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基于图像识别的大鼠动情周期判断方法
本发明涉及图像识别判断技术领域,尤其涉及基于图像识别的大鼠动情周期判断方法。其技术方案包括样本采集与准备、图像采集与优化、细胞分割与定位、特征提取与分析、细胞分类与识别、结果验证与反馈。本发明通过系统且精细的操作,显著提...
孔诚诚王芬袁亚美程婧胡灿灿陈青青
基于转录组探索小鼠下丘脑--垂体--卵巢轴对动情周期的调控
孙健
快速革兰氏染色法对大、小鼠动情周期的鉴别被引量:5
2023年
目的通过快速革兰氏染色法分别对SD雌性大鼠、C57BL/6J雌性小鼠进行阴道涂片染色,镜下观察细胞形态,为快速鉴别动情周期寻求简单易行的染色方法。方法12只SD雌性大鼠和12只C57BL/6J雌性小鼠,56~62日龄,每天9:00采用阴道拭子法获得阴道涂片,干燥后进行快速革兰氏染色法,连续观察12 d,于光镜下观察细胞形态,判断其动情周期阶段。结果快速革兰氏染色法用时较短,操作简单,观察视野色彩鲜明,背景干净,绘制完整的大、小鼠动情周期变化图。结论快速革兰氏染色法可简单、直观的判断大、小鼠动情周期,并优化染色步骤,对染色中出现的异常情况进行逐一分析,将每张涂片染色时间缩短至1 min以内,对实验新手易于掌握,可推广应用。
张蕾张若乾秦秀云李宏林张建伟
关键词:动情周期阴道涂片SD大鼠C57BL/6J小鼠
不同阴道涂片方法的比较及对大鼠动情周期的判断被引量:1
2023年
目的比较棉棒法和灌洗法两种阴道涂片方法的操作及对雌性大鼠动情周期的判断。方法30只雌性SD大鼠,连续每日同一时间使用棉棒法或灌洗法进行阴道分泌物的采集和涂片制作,显微镜下放大40/100/200/400倍进行观察并拍照。结果棉棒法涂片肉眼可见大量脱落细胞,镜下见较多有核上皮细胞,判断为动情前期,大量角化上皮细胞呈落叶状堆积为动情期,涂片清亮和上皮细胞数量较少则为动情后期或间期;棉棒法涂片时白细胞的数量减少,不利于区分判断动情后期或间期,同时难以保证棉棒上的沾取物完整且均匀地涂抹到载玻片上。灌洗法涂片时,镜下观察到大量白细胞为动情后期或间期,与棉棒法相比,各种细胞分布均匀形状保持完整,对周期的判断区分更容易,更准确。结论两种方法均较简单,制作涂片和观察所耗时间短,可快速区分动情周期各阶段,且结果准确实用性强,灌洗法可较好还原阴道细胞学检查中的细胞形态和数量分布,是一种可以判断大鼠动情周期各阶段的良好实验技术。
陈思充陈子豪高青华郝丽英
关键词:阴道涂片动情周期
高效氯氰菊酯和甲维盐联合染毒大鼠生殖激素分泌及动情周期的变化
2023年
[背景]高效氯氰菊酯与甲维盐广泛应用于温室种植业中的虫害防治,两者共同暴露可增加其在生物体内的蓄积,对人体健康产生影响。[目的]基于下丘脑-垂体-卵巢(HPO)轴中生殖激素水平的变化探讨高效氯氰菊酯和甲维盐联合染毒对雌鼠动情周期的影响。[方法]24只健康成年SD大鼠随机分为空白对照组、高效氯氰菊酯组(Beta-CYP,剂量为53 mg·m^(-3))、甲维盐组(EMB,剂量为8 mg·m^(-3))、高效氯氰菊酯与甲维盐联合染毒组(BetaCYP+EMB,剂量为53 mg·m^(-3)+8 mg·m^(-3)),每组6只,每周雾化吸入6 d,连续13周。染毒过程中实时观察大鼠一般状况,在染毒第12周开始对大鼠进行为期10 d的生殖道涂片,观察其动情周期。染毒结束后第2天处死大鼠,取卵巢组织进行HE染色,观察组织病理学变化。ELISA法检测大鼠血清促性腺激素释放激素(Gn RH)、卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、雌二醇(E2)水平。实验结果均以均数±标准差(x±s)表示;多组间比较采用单因素方差分析,组间的两两比较用LSD检验法。检验水准α=0.05。[结果]染毒4周后,Beta-CYP组与Beta-CYP+EMB组大鼠表现持续亢奋,易激,EMB组出现精神欠佳、活动减少、反应迟缓症状,而对照组大鼠无异常。到染毒的第90天,对照组大鼠体重升至(314.51±2.44)g,Beta-CYP+EMB组大鼠体重仅升至(253.47±1.50)g。对照组大鼠各类细胞形态无异常变化,Beta-CYP组、EMB组以及Beta-CYP+EMB组大鼠均出现体积较小的深染核,Beta-CYP+EMB组大鼠角化上皮细胞形态发育异常。与对照组大鼠的动情周期[(97.83±4.17)h]相比,Beta-CYP组与EMB组大鼠动情周期分别延长至(134.33±7.53)h、(126.50±5.28)h,Beta-CYP+EMB组大鼠动情周期延长至(156.00±6.66)h。方差分析结果表明,Beta-CYP+EMB组大鼠动情间期阴道涂片中白细胞(527.17±15.83)、角化上皮细胞(35.67±4.32)、未角化上皮细胞(70.50±4.51)的细胞数相比于对照组(分别为752.50±2
何先知李雨昕李嘉敏孙宾李媛媛翟庆峰
关键词:高效氯氰菊酯甲维盐联合染毒动情周期
基于EfficinetNet的大鼠动情周期确定方法
本发明公开了基于EfficinetNet的大鼠动情周期确定方法,包括:采集图片,获得数据集;将数据集归一化处理,得到EfficinetNet特征集;按照7:1:2划分数据集,引入交叉熵损失函数,分别生成训练集、验证集和测...
赵淑云 蒲小娣 周桦
小鼠动情周期卵巢、子宫及输卵管中氧化应激水平及意义
2021年
目的探讨小鼠动情周期不同阶段氧化应激(OS)的变化规律及对雌性生殖的作用。方法应用ELISA方法检测动情周期各阶段血清中的丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)、8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)及超氧化物歧化酶(SOD),应用免疫组化方法检测DNA修复蛋白8-羟基鸟嘌呤DNA糖苷酶1(OGG1)及超氧化物歧化酶1(SOD1)在动情周期各阶段输卵管和子宫角中的表达定位,实时荧光定量(PCR)及Western blot检测动情周期各阶段卵巢和子宫角中的OGG1及SOD1基因及蛋白表达水平。结果ELISA结果显示,动情期血清MDA和8-OHdG高于间情期、动情后期及动情前期(P均<0.05),动情前期血清GSH高于动情期、动情后期及间情期(P均<0.05),但是血清总SOD水平在动情周期四个阶段间差异无统计学意义(P均>0.05);PCR和Western blot结果显示,动情期卵巢和子宫角中的SOD1和OGG1 mRNA和蛋白水平低于间情期(P均<0.05),而免疫组化结果显示:OGG1和SOD1蛋白主要定位于子宫内膜腔上皮和腺上皮细胞,定位于输卵管上皮细胞,且SOD1和OGG1在动情期的输卵管中高表达。结论动情周期中OS水平的动态变化提示OS可能参与雌性生殖,特别是排卵、受精过程,且与动情周期雌孕激素的变化密切相关。
杨延周陈敏慧李可可
关键词:氧化应激活性氧动情周期卵巢子宫输卵管
小鼠动情周期内雌孕激素波动与皮层及海马δ-亚基的突触外γ-氨基丁酸A型受体表达的相关性被引量:2
2021年
目的探讨雌性小鼠动情周期不同阶段血清孕酮浓度与大脑皮质和海马中含δ-亚基的突触外γ-氨基丁酸A型受体(δGABA;Rs)表达的相关性。方法动情间期和动情期成熟卵巢周期雌性小鼠(4~6周,n=12)血清雌激素和孕酮浓度采用ELISA试剂盒检测;动情间期和动情期大脑皮层和海马中δGABA;Rs表达采用免疫组织化学方法检测。结果在动情间期,皮层和海马δGABA;Rs表达明显高于动情期,血清孕酮的浓度与δGABA;Rs的积分吸光度值成线性关系。结论动情期不同阶段孕酮的生理波动会影响δGABA;Rs在海马及皮层等特定脑区的表达,而海马神经元δGABA;Rs表达的差异会影响脑区神经元的兴奋度,从而可能影响雌性动物的行为特性。
郑小敏郑小敏卜超志黄璐黄璐叶扬张怡璇任勇威江世文
关键词:动情周期皮层海马小鼠
miR-92a-3p和miR-25-3p海绵上调Kiss1并影响雌性小鼠的青春期启动及动情周期被引量:2
2021年
下丘脑Kiss1神经元产生的神经肽kisspeptin通过影响促性腺激素释放激素的分泌,参与青春期的启动、生殖系统的成熟以及排卵等过程的神经内分泌调节。Kiss1基因的表达受到包括多种反式调控因子及表观遗传的调控。预测与前期研究表明,miR-92a-3p、miR-25-3p的种子序列能够与Kiss1的3′-UTR直接结合,抑制Kiss1的表达。为进一步研究miR-92a-3p、miR-25-3p在Kiss1表达调控中的作用,本研究分别构建了对miR-92a-3p、miR-25-3p具有抑制作用的特异性吸附海绵载体:sponge-miR-92a和sponge-miR-25,以实现miRNA的功能缺失。流式细胞术和双荧光素酶报告基因系统分别证实,这2个海绵载体均能够非常有效地吸附外源性或内源性靶miRNA。sponge-miR-92a和sponge-miR-25载体被进一步包装成慢病毒LV-sponge-miR-92a和LV-sponge-miR-25。实时荧光定量PCR结果显示,经LV-sponge-miR-92a和LV-sponge-miR-25感染的下丘脑原代神经元细胞中,Kiss1表达水平均显著上调(P<0.05);将LV-sponge-miR-92a注射到下丘脑后,雌性小鼠阴门开启时间明显提前(P<0.05);下丘脑注射LV-sponge-miR-92a和LV-sponge-miR-25扰乱了雌性小鼠的正常动情周期。综上所述,成功构建了能够有效吸附miR-92a-3p、miR-25-3p的海绵载体,证明它们在解除miR-92a-3p、miR-25-3p对Kiss1的抑制中的作用,下丘脑注射海绵对雌性小鼠的阴门开启时间和动情周期均产生一定程度的影响,提示miR-92a-3p、miR-25-3p可能在青春期的启动和生殖成熟过程中发挥重要的作用。
陈佳贤李晓宁王欣肖君华李凯周宇荀
关键词:性发育
模拟高原间断缺氧暴露对雌性大鼠动情周期的影响被引量:2
2020年
目的探讨模拟高原间断低氧暴露对雌性大鼠动情周期的影响。方法健康雌性SD大鼠适应性喂养5 d后随机分为两组,每组11只,分别为(1)正常对照组:在标准温湿度条件下饲养;(2)低氧暴露组:每天于低压舱进行8 h模拟高度为6000 m的低氧暴露。实验周期为4周,实验期间动物自由摄食饮水,每天记录摄食量,每周称量2次体质量,计算低氧暴露对雌性大鼠体质量及摄食量的影响;采取脏器质量/体质量计算低氧暴露对雌性大鼠重要脏器系数的影响;阴道脱落细胞形态变化(2次/d)观察大鼠动情周期的变化情况;放免法(radioimmunoassay,RIA)检测血清性激素水平;分别采用二硫代二硝基苯甲酸(dithiobisnitrobenzoicacid,DTNB)法、羟胺法和硫代巴比妥酸(thiobarbituric acid,TBA)法检测血清谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性以及血清丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量。结果与正常对照组相比,低氧暴露7 d内大鼠摄食量显著降低,低氧暴露10 d内大鼠体质量显著降低;脏器系数结果表明低氧暴露可导致雌性大鼠肾脏、肝脏、脾脏系数显著升高,但对雌性大鼠子宫、卵巢系数无显著影响;阴道脱落细胞形态分析结果显示低氧暴露显著导致雌性大鼠动情期和动情后期的延长以及动情间期的缩短;血清性激素结果显示低氧暴露导致雌性大鼠血清孕酮(progesterone,P)和促黄体生成素(luteinizing hormone,LH)水平显著降低;血清氧化抗氧化指标结果显示,与正常对照组相比,低氧暴露组血清GSH-Px、SOD活性显著降低,MDA含量显著升高。结论低氧暴露可显著导致雌性大鼠动情周期紊乱,这可能与机体氧化和抗氧化能力失衡有关。
蒲玲玲邓炳楠徐洪宝王新兴王天辉段瑞峰陈照立刘伟丽
关键词:低氧动情周期氧化应激

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徐永平
作品数:142被引量:210H指数:7
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研究主题:大鼠子宫 子宫 免疫组织化学SP法 动情周期 SD大鼠
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