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乙型肝炎病毒基因组RNA的乙型肝炎病毒感染者临床特征分析
2024年
目的分析高乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)前基因组RNA(pregenomic RNA,pgRNA)人群的临床特征,进一步探索pgRNA在慢性乙型病毒肝炎(乙肝)患者管理中的价值。方法纳入2020年12月1日-2022年4月1日于四川大学华西医院感染性疾病中心肝炎门诊治疗随访的长期使用核苷类似物治疗的慢性乙肝患者,分析总结高pgRNA慢性乙肝患者的临床特征。结果共纳入107例患者。男性患者占比66.4%,平均年龄为44.02岁。高pgRNA组与低pgRNA组的性别、年龄、天冬氨酸转氨酶、丙氨酸转氨酶、γ-谷氨酰转移酶、HBV表面抗原、HBV e抗原≥0.1 U/mL的患者比例、HBV DNA、甲胎蛋白差异均无统计学意义(P>0.05)。高pgRNA组HBV表面抗原<100 U/mL的患者比例低于低pgRNA组(4.4%vs.22.6%,P<0.05)。结论高pgRNA的慢性乙肝患者HBV表面抗原≥100 U/mL的比例更高。
徐恬张昀哲雷学忠
关键词:慢性乙型病毒性肝炎血清学标志物
血清乙型肝炎病毒基因组RNA在慢性乙型肝炎患者长期抗病毒治疗中的变化特点被引量:4
2024年
目的探究新型临床标志物血清乙型肝炎病毒(HBV)前基因组RNA(pgRNA)水平在长期抗病毒治疗慢性乙型肝炎(CHB)患者中的的临床变化特点。方法纳入在北京大学第一医院就诊的100例核苷(酸)类似物(NAs)初治CHB患者,分别检测患者随访期间的丙氨酸转氨酶(ALT)、HBV DNA、乙型肝炎e抗原(HBeAg)、乙型肝炎表面抗原(HBsAg)水平,并使用Taqman法实时定量PCR检测血清HBV pgRNA水平。连续变量采用独立样本t检验和Mann-Whitney U检验进行组间比较,分类变量采用Pearsonχ^(2)检验和Fisher精确检验进行组间比较。结果48周时发生病毒学应答者(n=54)在后续治疗中的HBV pgRNA下降水平显著高于未发生病毒学应答者(n=46);HBeAg阳性患者的HBV pgRNA下降水平低于HBeAg阴性者;P<0.05或P<0.01。抗病毒治疗后,基线期HBV DNA水平更高、HBeAg阳性患者HBV pgRNA水平更高,基线期HBV pgRNA水平不同的患者抗病毒治疗后的HBV pgRNA水平差异无统计学意义。血清HBV pgRNA与HBsAg在基线期无相关性,而在长期抗病毒治疗后出现相关性,抗病毒治疗第5年、第9年HBV pgRNA与HBsAg存在弱相关性(分别为r=0.262,P=0.031;r=0.288,P=0.008)。结论在CHB长期抗病毒治疗过程中,HBV活性较高CHB患者的HBV pgRNA水平更高。
潘家莉罗皓张霞霞韩一凡陈宏宇曾湛徐小元
关键词:乙型肝炎病毒慢性乙型肝炎
乙型肝炎病毒X基因通过抑制Caspase-1表达促进肝癌细胞增殖
2024年
目的 探究乙型肝炎病毒X基因(HBx)对HepG2细胞中Caspase-1介导的肝细胞增殖的影响。方法 用脂质体转染法将HBx真核表达载体pCDNA3.1-HBx瞬时转入HepG2细胞,以阴性载体转染的HepG2细胞(NC)为对照。转染后72 h收集细胞,通过RT-PCR检测HBx的表达,通过qPCR和Western blot法检测Caspase-1的mRNA和蛋白质表达,并通过CCK-8检测HepG2-HBx和HepG2-NC的增殖情况。结果 RT-PCR证实HBx成功转染HepG2细胞株,HepG2-HBx细胞中Caspase-1的mRNA和蛋白表达水平显著低于HepG2-NC组。HepG2-HBx细胞的增殖能力显著高于HepG2-NC组。结论 HBx通过抑制Caspase-1的表达诱导HepG2细胞增殖。
韦武均王春芳钟丽梅黄晶晶唐霏林黄艳黄英新陆艳珍
关键词:HBX基因HEPG2细胞CASPASE-1细胞增殖
乙型肝炎病毒基因组RNA评估恩替卡韦治疗乙型肝炎E抗原阳性慢性乙型肝炎疗效的价值被引量:1
2023年
目的探讨恩替卡韦(ETV)对乙型肝炎E抗原(HBeAg)阳性慢性乙型肝炎(CHB)患者疗效,并观察血清乙型肝炎病毒(HBV)前基因组RNA(pgRNA)水平、评估其疗效价值。方法选取2019年1月至2021年6月东莞广济医院收治的确诊为HBeAg阳性的78例CHB患者为研究对象进行回顾性分析。根据患者ETV治疗12个月后HBeAg是否获得完全应答分为获得组(35例)和未获得组(43例)。两组患者均采用ETV治疗12个月,观察患者治疗过程中血清HBV pgRNA水平及谷丙转氨酶(ALT)各时间点动态变化,并探讨ETV治疗后患者获得应答情况与HBV pgRNA水平及ALT水平的相关性。结果两组患者治疗3、6、12个月的血清HBV pgRNA水平显著低于入组时,且获得组低于未获得组(P<0.05);血清HBV pgRNA水平与获得完全应答呈负相关(P<0.05)。两组患者治疗3、6、12个月的ALT水平显著低于入组时,且获得组低于未获得组(P<0.05);ALT水平与获得完全应答呈负相关(P<0.05)。结论血清HBV pgRNA、ALT水平与HBeAg阳性CHB患者ETV的疗效具有相关性,可用于评估疗效。
徐国球李平生吴细妹
关键词:恩替卡韦乙型肝炎E抗原慢性乙型肝炎
乙型肝炎病毒基因组RNA表达基因型依赖性调节的机制研究
背景乙型肝炎病毒(Hepatitis B Virus,HBV)感染仍是全球关注的健康问题,HBV慢性携带者罹患肝硬化、肝细胞癌的风险增加,该病毒DNA基因组表现出显著的遗传变异性:基于整个病毒基因组>8%的核苷酸差异。依...
李亚茹
关键词:乙型肝炎病毒核心启动子
乙型肝炎病毒基因组RNA表达的基因型依赖性调节被引量:1
2023年
目的观察乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)Aa、Ae、Bj、Bj-56、Ce、D基因型感染Huh7细胞前基因组RNA(pregenomic RNA,pgRNA)核心启动子转录活性差异,探讨影响HBV转录调控的可能位点。方法(1)取对数生长期Huh7细胞,分为Aa组(转染pGL4.10-HBVpgRNA-Aa),Ae组(转染pGL4.10-HBVpgRNA-Ae),Bj组(转染pGL4.10-HBVpgRNA-Bj),Bj-56组(转染pGL4.10-HBVpgRNA-Bj-56),Ce组(转染pGL4.10-HBVpgRNA-Ce),D组(转染pGL4.10-HBVpgRNA-D)和Huh7对照组(转染pGL4.10空载体),各组均加入海肾荧光素酶载体pGL4.74共转染,转染48 h检测荧光素酶活性。(2)取HBV Huh7 Ae基因型突变体细胞Ae/Bj-EnhⅠ(Ae/Bj-EnhⅠ组)、Ae/Bj-NRE(Ae/Bj-NRE组)、Ae/Bj-EnhⅡcore(Ae/Bj-EnhⅡcore组),和HBV Huh7 Ae基因型细胞(HBV Huh7 Ae组)转染pGL4.10-HBVpgRNA-Ae,HBV Huh7 Ae对照组细胞转染pGL4.10空载体,各组均加入海肾荧光素酶载体pGL4.74共转染,转染48 h检测荧光素酶活性。(3)取HBV Huh7 Bj基因型突变体细胞Bj/Ae-EnhⅠ(Bj/Ae-EnhⅠ组)、Bj/Ae-NRE(Bj/Ae-NRE组)、Bj/Ae-EnhⅡcore(Bj/Ae-EnhⅡcore组)和HBV Huh7 Bj基因型细胞(HBV Huh7 Bj组)转染pGL4.10-HBVpgRNA-Bj,HBV Huh7 Bj对照组细胞转染pGL4.10空载体,各组均加入0.1μg海肾荧光素酶载体pGL4.74共转染,转染48 h检测荧光素酶活性。结果(1)Bj组、Bj-56组、D组、Ce组、Aa组、Ae组荧光素酶活性(1324.000±89.034、1191.000±89.011、937.330±41.885、632.670±46.372、588.000±14.107、399.000±19.672)依次降低(P<0.05),均高于Huh7对照组(7.330±1.528)(P<0.05);Bj组荧光素酶活性明显高于Ae组(t=17.571,P<0.001)。(2)Ae/Bj-EnhⅡcore组、Ae/Bj-NRE组、HBV Huh7 Ae组、Ae/Bj-EnhⅠ组荧光素酶活性(3225.670±164.564、964.330±69.573、837.000±48.135、778.670±25.580)依次降低(P<0.05),均高于HBV Huh7 Ae对照组(7.670±1.528)(P<0.05);Ae/Bj-EnhⅡcore组荧光素酶活性明显高于HBV Huh7 Ae组(t=24.130,P<0.001)。(3)Bj/Ae-EnhⅠ组、Bj/Ae-NRE组、HBV Huh7 Bj组、Bj/Ae-EnhⅡcore组荧光素酶活性(3436.670±511.451、
李亚茹卢凯朱慧慧黄迎丽李雨轩马园园孙锁锋李修岭
关键词:乙型肝炎病毒核心启动子基因型
乙型肝炎病毒X基因及其变异促肝细胞癌的作用机制被引量:6
2022年
原发性肝癌居我国非成熟死亡原因的首位,其中肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)占90%以上。慢性乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染是HCC发生的主要原因。HBV致癌依赖三大因素:病毒复制、整合和进化,其中HBV X基因(HBV X gene,HBx)在这些过程中起主要作用。HBx还能通过表观遗传修饰促进病毒复制,然后通过整合到宿主基因组产生C-端截短型HBx(c-terminal truncated HBx,Ct-HBx)和整合突变,因此也是HBV进化的主要区域。同时,HBx还通过影响关键基因的表达,参与多种信号通路,从而直接促进HCC的发生发展。本文总结了近年来HBx及其变异在HBV-HCC发生发展过程中的作用及机制。
周鑫宇柳东红蔡仕良陈宏森何奕达王瑞华曹广文
关键词:肝细胞癌HBV乙型肝炎病毒X基因突变
慢性乙型肝炎患者核苷酸类似物治疗中动态监测血清乙型肝炎病毒基因组RNA的临床意义被引量:9
2022年
目的探讨慢性乙型肝炎(CHB)患者接受核苷(酸)类似物(NAs)治疗期间,在乙型肝炎病毒(HBV)DNA阴转,血清前基因组RNA(pgRNA)的动态变化对疗效评估的临床意义。方法(1)2015年11月至2016年8月62例研究对象均来自广西医科大学第一附属医院感染性疾病科抗病毒治疗的CHB患者队列,接受NAs治疗均获得HBV DNA完全病毒学应答且维持应答时间>3年。(2)采用荧光定量PCR检测基线、HBV DNA首次应答和维持应答1、2、3年各个时间点血清pgRNA载量。(3)分析基线HBV DNA和pgRNA相关性、治疗期间血清pgRNA变化、血清pgRNA累计阴转率以及影响因素;分析观察终点pgRNA阳性率与治疗后各时间点pgRNA水平:EASL停药标准的关系。结果(1)基线HBV DNA和pgRNA呈中度正相关(r=0.789,P<0.01)。(2)治疗期间,血清pgRNA载量逐渐下降(P<0.01);HBV DNA首次应答和维持应答1、2、3年时的血清pgRNA累计阴转率分别为:22.6%(14/62)、37.1%(23/62)、37.1%(23/62)、41.9%(26/62)。(3)治疗期间影响血清pgRNA变化的亚组分析显示:治疗后各时间点pgRNA水平:基线HBV DNA载量>6(lg copies/mL)组高于基线HBV DNA载量≤6(lg copies/mL)组(P=0.001);基线HBeAg阳性组高于基线HBeAg阴性组(P<0.001);HBV DNA病毒学应答时间>6个月高于HBV DNA病毒学应答时间≤6个月组(P=0.003)。(4)观察终点时,达到和未达到欧洲肝脏研究学会(EASL)指南停药标准患者的血清pgRNA阳性率为48.5%对68.9%(P=0.103)。结论(1)CHB患者长期有效NAs治疗,可持续获得血清pgRNA消减;(2)动态定量检测血清pgRNA,有助于判断NAs抗病毒治疗的疗效,尤其在血清HBV DNA不可检测之后肝内共价闭合环状DNA耗竭状态;(3)血清pgRNA可以作为评估安全停药的指标补充。
零小樟王荣明苏明华臧伟伟邓德丽胡伯斌曹汴川吴育龙何丽霞刘志红梁蘅恺江建宁
关键词:乙型肝炎慢性肝炎病毒核苷(酸)类似物
血清乙型肝炎病毒基因组RNA水平对核苷(酸)类似物初治的慢性乙型肝炎患者疗效预测价值被引量:10
2022年
目的探讨应用血清乙型肝炎病毒基因组RNA(HBV pgRNA)水平预测核苷(酸)类似物初治的慢性乙型肝炎(CHB)患者疗效的价值。方法2015年8月~2019年12月我院诊治的初始治疗的CHB患者107例,接受恩替卡韦、替诺福韦或替比夫定治疗观察48 w。采用实时荧光定量PCR法检测血清HBV pgRNA,采用ELISA法检测血清HBsAg和HBeAg。应用Logistic回归分析影响疗效的因素,应用MedCalc15.1统计学软件绘制ROC,计算曲线下面积(AUC)评价血清HBV pgRNA水平预测核苷(酸)类似物治疗的疗效。结果在治疗48周末,27例(25.2%)患者不应答,另80例(74.8%)患者获得完全应答或部分应答;(完全或部分)应答组血清HBV DNA载量为(6.1±1.0)lg copies/mL,显著低于不应答组【(7.2±1.2)lg copies/mL,P<0.05】,外周血CD4+/CD8+比值为(0.7±0.2),显著高于不应答组【(0.6±0.1),P<0.05】,血清HBeAg阳性率为41.3%,显著低于不应答组(70.4%,P<0.05),血清HBV pgRNA水平为(5.3±0.8)lg copies/mL,显著低于不应答组【(6.5±1.1)lg copies/mL,P<0.05】;Logistic回归分析显示,基线HBV DNA载量、HBeAg状态和血清HBV pgRNA水平均为影响核苷(酸)类似物治疗的CHB患者疗效的因素(OR=2.793、OR=3.827、OR=4.035,P均<0.05);经ROC分析显示,血清HBV pgRNA水平预测核苷(酸)类似物治疗CHB患者不应答的最佳截断点为5.89 lgcopies/mL,AUC值为0.865(95%CI:0.816~0.905),其预测的灵敏度为74.1%(20/27),特异度为88.8%(71/80)。结论监测血清HBV pgRNA水平预测核苷(酸)类似物初治的CHB患者的疗效有一定的临床应用价值,如果检测结果稳定,不失为一种临床决策的参考依据。
严景全王春玲刘娟卢雪兰林占洲莫凡
关键词:乙型肝炎核苷(酸)类似物疗效预测
基于PCR-CRISPR-Cas13a检测乙型肝炎病毒基因组RNA的试剂盒
本发明公开了一种基于PCR‑CRISPR‑Cas13a检测乙型肝炎病毒基因组RNA的试剂盒。本发明提供了核酸分子组合物,由引物HR‑RT、引物F、引物R和特异crRNA组成;引物HR‑RT为SEQ ID No.1所示的...
任锋张向颖徐玲田原李浩段钟平李伟华陈德喜