公共文化服务平台

搜索到1501篇“ 体外表达“的相关文章

一种威氏海链藻超氧化物歧化酶基因及其编码蛋白和体外表达方法: 本发明属于分子生物学技术领域，具体涉及一种威氏海链藻超氧化物歧化酶基因及其编码蛋白和体外表达方法。本发明基于威氏海链藻转录组测序结果，从威氏海链藻中克隆得到一种转录水平较高的超氧化物歧化酶基因的cDNA序列，其开放阅读框...; 孙瑞彬高旭邵展茹段德麟

一种果胶甲酯酶基因PagPME2及其体外表达纯化方法和应用: 本发明属于基因工程技术领域，具体涉及一种果胶甲酯酶基因PagPME2及其体外表达纯化方法和应用。本发明首次从84K杨树中克隆出果胶甲酯酶基因PagPME2，并且利用分子生物学和生物化学技术，证明PagPME2基因确实具备...; 李瑞丽何其邹洪林金星卢振芳尹冬乐唐乐天李维艳

一种LTα1β2体外表达生产方法: 本专利涉及一种成本低、活性高的分泌型LTα1β2细胞因子的体外表达方法。通过去除LTα亚基的信号肽序列，LTβ亚基的跨膜结构域和信号肽序列，亚基之间通过G4S柔性连接子，将1个LTα亚基和2个LTβ亚基连接在一起，并在该...; 李砚川刘荣和曾志琴白子轩

一种梨DEFL27蛋白及其体外表达方法和应用: 本发明公开了一种梨DEFL27蛋白及其体外表达方法和应用，该梨DEFL27蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。设计引物克隆梨DEFL27蛋白的基因PbrDEFL27，构建大肠杆菌重组表达质粒PbrDEFL27‑...; 吴巨友张婷汤超王鹏张绍玲

一种威氏海链藻超氧化物歧化酶基因及其编码蛋白和体外表达方法: 本发明属于分子生物学技术领域，具体涉及一种威氏海链藻超氧化物歧化酶基因及其编码蛋白和体外表达方法。本发明基于威氏海链藻转录组测序结果，从威氏海链藻中克隆得到一种转录水平较高的超氧化物歧化酶基因的cDNA序列，其开放阅读框...; 孙瑞彬高旭邵展茹段德麟

一种假单胞菌来源硫醌氧化还原酶体外表达纯化方法及其应用: 本发明提供一种假单胞菌来源硫醌氧化还原酶体外表达纯化方法，并使其应用于丙硫醇的降解，该方法以一株高效降解丙硫醇的恶臭假单胞菌S‑1全基因组为模板，克隆硫醌氧化还原酶编码基因sqr，选择pET28a作为表达载体，将sqr基...; 李骏方诗琦唐宇航陈国庆周雯雯谢琳琳孙超万爽

中华鳖β-防御素1的体外表达及生物学功能研究: 抗菌肽(antimicrobial peptide,AMP)也被称为宿主防御肽,具有广谱灭菌活性,在自然界分布广泛,细菌、植物和动物中均有发现。随着细菌耐药性问题的日益严峻,寻找新的抗菌药物成为了迫切的需要。由于抗菌肽作...; 梁婷婷; 关键词：Β-防御素抑菌活性体外表达抗菌肽

人苯丙氨酸羟化酶突变体p.R243Q、p.R241C和p.Y356X的体外表达及功能研究: 2024年; 目的分析3种苯丙氨酸羟化酶(phenylalanine hydroxylase,PAH)突变体(p.R243Q、p.R241C和p.Y356X)的体外表达,确定3种突变体的致病性。方法利用生物信息学技术预测PAH突变体对PAH蛋白结构和功能的影响。构建相应的PAH突变型质粒,在人胚胎肾细胞HEK293T中进行表达,采用定量逆转录聚合酶链反应检测3种PAH突变体的mRNA表达水平,利用蛋白质印迹法与酶联免疫吸附试验检测突变体的PAH蛋白表达水平。结果生物信息学分析预测结果显示,3种突变体均具备致病性。突变体p.R243Q和p.R241C质粒在HEK293T细胞中的mRNA表达水平与野生型类似(P>0.05),而p.Y356X突变体质粒的mRNA表达水平明显下降(P<0.05)。3种突变体PAH蛋白的表达水平与野生型相比均显著降低(P<0.05)。p.R241C和p.Y356X的细胞外PAH蛋白浓度较野生型降低(P<0.05),p.R243Q与野生型相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论p.R243Q、p.R241C和p.Y356X降低真核细胞中PAH蛋白的表达量,其中p.R241C和p.Y356X还影响PAH蛋白的功能,这3种PAH突变体均为致病性突变。; 庞永红高翔羽袁振亚黄辉王增芹彭磊李逸群刘杰刘冬陈桂荣; 关键词：突变体体外表达细胞

一种基于DHPS蛋白的大肠杆菌体外表达载体的磺胺类污染物检测方法: 一种基于DHPS蛋白的大肠杆菌体外表达载体的磺胺类污染物检测方法，包括如下步骤：从肾形虫中分离出磺胺类抗生素靶蛋白DHPS的基因<I>folP</I>，通过基因工程技术将其克隆至大肠杆菌BL21表达载体pET‑28a(+...; 陈瑛侯森任南琪王爱杰郑晓丹郑维彬陈宏博赵天一

来源于马赛菌(Massilia sp.)UMI-21的ACS_(MU)和PhaC_(MU)体外表达及功能研究: 2024年; 【目的】构建马赛菌(Massilia sp.)UMI-21来源乙酰辅酶A合成酶ACS_(MU)和聚羟基脂肪酸酯(polyhydroxyalkanoate,PHA)合酶PhaC_(MU)的体外重组表达体系并过表达2种酶,利用体外合成体系确定2种酶在Massilia sp.UMI21聚3-羟基丁酸(polyhydroxybutyrate,PHB)合成途径中的主要功能。【方法】利用无缝克隆技术将来源于Massilia sp.UMI-21的乙酰辅酶A合成酶基因acsMU和PHA合酶基因phaC_(MU)扩增后与pQE-80L质粒连接,转导大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)构建2个基因的重组表达体系;利用6×His标签纯化蛋白ACS_(MU)和PhaC_(MU),并采用5,5′-二硫双(2-硝基苯甲酸)[5,5′-dithiobis-(2-nitrobenzoic acid),DTNB]法测定其活性;使用体外单相合成系统(one-phase reaction system,OPRS),以(R)-3HB为底物,验证ACS_(MU)和PhaC_(MU)这2种酶在合成PHB途径中的功能。【结果】成功构建了ACS_(MU)和PhaC_(MU)蛋白重组表达菌株BL21-pQE-80L-acsMU和BL21-pQE-80L-phaC_(MU),提纯得到过表达蛋白ACS_(MU)和PhaC_(MU)产率分别为24.8 mg/L和25.6 mg/L;ACS_(MU)酶比活力为(0.148±0.011)U/mg。PhaC_(MU)酶对(R)-3HBCoA的比活力为(0.102±0.011)U/mg;核磁共振氢谱(nuclear magnetic resonance hydrogen spectroscopy,^(1)H-NMR)分析结果表明,使用ACSPt-PCT_(CP)-PhaC_(Re)、ACS_(MU)-PCT_(CP)-PhaC_(Re)和ACS_(MU)-PCT_(CP)-PhaC_(MU)这3条OPRS途径均能合成PHB,产量分别为0.62、0.76和0.64 g/L。【结论】acsMU和phaC_(MU)基因可利用大肠杆菌表达体系过表达并可获得具有活性的可溶性蛋白;对比ACSPt-PCT_(CP)-PhaC_(Re)合成体系,ACS_(MU)替代ACSPt合成PHB产量增加22.58%,在聚合酶相同的情况下,PHB的合成产量依赖乙酰辅酶A合成酶(acetyl-CoA synthase,ACS)合成乙酰辅酶A的稳定性。使用PhaC_(MU)代替PhaC_(Re),对比ACS_(MU)-PCT_(CP)-PhaC_(Re)组合,合成PHB产量减少了15.79%。在聚合前体浓度相同的情况下,PHB合成量依赖聚合酶的活性。; 王明李雪韩雪容

加载更多 ∨

相关作者

用户反馈

相关作者

用户登录

用户反馈