30 min内可将铜绿假单胞菌PAO1菌量降低5.55个对数单位,具较高的抗菌活性。结论通过采用Trigger Factor标签融合表达和冷休克诱导方法可实现AL的高效可溶表达,纯化的AL对铜绿假单胞菌具有明显的抗菌活性。; 周俊秀姚欣郑永祥余蓉; 关键词：裂解酶可溶表达铜绿假单胞菌

一种酸稳定性和可溶表达量提高的羧肽酶A突变体: 本发明涉及酶工程技术领域，具体涉及一种酸稳定性和可溶表达量提高的羧肽酶A突变体。本发明通过计算机辅助设计，对现有牛胰腺羧肽酶A的氨基酸序列(PDB ID：1M4L)进行分子改造，获得突变体L203H。本发明制备的突变体L...; 梁志宏张真真张昊祥赵自通

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