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Cas9稳定表达人 肿瘤 细胞株 的建立及其基因编辑活性 被引量:2 2017年 目的:建立多种Cas9蛋白稳定表达的人 肿瘤 细胞株 ,验证细胞 中Cas9的基因编辑活性,方便后续研究中目的基因的编辑。方法在15种来自不同组织的人 肿瘤 细胞株 中通过慢病毒感染pLv-EF1α-Cas9-Flag-Neo或pLv-EF1α-Cas9-Flag-Puro及克隆筛选的方式建立Cas9稳定表达的细胞株 ;在其中3个细胞株 中瞬时转入靶向TSC22基因的向导RNA,挑选单克隆,通过基因组PCR、测序及Western blot检测Cas9蛋白的基因编辑活性。结果筛选得到了69株 Cas9稳定表达的人 肿瘤 细胞株 ,瞬时转入向导RNA后成功造成了细胞 中TSC22基因的大片段缺失。结论成功建立了69株 Cas9稳定表达的人 肿瘤 细胞株 ,其中的Cas9蛋白具有基因编辑活性。这些细胞株 在大规模药物筛选、新药作用靶点的筛选以及基因功能研究等方面有潜在应用价值。 卞晓翠 杨振丽 冯海凉 赵晓梅 顾蓓 李姜 孙昊 刘玉琴泛素样含PHD和环指域1沉默对人 肿瘤 细胞株 HO-8910和HO-8910 PM 生物学功能的影响 被引量:1 2015年 目的 观察泛素样含PHD和环指域1(UHRF1)沉默对人 肿瘤 细胞 HO-8910和HO-8910 PM的影响.方法 以人 卵巢癌细胞株 HO-8910和HO-8910 PM为研究对象,采用RNA干扰(RNAi)技术下调UHRF1在上述细胞 中的表达;反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测HO-8910和HO-8910 PM细胞 转染前后UHRF1 mRNA的表达水平;Western blot检测UHRF1蛋白的表达水平;转染第4天,用流式细胞 术检测两株 细胞 转染前后的凋亡水平;转染后24、48、72、96、120 h,用细胞 计数试剂盒(CCK-8)检测UHRF1敲减前后两株 细胞 增殖水平的变化.结果 RNAi技术敲减UHRF1在HO-8910和HO-8910 PM细胞 中的表达后,实验组(kd组)中UHRF1 mRNA和蛋白的表达均低于阴性对照组(nc组)和空白组(bl组,P<0.01);流式细胞 术结果显示,HO-8910细胞 在kd、nc和bl组的凋亡率分别为(16.04±1.41)%、(8.43±0.94)%、(7.76±0.36)%,kd组细胞 凋亡率高于nc组和bl组(P<0.01),nc组和bl组比较差异无统计学意义(P>0.05);HO-8910 PM细胞 在kd、nc、bl组的凋亡率分别为(17.98±4.39)%、(8.92±2.39)%、(8.18±0.83)%,kd组细胞 凋亡率高于nc组和bl组(P<0.05),nc组和bl组比较差异无统计学意义(P>0.05);CCK-8结果显示,HO-8910和HO-8910 PM细胞 从转染后48 h开始,kd组细胞 增殖率低于nc组和bl组,差异有统计学意义(P<0.01),而nc组和bl组细胞 比较,细胞 增殖率差异无统计学意义(P>0.05).结论 抑制UHRF1在人 卵巢癌细胞株 HO-8910和HO-8910 PM的表达后,细胞 的凋亡水平增高,增殖能力减弱. 邵丽佳 沈利洪 葛梦圆关键词:RNA干扰 抗癌活性肽对人 肿瘤 细胞株 增殖的影响及其机理探讨 被引量:2 2012年 目的:探讨由山羊内脏提取制备的抗癌活性肽(Anti-cancer active peptide,ACBP)对人 胃癌细胞株 BGC-823、MGC-803、人 鼻咽癌细胞株 CNE增殖的影响及作用机理。方法:应用MTT法和流式细胞 术观察不同剂量ACBP在不同时间对体外培养的BGC-823、MGC-803及CNE细胞 增殖的影响,并对细胞 周期及凋亡进行了检测。结果:MTT结果显示ACBP对BGC-823、MGC-803及CNE的增殖有抑制作用且呈现剂量依赖效应,在ACBP 20ug/mL时,对三种细胞株 的抑制率分别达到38.3%、29.79%和42.02%(P<0.01))。流式细胞 术检测细胞 周期结果显示,3种对照组细胞 大部分处于G0/G1期和S期,培养24h后,S期细胞 数开始减少,G0/G1期细胞 数增加,48h和72h后呈现显著性变化(P<0.01)。流式细胞 术检测细胞 凋亡结果显示ACBP作用早期,凋亡细胞 (AV+/PI-)增多,在48h和72h后更加明显。结论:ACBP对分化不同的胃癌细胞 BGC-823、MGC-803及鼻咽癌CNE细胞 的增殖有抑制作用,其作用机制可能为诱导细胞 凋亡,抑制DNA合成。 崔宏伟 苏依拉其木格 苏秀兰关键词:抗癌活性肽 肿瘤细胞系 细胞凋亡 细胞周期 流式细胞术 Cdc25c介导的G2/M期检查点调控对人 肿瘤 细胞株 A549低剂量辐射超敏感性的影响 目的:通过下调Cdc25c 蛋白的表达来调控细胞 周期检查点,观察其对HRS/IRR的影响,探讨HRS/IRR 现象的发生机制。
方法:构建靶向人 Cdc25c基因的特异性干扰质粒pGCsi-RNA1~3,脂质体转染A... 崔莹珊关键词:低剂量辐射 酪氨酸磷酸酶α在人 肿瘤 细胞株 中新信号途径 酪氨酸磷酸酶α(PTPα)是一种能催化底物蛋白酪氨酸残基脱磷酸从而调节细胞 内的蛋白质磷酸化状态的酶,是一个能调控细胞 内分子状态从而参与细胞 信号转导的蛋白质分子。本项目拟研究PTPα在乳腺癌和白血病的某些细胞株 中参与细胞 信... 王家敏关键词:人肿瘤细胞株 信号通路 分子作用 条斑紫菜多糖PY-D2对4种人 肿瘤 细胞株 生长的影响 被引量:4 2007年 目的:研究条斑紫菜多糖体外抗肿瘤 的生物学活性。方法:应用生化技术分离和纯化条斑紫菜多糖,获得条斑紫菜多糖的2个组分,分别为PY-D1和PY-D2;在体外培养条件下分别用不同浓度的条斑紫菜多糖PY-D2处理4种人 肿瘤 细胞 ,通过MTT法观察条斑紫菜多糖PY-D2对4种人 肿瘤 细胞 生长的影响;采用流式细胞 仪检测肿瘤 细胞 的细胞 周期变化。结果:条斑紫菜多糖PY-D2诱导HO-8910、MCF-7、K562和7721肿瘤 细胞 72h后,对其生长有明显的抑制作用,呈剂量依赖效应,500mg/LPY-D2的抑制率分别为21.2%、23.6%、19.8%和21%(P<0.001)。流式细胞 仪检测表明PY-D2可以阻滞肿瘤 细胞 的细胞 周期于G0/G1期或G2/M期。结论:条斑紫菜多糖PY-D2具有抑制肿瘤 细胞 HO-8910、MCF-7、K562和7721生长的作用,其有关的分子生物学作用机理值得进一步研究。 张陆曦 徐红丽 周贇 顾佳雯 郭婷婷 何培民关键词:抗肿瘤 流式细胞检测 OLFM4^(GW112/hGC-1)、GRIM19及PIN1基因在12种人 肿瘤 细胞株 中的表达分析 被引量:5 2007年 目的检测OLFM4GW112/hGC-1、GRIM19及PIN1基因在12种人 肿瘤 细胞株 中的表达,并探讨与肿瘤 细胞 凋亡与周期的关系。方法利用RT-PCR半定量的方法检测GW112、GRIM19与PIN1三种基因在人 12种肿瘤 细胞株 中转录水平。结果RT-PCR结果显示:12种人 肿瘤 细胞株 中GW112、GRIM19与PIN1三种基因均有表达,未出现转录缺失。其中胃癌细胞 SGC-7901与脑胶质瘤细胞 CHG-5中的GW112表达明显强于GRIM19,而在其余十种细胞株 中GW112表达却明显低于GRIM19。实验组细胞 中,PIN1基因只在SGC-7901株 与CHG-5株 中表达较弱,其余表达均较强。结论GW112、GRIM19与PIN1在这些肿瘤 细胞 中的表达状况很可能与它们的周期调控和细胞 凋亡有关,对三种基因的表达研究可进一步对分析三种基因的功能提供依据。 黄轶 曾昭淳 左渝萍 张玥关键词:PIN1 肿瘤细胞株 基因表达 RT-PCR 18种人 肿瘤 细胞株 药物敏感性与基因表达的关系 被引量:6 2006年 目的探讨18种人 肿瘤 细胞 对化疗药物的敏感性与基因表达的关系。方法采用MTT法检测细胞株 对阿霉素(ADM)、顺铂(DDP)、丝裂霉素(MMC)、5-氟尿嘧啶(5-Fu)和卡氮芥(BCNU)的敏感性。流式细胞 术检测P-糖蛋白(P-gp)、谷胱甘肽-S-转移酶-π(GST-π)、肺耐药蛋白(LRP)、多药耐药相关蛋白(MRP)和甲基鸟嘌呤甲基转移酶(MGMT)等耐药相关基因和Fas、bcl-2、p53和p16等凋亡调控基因的表达。结果不同细胞株 对同一药物敏感性有较大差异。相关分析表明,细胞株 对DDP的敏感性与p53表达呈负相关(P=0.041),对其余药物的敏感性与所检基因的表达水平无关(P>0.05)。结论细胞株 对DDP的敏感性与p53表达有关。 宋现让 魏玲 王兴武 郑燕 柳永蕾关键词:肿瘤细胞株 化疗敏感性 基因表达 条斑紫菜多糖对四种人 肿瘤 细胞株 生长的影响 目的:研究条斑紫菜多糖(Porphyra yezoensis polysaccharide,PY)体外抗肿瘤 的生物学活性.方法:体外培养条件下用不同浓度的条斑紫菜酸性多糖(PYP)处理4种癌细胞 ,通过MTT法观察条斑紫菜... 郭婷婷 徐红丽 周贇 张陆曦 顾佳雯 何培民关键词:抗肿瘤 MTT法 极大螺旋藻多糖对5种人 肿瘤 细胞株 生长的影响 被引量:16 2003年 目的 :观察极大螺旋藻多糖对人 回盲肠癌HCT 8、神经胶质瘤U2 5 1、宫颈癌HeLa、肝癌SMMC772 1、肺癌A5 49细胞株 生长的影响。方法 :体外培养条件下用不同浓度的极大螺旋藻胞内、胞外多糖处理这 5种癌细胞 ,同时处理人 正常胚肝LO 2细胞 ,并用SRB检测法测定。结果 :极大螺旋藻胞内、胞外多糖对离体培养的宫颈癌HeLa、肝癌SMMC772 1、肺癌A5 49等肿瘤 细胞 均有明显的生长抑制作用 ,并存在浓度剂量效应 ,高浓度抑制作用强 ;而对离体培养的人 正常胚肝LO 2细胞 的生长影响较弱。结论 :极大螺旋藻多糖能选择性地识别并杀伤癌细胞 ,值得进一步研究。 朱劲华 张威 王敏 张成武 李朝军关键词:极大螺旋藻 多糖 人肿瘤细胞株 细胞生长 免疫调节
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刘延成 作品数:197 被引量:154 H指数:8 供职机构:广西师范大学 研究主题:配位反应 极性溶剂 配体 氯化铜 氯仿 陈静波 作品数:59 被引量:94 H指数:6 供职机构:云南大学 研究主题:赤霉酸 酯类化合物 人肿瘤细胞株 立体选择性合成 Β-胡萝卜素 陈振锋 作品数:286 被引量:445 H指数:12 供职机构:广西师范大学 研究主题:配位反应 极性溶剂 配体 配合物 肿瘤细胞株 梁宏 作品数:475 被引量:1,668 H指数:24 供职机构:广西师范大学 研究主题:配体 配位反应 配合物 极性溶剂 肿瘤细胞株 张洪彬 作品数:156 被引量:219 H指数:9 供职机构:云南大学 研究主题:咪唑盐 化合物 细胞毒活性 赤霉素 赤霉酸