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冠状病毒的反向遗传技术及其应用进展: 2024年; 近年来,由冠状病毒引起的疫病呈现频发、暴发和新发的趋势,造成人类和动物严重的呼吸和消化系统疾病,危害全球公共卫生安全和畜禽健康养殖。目前,对冠状病毒致病、跨种传播等机制的认识不足制约了抗冠状病毒药物和疫苗产品的研制。反向遗传操作技术可用于病毒蛋白功能和病毒致病、复制机制的解析,也是减毒、基因标记疫苗和抗病毒药物研发中不可或缺的技术工具。因冠状病毒因基因组较大、结构复杂,其反向遗传操作技术曾长期发展滞后,但是随着分子生物学手段的不断更新,多种新的构建策略应运而生。通过重点介绍冠状病毒反向遗传操作系统的构建策略及其在冠状病毒传播、致病机制、疫苗研发和药物筛选中的应用,为冠状病毒感染的防控提供有利的工具。; 梁纪元张钰灿侯锐锋张粤夏永豪袁晋祖少坡魏战勇; 关键词：冠状病毒感染性克隆

瘟病毒反向遗传技术的研究进展及应用: 2024年; 瘟病毒属于黄病毒科(Flaviviridae),核酸为单股正链RNA,基因组长12.3 kb。反向遗传技术是研究病毒蛋白功能的有力工具,已经成为研究瘟病毒属的有效途径。介绍了瘟病毒的基本特征,概述了瘟病毒反向遗传操作技术的建立和发展过程,综述了牛病毒腹泻病毒(BVDV)、猪瘟病毒(CSFV)及其他瘟病毒反向遗传操作系统的构建以及应用该技术取得的一些研究成果,并对该技术在瘟病毒研究领域的发展方向进行了展望,以期为瘟病毒属编码的蛋白质的功能、致病机制以及新型疫苗研发开辟新思路。; 韩鹏张亮王伟王明成郭亚男; 关键词：瘟病毒反向遗传技术病毒基因组

轮状病毒反向遗传技术建立及RotaTeq有效性和成本效益meta分析: 目的:建立轮状病毒SA11毒株的反向遗传学方法并进行探索,寻找外源基因插入位点无酶切位点分子克隆方法并表达,以及更加节省成本、方便快捷的分子克隆新方法;通过meta分析,对亚洲地区的国家使用五价轮状病毒疫苗(RotaTe...; 蔡昊; 关键词：轮状病毒有效性 META分析

完全基于质粒的轮状病毒反向遗传技术进展被引量：2: 2024年; 人轮状病毒(Rotavirus,RV)为双链RNA病毒,属于呼肠孤病毒科轮状病毒属,是全球5岁以下婴幼儿重症腹泻的主要病因。2017年,完全基于质粒的轮状病毒反向遗传技术获得成功,此后被不断改进。该技术可成功获得体外人工改造的特定表型的轮状病毒,促进和丰富了轮状病毒感染致病机制研究以及新一代轮状病毒疫苗、药物等干预手段的开发。本文将概述和比较已报道的不同轮状病毒反向遗传技术特征,以期推动我国轮状病毒反向遗传技术体系的建立,促进我国轮状病毒的科学研究及预防控制。; 余俊杰刘夏飞李杉段招军; 关键词：轮状病毒病毒感染

利用反向遗传技术产生表达外源基因的重组SA11轮状病毒: 2024年; 目的利用反向遗传技术产生NSP1基因插入和表达外源基因的重组SA11轮状病毒,构建可表达外源基因的轮状病毒载体。方法本研究将轮状病毒SA11株的NSP1基因片段的223位(5端)至1388位的核苷酸删除,并直接插入连接了终止-再启动元件(P2A)的增强绿色荧光蛋白(EGFP)基因,采用已建立的“12质粒”轮状病毒反向遗传系统拯救NSP1基因插入和表达EGFP的重组SA11轮状病毒。通过观察细胞病变效应和插入基因(EGFP)的荧光表达初步确定重组病毒的成功拯救,再结合电镜的形态学观察、RT-PCR的测序结果及病毒基因组的检测结果,进一步证明重组轮状病毒的成功拯救和传代扩增。利用TCID 50法和qRT-PCR法,测定了rSA11和rSA11/NSP1-EGFP的病毒滴度并绘制了基因组复制动力曲线。结果基于“12质粒系统”成功拯救了重组轮状病毒rSA11/NSP1-EGFP,证明NSP1片段截短并插入外源基因后病毒仍可正常复制,且具有良好的遗传稳定性,但病毒滴度低于其亲本株。结论基于NSP1基因插入和表达EGFP的重组轮状病毒能够实现稳定遗传,为利用反向遗传学构建表达外源基因的轮状病毒载体的深入探索提供了基础。; 柴萨萨蔡昊刘夏飞赵静宋敬东李金松裴银辉李利利段招军; 关键词：A组轮状病毒外源基因

鸡传染性支气管炎病毒反向遗传技术研究进展被引量：1: 2023年; 鸡传染性支气管炎是由鸡传染性支气管炎病毒(Infectious bronchitis virus,IBV)感染引起的鸡的一种急性、高度接触性传染性病。IBV基因组非常容易发生突变和重组,给该病防控带来巨大困难,因此高效疫苗和有效药物的研发非常重要。反向遗传技术是研究RNA病毒的重要技术。通过反向遗传技术可以在DNA分子水平定向改造病毒序列,对病毒的基因功能、致病机制以及新型疫苗进行研究。论文对构建IBV操作系统的策略、利用反向遗传技术研究IBV基因结构和功能、研发新型疫苗以及开发病毒载体的最新进展进行综述,为IBV及其他冠状病毒相关研究提供参考。; 晋英浩卢彦澎张桃妮林子学马燕磨美兰; 关键词：鸡传染性支气管炎病毒结构蛋白反向遗传技术新型疫苗

3种常发冠状病毒的反向遗传技术及应用进展: 2023年; 冠状病毒是一类引起动物和人类疾病的有包膜RNA病毒,可导致人和动物发病,危害严重,如严重急性呼吸综合征病毒、中东呼吸综合征病毒、新型冠状病毒等,尤其是2019年末暴发的新型冠状病毒更是呈现全球大流行,严重危害了人健康和阻滞了全球经济发展。而鸡传染性支气管炎病毒和猪流行性腹泻病毒则是2种常见的严重危害家禽和生猪养殖的病原。本文简述了新型冠状病毒、鸡传染性支气管炎病毒和猪流行性腹泻病毒3种冠状病毒的流行趋势,着重介绍了反向遗传学技术在这3种病毒研究中的应用现状,以期能为冠状病毒等单股正链RNA病毒的研究提供一定参考的意义。; 熊挺刘定祥陈瑞爱; 关键词：新型冠状病毒鸡传染性支气管炎病毒猪流行性腹泻病毒反向遗传学

利用反向遗传技术拯救猪圆环病毒3型和4型及其量子点标记: 猪圆环病毒（Porcinecircovirus，PCV）是一种无包膜的DNA病毒，直径大约为20纳米，属于圆环病毒科圆环病毒属。该病毒包括PCV1到PCV4四种基因型，其中PCV3和PCV4是近年来新鉴定的基因型。然而，...; 牛谷雨; 关键词：猪圆环病毒反向遗传学感染性克隆量子点 CAP蛋白

塞内卡病毒A反向遗传技术及其应用: 2023年; 塞内卡病毒A(SVA)是引起猪口鼻部、蹄冠部水疱样病变,甚至引起新生仔猪急性死亡的新发病毒。SVA是无囊膜的单股、正链RNA病毒,由于其基因组不断发生重组和进化,因此给养猪业造成较大的经济损失。反向遗传作为一种从基因入手开展体外遗传学研究的技术,能够在病毒cDNA分子水平上进行基因定向改造,进而借助宿主细胞实现病毒复制、翻译、包装和拯救的目的,最终研究重组病毒的生物学特性。本文就SVA反向遗传技术的研究及其应用进行综合评述,以期为进一步探究SVA复制、表达、调控等分子机制提供思路。; 王奇李紫薇沙洲尼博刘拂晓; 关键词：CDNA克隆病毒拯救

反向遗传技术在冷适应流感病毒疫苗株制备中的应用研究: 疫苗接种是防治流感疾病发生和流行最有效的一种手段。目前国际上广泛应用的流感疫苗包括裂解疫苗、亚单位疫苗和减毒活疫苗。与传统的灭活疫苗相比,减毒活疫苗采用冷适应流感减毒株制成,通过鼻粘膜途径免疫,具有易于大规模接种和模拟自...; 郭航炜; 关键词：反向遗传学减毒活疫苗流感病毒疫苗株冷适应

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