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农杆菌介导的诱导基因水稻遗传转化体系的建立被引量:5
2020年
利用农杆菌介导技术,以Bar基因为筛选标记,用高山离子芥的诱导基因Cbcor15a侵染水稻品种日本晴的愈伤组织,经分化诱导后获得了再生植株。经Cef和PPT筛选,共获得转化Cbcor15a基因的日本晴再生苗9株;经PCR检测和Basta涂抹实验,结果证明有6株再生苗呈阳性。本遗传转化体系的建立可为利用转Cbcor15a基因选育具有耐性的水稻新品种提供参考。
崔永祯赵红黄格郑爱清李社萍李鸣
关键词:水稻农杆菌介导法冷诱导基因遗传转化体系
柑橘诱导基因低温响应及转化柠檬
本课题组已经从耐寒性柑橘枳中克隆获得一个与低温锻炼有关的基因,并将其命名为Ptcor8。同时发现该基因在金柑、柠檬等柑橘种类中具有高度同源性,而且该同源基因表达与柑橘抗寒能力大小呈现相同趋势,枳最耐寒,能耐受-26℃低温...
姜航
关键词:柑橘荧光
冰岛虞美人(Papaver nudicaule)不同品种耐寒性评价及其诱导基因PnDREB1的克隆
本试验以冰岛虞美人不同品种为实验材料,研究人工模拟低温对植株叶片形态及生理、生化指标的影响,采用主成分分析法和隶属函数法对其耐寒性进行综合评价。同时根据其他植物中已知诱导转录因子DREB1的保守序列,设计引物,从冰岛虞...
何姣
关键词:冷诱导基因基因克隆
柑橘诱导基因及其启动子表达载体构建与瞬时表达分析被引量:3
2015年
【目的】以YFP为报告基因,构建柑橘诱导基因及其启动子的植物表达载体。【方法】克隆获得枳诱导基因Ptcor8及其启动子p Ptcor8,柠檬中同源基因Clcor8及其启动子p Clcor8;双酶切含启动子的克隆载体和植物表达原始载体p1D4,连接获得含启动子的中间载体;再双酶切含诱导基因的克隆载体和中间载体,连接后获得重组质粒;通过冻融法将重组质粒导入农杆菌EHA105中。【结果】构建了p1D4/p Ptcor8-Ptcor8::YFP,p1D4/p Ptcor8-Clcor8::YFP和p1D4/p Clcor8-Ptcor8::YFP 3个融合表达载体,瞬时表达发现3个融合基因均可在冰糖橙叶片中表达。【结论】3个融合表达载体的成功构建为下一步转化柠檬,分析枳诱导基因Ptcor8及其启动子p Ptcor8的功能奠定了基础。
周潇姜航屈汉金邓子牛A.Gentile龙桂友
关键词:柑橘低温诱导基因
诱导基因转录因子CBF1转入黄瓜的研究
从抗性强的黄瓜基因组DNA中扩增并克隆了诱导转录因子CBF1基因,将其与CaMV 35S启动子和Nos终止子融合后构建成植物表达载体pROK2-CBF1.通过花粉管通道法转化黄瓜植株,获得了具有卡那霉素抗性的黄瓜再生...
谭克赵福顺吴慧杰宋述尧
关键词:黄瓜
诱导基因转录因子CBF1转入黄瓜的研究被引量:5
2015年
以抗性强的黄瓜"山东5号"为试材,研究诱导转录因子CBF1基因对黄瓜抗性的影响。从"山东5号"黄瓜基因组DNA中扩增并克隆了诱导转录因子CBF1基因,将其与CaMV 35S启动子和Nos终止子融合后构建成植物表达载体pROK2-CBF1。通过花粉管通道法转化黄瓜植株,获得了具有卡那霉素抗性的黄瓜再生植株。结果表明:CBF1基因已整合到黄瓜基因组中,转基因植株胁迫期间可溶性糖含量、幼苗含水量显著高于对照;MDA含量、叶片电解质渗透率显著低于对照,黄瓜已具备了较强抗性。
谭克赵福顺吴慧杰宋述尧
关键词:抗冷黄瓜
诱导基因转化柠檬的研究
将包含载体pPtcor::8Ptcor8::YFP的农杆菌EHA 105转入到不抗寒的柠檬中,并对转化体系进行了优化.研究结果表明,再生培养基中的6-BA的浓度,卡那霉素(Kan)浓度以及除草剂(Basra)的浓度对柠檬...
姜航胡威屈汉金周潇张凤邓子牛龙桂友
关键词:尤力克柠檬农杆菌介导法基因转化
诱导基因转化柠檬的研究
2015年
将包含载体p Ptcor∷8Ptcor8∷YFP的农杆菌EHA105转入到不抗寒的柠檬中,并对转化体系进行了优化。研究结果表明,再生培养基中的6-BA的浓度,卡那霉素(Kan)浓度以及除草剂(Basta)的浓度对柠檬的转化效率有明显影响;再生培养基配方为MT+0.5 mg/L 6-BA,添加75 mg/L kan或10 mg/L Basta时能够有效筛选到抗性芽,并获得了3株转基因柠檬植株,YFP阳性率为3.6%。
姜航胡威屈汉金周潇张凤邓子牛龙桂友
关键词:尤力克柠檬农杆菌介导
扁蓿豆诱导基因差异表达分析被引量:7
2013年
以直立型扁蓿豆幼苗为试验材料,采用cDNA-AFLP技术分析扁蓿豆在低温胁迫诱导下的基因表达差异。结果显示,利用筛选的64对引物组合,对0℃低温处理3~5叶期扁蓿豆幼苗的叶片cDNA进行扩增,共获得549条差异表达的转录衍生片段(TDFs)。选取上调表达较好的43条片段进行克隆、测序、Blastx比对和功能分析,其中32个TDFs的蛋白序列与基础代谢、信号转导、转录因子、防御等功能有关,11个TDFs为假设蛋白、未知蛋白或没有找到一致序列。利用荧光定量PCR对3种不同上调表达差异片段进行验证,结果可从数值上更准确地显示差异片段在低温胁迫过程中的相对表达量。
张宇石凤翎云娜高霞伊风艳蔡丽艳
关键词:扁蓿豆CDNA-AFLP
扁蓿豆诱导基因转录差异cDNA-AFLP反应体系的构建被引量:4
2013年
以0℃低温处理3~5叶期扁蓿豆的幼苗嫩叶为试验材料,对影响其cDNA-AFLP反应体系的各个关键因子进行探讨和优化,建立适宜的扁蓿豆cDNA-AFLP扩增体系,并对扁蓿豆诱导的差异表达进行检测。结果表明,利用MseⅠ/EcoRⅠ分步酶切连接,以4μl稀释20倍的预扩产物作为模板、1.6μl dNTP、0.4μlTaq DNA酶、2μl10×PCR Buffer获得的选择性扩增效果较好,条带清晰稳定。应用该反应体系扩增出的扁蓿豆诱导差异片段有五种表达类型,为扁蓿豆抗寒基因转录水平差异表达的研究奠定了基础。
张宇石凤翎高霞蔡丽艳
关键词:扁蓿豆CDNA-AFLP

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殷奎德
作品数:158被引量:671H指数:12
供职机构:黑龙江八一农垦大学农学院
研究主题:大豆 玉米 盐碱胁迫 水稻 耐盐碱
向殿军
作品数:47被引量:146H指数:8
供职机构:内蒙古民族大学
研究主题:水稻 酸乳 农杆菌介导 基因克隆 冷胁迫
王丽娜
作品数:98被引量:197H指数:7
供职机构:黑龙江省农业科学院
研究主题:大豆 盐碱土 工业大麻 玉米 苏打盐碱土
汪虹
作品数:176被引量:793H指数:14
供职机构:上海市农业科学院
研究主题:草菇 食用菌 香菇 双孢蘑菇 子实体
满丽莉
作品数:41被引量:118H指数:7
供职机构:内蒙古民族大学
研究主题:细菌素 乳酸菌 酸乳 冷胁迫 植物乳杆菌