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免疫 反应 性 分子及其用途 本发明涉及特异性 识别并结合至人含锚蛋白重复结构域的蛋白30A(NY‑BR‑1)的免疫 反应 性 分子,并且具体地涉及对其他的人含锚蛋白重复结构域的蛋白质没有显示出交叉反应 性 的免疫 反应 性 分子。本发明还涉及此类免疫 反应 性 分子在癌症... 帕特里克·施密特 印卡·佐尔宁 德克·贾格尔 弗兰克·莫伯 艾琳·伯格免疫 反应 性 分子及其用途 本发明涉及特异性 识别并结合至人含锚蛋白重复结构域的蛋白30A(NY‑BR‑1)的免疫 反应 性 分子,并且具体地涉及对其他的人含锚蛋白重复结构域的蛋白质没有显示出交叉反应 性 的免疫 反应 性 分子。本发明还涉及此类免疫 反应 性 分子在癌症... 帕特里克·施密特 印卡·佐尔宁 德克·贾格尔 弗兰克·莫伯 卡斯滕·沃瓦斯 艾琳·伯格可溶性 和免疫 反应 性 寨卡病毒NS1多肽 本发明涉及适合于检测分离的生物样品中的针对寨卡病毒的抗体的多肽,其包含寨卡病毒NS1侧翼结构域特异性 氨基酸序列及其变体,其中没有另外的寨卡病毒特异性 氨基酸序列存在于所述多肽中。该多肽不与针对来自蜱传脑炎病毒、登革病毒1‑... E.法茨 M.格勒克 P.明希 A.里德尔 C.舒尔茨 G.塔巴雷斯腐食酪螨过敏原Tyr p 32重组蛋白的制备和免疫 反应 性 鉴定 2024年 制备腐食酪螨过敏原第32组分(Tyr p 32)重组蛋白并鉴定其免疫 反应 性 。从腐食酪螨总RNA扩增Tyr p 32的编码基因,插入pET-28a(+)载体中,将pET-28a(+)-Tyr p 32质粒转化至BL21(DE3)感受态细胞中,经IPTG诱导表达后,用Ni柱进行层析纯化,用SDS-PAGE与Western blotting鉴定。收集过敏性 哮喘和(或)鼻炎患儿血清,IgE-ELISA和IgE-Western blotting检测rTyr p 32与人腐食酪螨阳性 血清结合率。将rTyr p 32与人支气管上皮细胞BEAS-2B共培养后,ELISA和qRT-PCR检测IL-6和IL-8细胞因子蛋白和mRNA表达水平,组间两两比较采用t检验。结果显示,获得Tyr p 32编码基因,全长为885 bp,Tyr p 32与Der p 32、Der f 32的氨基酸序列一致性 分别为70.21%和68.03%。SDS-PAGE和Western blotting结果显示rTyr p 32相对分子质量约为35000 Da,与理论值一致。IgE-ELISA结果显示rTyr p 32与人腐食酪螨阳性 血清的IgE结合率为41.38%(12/29)。当rTyr p 32与BEAS-2B细胞共培养后,rTyr p 32以浓度依赖性 方式促进细胞上清中IL-6和IL-8的蛋白表达(t=-29.10,P=0.0012;t=-33.69,P=0.0009),并显著提高IL-6和IL-8 mRNA水平表达(t=-9.15,P=0.0117;t=-17.16,P=0.0034)。综上,成功制备具有免疫 反应 性 的腐食酪螨过敏原重组蛋白rTyr p 32,为过敏性 疾病组分诊断、特异性 免疫 治疗等提供了原料。 周冬梅 任雅宁 廖媛芬 周鹰 崔玉宝关键词:腐食酪螨 重组蛋白 免疫反应性 酪蛋白糖巨肽对花生过敏原免疫 反应 性 的影响 2024年 目的 探究酪蛋白糖巨肽(casein glycomacropeptides,CGMP)与花生过敏原相互作用并降低其免疫 反应 性 的潜力。方法 通过蛋白-蛋白分子对接技术探讨CGMP与Ara h1、Ara h2是否有相互作用的潜力。进一步通过混合水浴加热制备CGMP与花生蛋白的混合溶液(mixed solution of casein glycomacropeptides and peanut proteins,MCGP),建立MCGP致敏、花生蛋白激发的BALB/c小鼠模型,研究MCGP对花生过敏反应 的影响。最后使用圆二色谱法研究酪蛋白糖巨肽与Ara h1、Ara h2的相互作用力及对其结构的影响。结果 CGMP与Ara h1、Ara h2间存在次级键(盐桥、氢键、范德华力),部分作用于过敏原表位;与花生蛋白过敏组相比, MCGP致敏组血清中的花生蛋白特异性 免疫 球蛋白E (specific immunoglobulin E, sIgE)、sIgG1、sIgG2a含量显著下降,白介素-4 (interleukin-4, IL-4)、IL-5、组胺水平显著下降,转化生长因子-β (transforming growth factor-β, TGF-β)、γ干扰素(interferon-gamma, IFN-γ)水平显著升高, MCGP中Ara h2的α-螺旋与β-折叠的比例改变。结论 CGMP能够改变Ara h2的结构,遮蔽花生过敏原表位,抑制sIgE、sIgG结合Ara h1、Ara h2,降低部分花生过敏原的免疫 反应 性 。 曾冰蕙 宋若琳 刘雅利 孟婷云 曾令玉 车会莲关键词:酪蛋白糖巨肽 花生 免疫反应性 蛋白质相互作用 分子对接 胸腺上皮细胞Sel1L缺失对自身免疫 反应 性 的影响 刘婷过敏原肌质钙结合蛋白在毕赤酵母中的表达、优化及免疫 反应 性 研究 2024年 目的 利用毕赤酵母(Pichia pastoris, P. pastoris)高效表达三疣梭子蟹(Portunustrituberculatus)重要过敏原肌质钙结合蛋白(sarcoplasmic calcium binding protein, SCP),并检验其免疫 反应 性 。方法 根据毕赤酵母的密码子偏好性 优化SCP基因并构建重组质粒。将其热激转化至P. pastorisGS115菌株后经遗传霉素(geneticin,G418)筛选获得阳性 高拷贝子。最后通过甲醇诱导表达重组SCP并结合免疫 印记(western blotting,WB)和间接酶联免疫 吸附实验(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)验证其免疫 反应 性 。结果 在摇瓶水平下,重组SCP在毕赤酵母中最佳的表达条件为:诱导温度为28℃,甲醇添加量为每24h添加1.0%甲醇,诱导pH为6.0,诱导时间为144 h。在此条件下, SCP(纯度为91.6%)的得率为1.5 mg/100 mL菌液,实现了可溶性 高效表达。WB和间接ELISA结果表明,重组SCP具有免疫 球蛋白G结合能力。结论 毕赤酵母表达系统可以得到纯度较高且免疫 反应 性 良好的重组SCP。本研究可为SCP的理化研究及过敏原标准物质的应用奠定基础,并有望促进特异性 甲壳类过敏原检测的发展。 赵明玉 李妍 朱文烨 陈媛 王晓楠 林洪 李振兴关键词:三疣梭子蟹 毕赤酵母 真核表达 汉滩病毒Gc的细胞免疫 反应 性 评估和验证 被引量:1 2023年 目的筛选、鉴定并验证汉滩病毒包膜糖蛋白C末端(Hantaan virus glycoprotein C-terminal,HTNV Gc)上免疫 反应 性 表位。方法在预测覆盖率超过全球98%人群主要组织相容性 复合物(major histocompatibility complex,MHC)基因基础上,通过免疫 表位数据库(Immune Epitope Database,IEDB)、丹麦技术大学(Technical University of Denmark,DTU)等免疫 信息学前沿算法系统分析HTNV Gc上9肽和15肽表位的亲和力,使用Vaxijen工具分析免疫 原性 ,使用Blastp工具分析种间种内保守性 ;双向层次聚类比较MHC-Ⅰ类和Ⅱ类限制性 表位的交叉免疫 反应 性 ;使用分子对接模拟出优势表位与MHC对接的可能结果;通过酶联免疫 斑点(ELISpot)实验验证计算机分析结果。结果将多种生物信息学算法结果整合后,获得高亲和力、种间种内保守和强免疫 原性 的9肽和15肽表位,分别为8和80个,其中人鼠共同优势表位8个;聚类分析证明H-2基因型与HLA基因型存在部分相似;分子对接结果模拟出下优势表位与多个MHC基因型对接良好,且与亲和力分析结果一致;在非优势表位对比下,优势表位组小鼠脾细胞分泌IFN-γ的量更高。结论使用多种生物信息学算法成功筛选出HTNV Gc上优势表位,并通过ELISpot实验鉴定了上述表位的细胞免疫 反应 性 。 谢明阳 孙报增 马思婕 杨端 罗程 王越越 曹宇宸 康文龙 张赟 杨琨 姜东伯关键词:汉滩病毒 糖蛋白 表位 免疫反应性 不同原核表达载体对非洲猪瘟病毒CD2v蛋白可溶性 表达及免疫 反应 性 比较 被引量:1 2023年 本研究旨在系统性 地探究不同原核表达载体对非洲猪瘟病毒CD2v蛋白的可溶性 表达差别,并利用临床非洲猪瘟病毒抗体阳性 血清比较包涵体和可溶性 CD2v蛋白的免疫 反应 性 。利用5种原核表达载体pCold-TF、pET28a、pMAL-C6T、pGEX-4T-1、pET32a分别表达去除信号肽和跨膜区的非洲猪瘟病毒CD2v蛋白,利用镍-氨三乙酸(nickel-nitrilotriacetic acid,Ni-NTA)亲和层析法分别纯化源自pET28a和pCold-TF表达载体的包涵体和可溶性 CD2v蛋白,并用间接酶联免疫 吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)方法比较纯化蛋白的免疫 反应 性 。结果显示,pCold-TF载体以表达可溶性 蛋白为主,pMAL-C6T载体同时表达包涵体和可溶性 蛋白,而其他载体主要表达包涵体蛋白。临床非洲猪瘟病毒抗体阳性 血清检测数据显示,可溶性 蛋白的免疫 反应 性 显著优于包涵体蛋白(P<0.05)。pCold-TF载体的触发因子(trigger factor,TF)标签可促进CD2v蛋白的可溶性 表达,其表达蛋白的免疫 反应 性 优于包涵体蛋白。本研究结果为CD2v蛋白的免疫 原性 研究奠定了基础,亦为其他重要抗原的可溶性 表达提供了思路。 冯梦珂 王星博 林璐璐 崔明仙 颜焰 颜焰关键词:非洲猪瘟病毒 原核表达 可溶性表达 免疫反应性 生物钟基因PER2通过抑制IKK/NFκB通路和PD-L1表达增强口腔鳞状细胞癌的免疫 反应 性 背景:目前研究证明,生物钟对机体免疫 功能具有重要调控作用,并与癌症的发生发展密切相关。PER2是核心生物钟基因,并且在包括口腔鳞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)在内的多种肿瘤细胞中... 张志伟关键词:抗肿瘤免疫 PER2 PD-L1 口腔鳞癌
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戴佳琳 作品数:71 被引量:167 H指数:7 供职机构:贵州医科大学 研究主题:原核表达 基因克隆 猪带绦虫 免疫反应性 亚洲带绦虫 黄江 作品数:158 被引量:328 H指数:9 供职机构:贵州医科大学 研究主题:原核表达 亚洲带绦虫 生物信息学 亚洲牛带绦虫 基因克隆 陈晓光 作品数:282 被引量:974 H指数:16 供职机构:南方医科大学 研究主题:弓形虫 日本血吸虫 白纹伊蚊 刚地弓形虫 广州管圆线虫 廖兴江 作品数:50 被引量:126 H指数:7 供职机构:贵阳医学院 研究主题:原核表达 基因克隆 亚洲牛带绦虫 亚洲带绦虫 生物信息学分析 吴焜 作品数:76 被引量:199 H指数:8 供职机构:佛山市顺德区慢性病防治中心 研究主题:弓形虫 速殖子 免疫反应性 刚地弓形虫 SAG1