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单纯 疱疹病毒 2 型 ICP2 7_(377-513)核酸疫苗联合IL-15核酸疫苗免疫效果的观察2024年 目的构建表达单纯 疱疹病毒 2 型 感染细胞蛋白2 7(infected cells protein 2 7,ICP2 7)的重组质粒pcDNA3.1-ICP2 7377-513并观察白细胞介素(IL)-15核酸疫苗联合HSV-2 -ICP2 7377-513核酸疫苗的免疫效果。方法采用分子克隆技术构建pcDNA3.1-ICP2 7377-513重组质粒。将BALB/c雌性小鼠随机分为pcDNA3.1-ICP2 7377-513联合pcDNA3.1-IL-15(pIL-15)组、pcDNA3.1-ICP2 7377-513组、pcDNA3.1组和pIL-15组,共免疫3次,每次间隔2 周。末次免疫后2 8 d取血,用微量中和实验法检测血清中特异性中和抗体,ELISA法检测血清中IL-4、IL-2 和干扰素-γ(IFN-γ)水平。阴道给予致死量HSV-2 攻击小鼠,分别于接种后3 d、7 d和14 d收集阴道冲洗液,用荧光定量PCR法检测生殖道{2 }载量。结果pcDNA3.1-ICP2 7377-513联合pIL-15组和pcDNA3.1-ICP2 7377-513组中和抗体效价分别为40.00±8.16、2 8.67±4.47,但两组间差异无统计学意义(P>0.05)。pcDNA3.1-ICP2 7377-513联合pIL-15组IFN-γ、IL-4水平明显高于pcDNA3.1-ICP2 7377-513组(P<0.05),但IL-2 水平两组间差异无统计学意义(P>0.05)。阴道给予致死量HSV-2 攻击后,pcDNA3.1-ICP2 7377-513联合pIL-15组和pcDNA3.1-ICP2 7377-513组小鼠阴道冲洗液中{2 }载量随着时间延长逐渐减低,pcDNA3.1-ICP2 7377-513联合pIL-15组和pcDNA3.1-ICP2 7377-513组相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论IL-15核酸疫苗联合HSV-2 -ICP2 7377-513核酸疫苗对小鼠有较好的免疫保护作用。 韩小艳 吴振村 周艳 贾凤珍 王晨红关键词:单纯疱疹病毒2型 白细胞介素15 核酸疫苗 单纯 疱疹病毒 2 型 包膜糖蛋白gD和gB mRNA疫苗构建及免疫学评价 邴佳洛海洋来源硫酸多糖体外抗单纯 疱疹病毒 2 型 研究 2024年 目的对海洋来源硫酸多糖(SPM)进行体外抗单纯 疱疹病毒 2 型 (HSV-2 )活性研究。方法利用细胞病变效应(CPE)抑制实验、Western blot实验和MTT法对其体外抗HSV-2 活性和细胞毒性进行评价,通过Western blot实验对其具体作用方式以及吸附后具体作用时间进行探究。利用空斑减少、膜融合抑制和RT-PCR实验对其初步靶点进行探究。结果SPM具有良好的体外抗HSV-2 活性,其在Vero细胞中的半抑制浓度(IC_(50))为(16.1±1.8)μg/mL,选择性指数(SI)值大于62 .1。具体作用方式及吸附后具体作用阶段探究结果表明,SPM可以与{2 }直接相互作用,还可以影响{2 }的吸附、内吞以及增殖,发挥抗HSV-2 作用。结论SPM具有良好的体外抗HSV-2 活性,具有高效低毒的特点,与现有的抗单纯 疱疹病毒 药物作用机制不同,为疱疹病毒 感染的预防和治疗提供了新的研究思路和药物研发方向。 闫涵 杨佳依 许中秋 王世欣 王伟关键词:抗单纯疱疹病毒 灭活病毒 病毒增殖 生殖器单纯 疱疹病毒 2 型 感染患者Th1/Th2 及相关细胞因子表达与预后复发的相关性研究 被引量:3 2022年 目的 研究生殖器单纯 疱疹病毒 2 型 (HSV-Ⅱ)感染患者辅助T细胞(Th)1/Th2 及相关细胞因子表达与预后复发的相关性。方法 选取2 02 0年8月至2 02 1年1月深圳市龙岗区第三人民医院收治的70例因HSV-Ⅱ感染的生殖器{2 }(GH)患者,均行临床规范化治疗。随访6个月,根据临床诊断结果将患者分为复发组、未复发组,检测患者皮损部位血液Th1、Th2 及白介素(IL)-2 、IL-10水平,Logistic回归分析法明确影响HSV-Ⅱ感染GH患者预后复发的危险因素,Pearson相关性分析法评估Th1/Th2 及相关细胞因子与HSV-Ⅱ感染GH患者预后复发的相关性。结果 复发组2 4例,未复发组46例。与未复发组比较,复发组已婚率、合并其他性病率均较高,Th1/Th2 、IL-2 /IL-10均较低,差异具有统计学意义(P<0.05)。Logistic回归分析结果显示,已婚、合并其他性病、Th1/Th2 、IL-2 /IL-10是影响HSV-Ⅱ感染GH患者预后复发的危险因素。Pearson相关性分析结果显示,Th1/Th2 、IL-2 /IL-10与HSV-Ⅱ感染GH患者预后复发均呈负相关(r=-0.614、-0.577,P<0.001)。结论 HSV-Ⅱ感染GH复发患者Th1/Th2 、IL-2 /IL-10均较低,Th1/Th2 失衡可能在HSV-Ⅱ感染GH患者预后复发机制中具有重要作用。 胡雯 叶冬晴 易恒安关键词:生殖器疱疹 单纯疱疹病毒2型 单纯 疱疹病毒 2 型 衣壳支架蛋白ICP35原核表达载体的构建及其表达特性分析2022年 本研究旨在构建单纯 疱疹病毒 2 型 (herpes simplex virus type 2 ,HSV-2 )衣壳支架蛋白ICP35的原核表达载体,并分析其在HSV-2 增殖中的表达特性。以HSV-2 基因组DNA为模板,采用聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)扩增HSV-2 ICP35的编码基因UL2 6.5,并克隆至原核表达载体pET-32 a(+),转化大肠埃希菌BL2 1(DE3)进行诱导表达,将纯化的重组ICP35免疫家兔后获得抗体,采用免疫荧光检测ICP35在HSV-2 增殖中的表达特性。结果显示,HSV-2 UL2 6.5基因的PCR产物大小约为1065 bp,原核表达重组蛋白的相对分子质量约为6.3×10^(4),免疫家兔的血清抗体可特异性识别HSV-2 ICP35。免疫荧光检测结果显示,HSV-2 ICP35可在感染后8 h出现于细胞核周围,12 h表达量进一步增加并向细胞核内聚集,16 h后在细胞核、细胞质内均可检测到聚集成斑点状的衣壳支架蛋白。结果表明,HSV-2 ICP35原核表达载体的成功构建及对其在HSV-2 增殖中表达特性的分析,将为研究UL2 6.5基因的功能、蛋白相互作用、{2 }与宿主的相互作用及筛选药物靶标等奠定基础。 王建斌 李雪琦 王丽春 吴化叶 程继帅 牟唐维 李琦涵关键词:单纯疱疹病毒2型 原核表达载体 单纯 疱疹病毒 2 型 糖蛋白D和CCL19佐剂融合重组DNA疫苗对小鼠的免疫保护效果2022年 目的通过比较简单混合和融合重组的单纯 疱疹病毒 2 型 糖蛋白D(herpes simplex virus type 2 glycoprotein D,HSV-2 gD)联合分子佐剂CCL19的DNA疫苗对免疫小鼠的免疫应答及免疫保护效果的差异,揭示融合重组疫苗的保护作用。方法利用基因重组技术构建HSV-2 gD和CCL19单独表达及融合表达的DNA疫苗,经测序、Western blot和ELISA验证后,肌肉注射免疫BALB/c小鼠两次,免疫后定期收集血清和阴道灌洗液,分离免疫后的脾细胞、肠系膜淋巴结细胞及直肠组织。通过终点法ELISA、体外中和试验、免疫组织化学染色、趋化试验、阴道攻毒试验、荧光定量PCR、称量体重及观察疾病严重程度,比较两种形式的疫苗免疫后小鼠的体液免疫、细胞免疫应答和免疫保护作用的差异。结果融合重组的pgD-IZ-CCL19质粒可在体外正常表达gD蛋白和CCL19蛋白,但pCCL19-IZ-gD质粒的CCL19蛋白表达量比pgD-IZ-CCL19少。免疫pgD-IZ-CCL19的小鼠能产生比pgD+pCCL19组更高水平的血清IgG抗体、阴道灌洗液IgA抗体(P<0.01)和中和能力。与其他组比较,pgD-IZ-CCL19组小鼠免疫后直肠黏膜、脾脏和肠系膜淋巴结均招募了较多的淋巴细胞,攻毒后该组小鼠未出现体重减少和疾病症状,阴道黏膜HSV-2 检出率最低,小鼠死亡率也最低,而pCCL19-IZ-gD组的免疫保护无效。结论pgD-IZ-CCL19融合重组的DNA疫苗能诱导小鼠产生较强的免疫应答和免疫保护作用,免疫保护效果优于简单混合DNA疫苗。 阎岩 胡勤学 Davgadorj Chantsalmaa 王旭关键词:单纯疱疹病毒2型 糖蛋白D CCL19 免疫保护 单纯 疱疹病毒 2 型 糖蛋白D和CCL2 8佐剂双顺反子重组DNA疫苗对小鼠的免疫保护效果被引量:1 2022年 目的研究内部核糖体进入位点(internal ribosome entry site,IRES)序列连接"抗原-佐剂"的单纯 疱疹病毒 2 型 (herpes simplex virus type 2 ,HSV-2 )DNA疫苗对免疫小鼠的保护作用。方法利用IRES重组构建HSV-2 包膜糖蛋白D(glycoprotein D,gD)和CCL2 8佐剂双表达DNA疫苗pgD-IRES-CCL2 8和pCCL2 8-IRES-gD,经测序验证,肌肉注射免疫BALB/c小鼠2 次后,定期收集小鼠的血清和阴道灌洗液样品,分离免疫后的脾细胞、肠系膜淋巴结细胞和直肠黏膜组织。通过终点ELISA法检测免疫后小鼠的抗原特异性抗体滴度,采用体外中和试验检测免疫后及攻毒后血清和阴道灌洗液中的中和抗体滴度,采用脾细胞和肠系膜淋巴结细胞趋化试验和直肠组织的免疫组织化学染色检测组织和器官内的CCL2 8响应性免疫细胞变化。对免疫后小鼠进行阴道攻毒试验,采用荧光定量PCR、称量体重及观察疾病严重程度的方法评估各组小鼠抵抗{2 }感染的能力。通过与1∶1混合的单独表达gD和CCL2 8的DNA疫苗(pgD+pCCL2 8)的免疫保护效果比较,分析IRES双表达DNA疫苗诱导的小鼠体液免疫和细胞免疫应答水平,以及免疫保护效果。结果pCCL2 8-IRES-gD免疫小鼠后可产生与pgD+pCCL2 8组相似的血清IgG滴度、阴道灌洗液IgA抗体滴度,以及较高的抗体中和能力、直肠黏膜IgA+浆细胞和黏膜组织内CCL2 8响应性免疫细胞,攻毒后血清中和抗体出现较晚,但小鼠未出现体重减轻、疾病症状和死亡。但pgD+pcDNA3.1和pgD-IRES-CCL2 8对小鼠的免疫保护无效。结论pCCL2 8-IRES-gD双表达DNA疫苗可诱导小鼠产生较强的黏膜免疫应答,有较强的免疫保护作用。 阎岩 胡勤学 付明 Davgadorj Chantsalmaa关键词:单纯疱疹病毒2型 糖蛋白D 内部核糖体进入位点 免疫保护 截短型 单纯 疱疹病毒 2 型 糖蛋白G 本发明涉及一种包含HSV‑2 蛋白的截短形式mg G‑2 的蛋白,所述蛋白包含:(i)至少2 85个氨基酸的mg G‑2 的胞外区(EX‑mg G‑2 )或其截短形式;所述胞外区或其截短形式与存在于SEQ ID NO:3中的相应长... 贾恩-阿克·里杰奎斯特深圳市男男性行为者HIV、梅毒及单纯 疱疹病毒 2 型 的感染现状及其影响因素 被引量:4 2021年 目的了解深圳市男男性行为者(men who have sex with men,MSM)HIV、梅毒及单纯 疱疹病毒 2 型 (herpes simplex type 2 virus,HSV-2 )的流行特征,为深圳市男男性行为人群艾滋病以及其他性病的防控提供依据。方法采用时间场所抽样方法招募2 018年5月18日至12 月2 9日在桑拿、会所等场所经常活动的MSM,进行面对面匿名问卷调查并抽血检测。结果共调查344例研究对象,其中HIV感染率为8.7%,梅毒感染率为14.8%,HSV-2 感染率为14.0%。不同年龄组间MSM HIV、梅毒、HSV-2 的感染率比较差异均有统计学意义(P<0.05);不同婚姻状况的MSM梅毒感染率比较差异具有统计学意义(P<0.05);不同文化程度的MSM HSV-2 感染率差异比较也有统计学意义(P<0.05)。结论深圳市MSM HIV、梅毒及HSV-2 感染情况较严重,应加强对该人群特别是年龄较高、文化程度较低者进行相关知识的宣传教育、行为干预及疾病的诊断和治疗。 毛莎莎 赵锦 奉水东 郑陈丽 胡维 李浩 杨峥嵘关键词:男男性行为者 HIV 梅毒 单纯疱疹病毒2型 单纯 疱疹病毒 2 型 结构的生物学功能分析2021年 单纯 疱疹病毒 2 型 (herpes simplex virus 2 ,HSV-2 )是引起全球生殖器溃疡疾病的主要病原体之一。HSV-2 {2 }基因组庞大、结构复杂、编码蛋白种类繁多,这些蛋白分子不仅在机体免疫系统中作为{2 }抗原参与宿主天然和适应性免疫过程,也能够作为结构分子和功能分子参与{2 }的复制和宿主细胞的病理性反应。因此对该{2 }结构的认识需要对其进行分子生物学方面的分析,通过对其结构的认识来探索编码{2 }的不同蛋白分子在感染过程中的分子生物学动态,以期对研究{2 }所引起的免疫识别及应答机制在抗{2 }免疫反应提供重要的线索和依据。本文就HSV-2 {2 }结构的分子生物学功能特征研究进展做一综述和展望。 段素琴 李琦涵关键词:单纯疱疹病毒2型 病毒 蛋白分子
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