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西伯利亚鲟黄体激素受体基因的克隆及其生物信息学分析
2025年
【目的】阐明黄体激素受体(Luteinizing hormone receptor,LHR)的生理功能和LHR基因在西伯利亚鲟性腺发育过程的功能作用,为鲟鱼的生殖调控提供参考。【方法】采用兼并引物扩展及RACE技术,克隆西伯利亚鲟LHR基因cDNA全长,并利用TMHMM、Signal 5.0等在线软件对LHR基因的理化性质、序列同源性等进行生物信息学分析。【结果】西伯利亚鲟LHR基因cDNA序列全长1994 bp,包括开放性阅读框1140 bp,共编码379个氨基酸,相对分子质量为43.02 kD,理论等电点为8.96,有35个正电荷氨基酸残基(Arg+Lys),24个负电荷氨基酸残基(Asp+Glu)。西伯利亚鲟LHR氨基酸序列与小体鲟、大西洋鲟、匙吻鲟和俄罗斯鲟均具有较高的同源性,达92%~98%。LHR蛋白具有7个跨膜结构域,具有G蛋白偶联受体家族蛋白典型保守区域。LHR基因编码的蛋白亲水性平均系数为0.435,属于疏水性氨基酸。二级结构模型显示,LHR蛋白中α-螺旋、无规则卷曲、延伸链以及β-转角的占比分别为41.69%、37.20%、19.53%及1.58%。三级结构模型显示,LHR蛋白主要由α-螺旋和无规则卷曲组成。【结论】从西比利亚鲟卵巢组织成功克隆获得LHR基因cDNA全长序列,LHR氨基酸序列与小体鲟等具有较高的同源性,LHR基因编码的氨基酸序列对应的蛋白质为疏水性氨基酸,存在7个跨膜结构域,具有G蛋白偶联受体家族蛋白典型保守区域,LHR蛋白主要由α-螺旋和无规则卷曲组成。
周洲孔杰赵振新赵飞吕盛寒刘霆
关键词:促黄体激素受体克隆生物信息学系统进化树
黄体激素释放激素类似物的制备
2025年
以Rink Amide树脂为固相载体、N-芴甲氧羰基(Fmoc)保护氨基酸为原料,采用固相多肽合成法制备了一种黄体激素释放激素(luteinizing hormone-releasing hormone, LHRH)6位经D-构型半胱氨酸(D-Cys)取代的类似物[D-Cys^(6)]-LHRH。优化的裂解试剂为三氟乙酸-水-三异丙基硅烷(95.0∶2.5∶2.5,体积比),纯品的HPLC纯度为97.8%,总收率为47.5%。该方法简便高效、总收率高,为LHRH类似物的制备提供了参考,也为进一步构建LHRH受体靶向的多肽-药物偶联物奠定了基础。
李松涛杨雪郝婷范彦芳王燕
关键词:类似物多肽固相合成
一种重组人黄体激素α生物活性的检测方法
本发明一种重组人黄体激素α生物活性的检测方法,基于密码子优化获得的特定LHCGR基因序列和特定的环磷酸腺苷反应元件(CRE)控制下的萤光素酶报告基因,构建得到的重组活细胞既能稳定表达人黄体生成素/绒毛膜性腺激素受体,...
宋秀芳杜艳娇王嘉欣唐同浪
扳机日及其后添加重组人黄体激素黄体期长方案助孕结局的影响被引量:1
2022年
目的 探讨扳机日及其后添加重组人黄体生成素(r-hLH)对体外受精和卵胞浆内精子注射-胚胎移植(IVF/ICSI-ET)结局的影响。方法 回顾性分析2013年1月至2018年10月于宁夏医科大学总医院生殖医学中心行黄体期长效长方案且扳机日血清黄体生成素(LH)水平<1.2 IU/L的患者的临床资料,共912个周期,根据扳机日、取卵日、移植日是否单点或多点添加r-hLH分为未添加组(n=483)、添加组(n=429);根据是否活产分为非活产组(n=546)、活产组(n=366)。比较各组临床特征和助孕结局,采用二元Logistic回归分析影响r-hLH添加及活产率的因素。结果 添加组临床妊娠率、活产率、胚胎种植率、多胎妊娠率、早产率、流产率均高于未添加组,但差异均无统计学意义(P均>0.05);添加组卵巢过度刺激综合征(OHSS)发生率(3.26%)低于未添加组(8.28%),差异有统计学意义(P=0.001)。二分类Logistics回归分析显示,高水平性腺激素(Gn)启动日LH(OR:1.597,95%CI:1.313~1.944,P<0.001)、高水平扳机日LH(OR:2.361,95%CI:1.304~4.275,P=0.005)及高OHSS发生率(OR:2.514,95%CI:1.140~5.545,P=0.022)是未添加r-hLH的危险因素。高龄(OR:1.042,95%CI:1.009~1.076,P=0.001)、高BMI指数(OR:1.060,95%CI:1.015~1.106,P=0.011)是低活产率的危险因素,移植2枚胚胎是低活产率的保护因素(OR=0.554,95%CI:0.404~0.761,P<0.001)。结论 长方案降调相对过度的患者扳机日及其后添加r-hLH可达到理想的助孕结局。
韩晓婷高文丽王婷赵君利
关键词:体外受精-胚胎移植黄体支持
一种黄体激素类似物及其制备方法
本发明公开了一种黄体激素(luteinizing hormone,LH)类似物及其制备方法,所述黄体激素类似物以LHβ‑接头序列‑LHα的顺序从N末端到C‑末端连接起来,设计的接头序列带有不同的长度、可折叠性、疏水性...
林俊生刘军伟刁勇
重组人卵泡激素联合重组人黄体激素与尿性素在卵泡期长方案排卵中的临床效果比较被引量:3
2021年
目的比较重组人卵泡激素联合重组人黄体激素与尿性素在卵泡期长方案排卵中的临床效果。方法回顾性分析赣州市妇幼保健院2018年5月—2019年12月收治的140例接受试管受精(IVF)助孕的卵泡期长方案排卵患者的临床资料,按照治疗方案不同分为A组(73例)与B组(67例)。A组采用重组人黄体激素(rLH)联合重组人卵泡激素,B组采用尿性素联合重组人卵泡激素,比较两组的临床观察指标、治疗结局、生理指标。结果两组患者的性腺激素(Gn)总量、Gn使用天数、正常受精率、优质胚胎率、囊胚形成率、妊娠率比较,差异无统计学意义(P>0.05);两组患者治疗前的内膜厚度、雌二醇、孕酮和黄体生成素(LH)水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);两种治疗后的内膜厚度,雌二醇,LH水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。两组治疗后的内膜厚度、LH、孕酮、雌二醇水平高于治疗前,差异有统计学意义(P<0.05)。结论对于卵泡期长方案排卵的患者,采用重组人卵泡激素+重组人黄体激素与重组人卵泡激素+尿性素均可有效助孕,具有临床应用价值。其中尿性素便宜,且可减少重组人卵泡激素的用量,能够减轻患者的经济负担,值得临床推广应用。
吴润香李玲岳林林
关键词:重组人促卵泡激素尿促性素卵泡期助孕
枸橼酸氯米芬、辅酶Q10联合重组人黄体激素治疗高龄卵巢储备功能减退不孕患者的临床效果被引量:5
2021年
目的探讨枸橼酸氯米芬、辅酶Q10联合重组人黄体激素治疗高龄卵巢储备功能减退(DOR)不孕患者的临床效果。方法选取2018年1月至2020年10月长安医院收治的120例高龄DOR不孕患者作为研究对象,按照随机数字表法将其分为对照组与试验组,各60例。对照组采用枸橼酸氯米芬和辅酶Q10治疗,试验组在对照组基础上联合重组人黄体激素治疗。比较两组患者的激素水平、超声检查结果及妊娠结局。结果治疗后,试验组患者的FSH、LH、E_(2)水平低于治疗前,且FSH水平低于对照组(P<0.05);治疗后,试验组的AMH水平高于治疗前及对照组(P<0.05)。治疗后,两组患者的AFC均升高,子宫内膜厚度均增大,PI、RI均减小,且试验组优于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。试验组患者的获卵数、2PN数、可利用胚胎数及妊娠率高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);两组患者的周期取消率、优质胚胎率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论枸橼酸氯米芬、辅酶Q10联合重组人黄体激素可改善高龄DOR不孕患者的激素水平、子宫内膜厚度及血流参数,提高排卵效果及妊娠率。
周月会赵晓琴胡佳慧戚玉玲
关键词:高龄不孕枸橼酸氯米芬辅酶Q10
输卵管通液术联合溴隐亭治疗高催乳素血症所致不孕症合并输卵管阻塞疗效及其对患者血清黄体激素、抗顶体蛋白酶抗体的影响被引量:6
2020年
目的探讨输卵管通液术联合溴隐亭对高催乳素血症(HPRL)所致不孕症合并输卵管阻塞患者的临床治疗效果,以及对患者血清黄体激素(LH)、抗顶体蛋白酶抗体(AcrAb)水平的影响。方法选择2017年6月至2018年6月,绵阳市中心医院收治的HPRL所致不孕症合并输卵管阻塞患者102例为研究对象。采用随机数字表法,将其分为观察组(n=51)和对照组(n=51)。对观察组患者采取输卵管通液术联合溴隐亭治疗,而对照组患者仅采取输卵管通液术治疗。分别采用化学发光法、酶联免疫吸附试验,检测患者血清LH、AcrAb水平。治疗结束后,对2组患者随访1年,观察其妊娠情况。2组患者采取输卵管通液术治疗的持续时间、术中出血量和术后下床活动时间,血清LH、AcrAb水平,以及治疗结束至妊娠的时间比较,采用成组t检验。2组患者输卵管阻塞治疗的总有效率、不良反应率、术后妊娠率比较,采用χ^2检验。本研究经过绵阳市中心医院伦理委员会批准(审批文号:S-2018-022),与所有患者签署临床研究知情同意书。2组患者年龄、不孕年限等一般临床资料比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结果①2组患者采取输卵管通液术治疗的持续时间、术中出血量和术后下床活动时间分别比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。②观察组输卵管阻塞治疗的总有效率为82.3%(42/51),显著高于对照组的64.7%(33/51),并且差异有统计学意义(χ^2=4.080、P=0.043)。③组间比较:治疗后,观察组患者血清LH水平为(5.59±0.58)IU/L,显著高于对照组的(5.36±0.57)IU/L,血清AcrAb水平为(12.2±2.5)U/L,显著低于对照组的(14.2±2.9)U/L,并且差异均有统计学意义(t=2.002、P=0.048,t=3.743、P<0.001)。组内比较:治疗后,2组患者血清LH水平,均显著高于治疗前,而血清AcrAb水平,则均显著低于治疗前,并且差异均有统计学意义(P<0.05)。④治疗结束后的1年随访期内,观察组妊娠率为70.
高迎春潘长清张耀
关键词:高催乳素血症输卵管阻塞输卵管通液术促黄体激素
黄体激素释放激素-TAT-p53融合蛋白制备及其对肿瘤细胞增殖作用的影响被引量:1
2019年
目的制备黄体激素释放激素(luteinizing hormone releasing hormone,LHRH)-TAT-p53融合蛋白,探讨其抗肿瘤作用。方法以重组质粒pET28a-p53为模板,经PCR扩增目的基因,双酶切,克隆至原核表达载体p ET20b中,构建重组表达质粒p ET20b-LHRH-TAT-p53,并在E. coli中IPTG诱导表达,经金属螯合层析、DEAE弱阴离子交换层析纯化目的蛋白。取对数生长期的HeLa、BGC及MDCK细胞进行细胞活性试验,检测pET28a-p53蛋白活性。结果经双酶切及测序鉴定,重组质粒pET20b-LHRH-TAT-p53构建正确;融合蛋白相对分子质量约54 000,主要以包涵体形式存在,表达量约占菌体总蛋白55%;HeLa及BGC细胞加入纯化复性的重组蛋白后,细胞变圆、色暗、折光性变差,甚至裂解死亡,细胞死亡数增加,而MDCK细胞无变化;一定浓度范围内(25~120μg/m L)蛋白对HeLa及BGC细胞有明显的抑制作用。结论成功制备了LHRH-TAT-p53融合蛋白,该蛋白具有生物活性,对肿瘤细胞有杀伤作用。本研究为下一步制备靶向LHRH的肿瘤治疗药物提供了参考。
马洪圆田园李泽鸿张国利吴广谋余晓颖陈云雨岳玉环
关键词:TAT蛋白P53基因肿瘤增殖
黄体激素释放激素受体(LHRH-R)缀合物及其用途
本教导大体上涉及用于使患者的肿瘤微环境成像的缀合物和方法,以及涉及用于治疗患者的表达LHRH‑R的癌症的缀合物和方法。本教导大体上涉及制备包含LHRH‑R拮抗剂的缀合物的方法。
P.S.罗J.罗伊

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作品数:26被引量:68H指数:6
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