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- 非诊断目的的Mpox病毒抗体中和活性FRNT检测方法
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- 一株具有中和活性的猪δ冠状病毒单克隆抗体
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- 基于稳定表达萤火虫荧光素酶Vero细胞系体外病毒中和活性检测方法的建立及应用
- 2024年
- 目的建立一种基于稳定表达萤火虫荧光素酶(firefly luciferase,fluc)Vero细胞系的高通量检测方法,以评估样品的体外抗病毒中和活性。方法基于成簇规律间隔短回文重复序列(clustered regularly interspaced short palindromic repeats,CRISPR)/Cas9靶向基因编辑技术,构建一种稳定表达fluc的Vero细胞系,在此基础上建立痘病毒和呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)感染细胞活性检测方法,利用该方法评估痘病毒免疫血清及RSV单抗的中和活性,并与噬斑抑制法及细胞活力检测(adenosine triphosphate,ATP)法检测结果进行比较。结果成功构建了Vero-fluc细胞系,其细胞量与表达的fluc相关性良好(R^(2)=0.9948)。利用Vero-fluc细胞作为感染细胞验证的痘病毒中和活性检测方法具有良好的稳定性、可靠性[信噪比(signal/background ratio,S/B)=25],可满足高通量的检测需求(Z’=0.9),相比传统噬斑抑制法一致性强(R2=0.76),免疫血清的ID50值较噬斑法平均高出2倍。建立的RSV中和活性检测方法,检测的抗RSV单抗中和活性与ATP活性试剂盒检测结果一致,Vero-fluc细胞法在1∶103~1∶105的抗体滴度水平上抑制率显著高于ATP法。结论建立的基于Vero-fluc细胞系的病毒中和活性检测方法与传统方法相比,具有良好的相关性,结果可靠,且具有更高的灵敏度及检测通量,是一种通用型体外抗病毒中和活性评价方法。
- 丁如霞李晓玉赵晨燕刘强姚佳维黄维金王佑春
- 关键词:萤火虫荧光素酶VERO细胞抗病毒活性中和活性
- 一种抗猪δ冠状病毒中和活性纳米抗体及应用
- 本发明提供了一种抗猪δ冠状病毒中和活性纳米抗体及其应用。本发明利用噬菌体展示技术构建了PDCoV S蛋白的纳米文库,并筛选获得了可与PDCoV以及S蛋白具有高度亲和力的特异性纳米抗体Nb1、Nb3或Nb8。进一步地以Nb...
- 刘新生 于瑞明 张莉萍张中旺潘丽王永录郭慧琛
- 抗非洲猪瘟病毒P72蛋白中和活性单克隆抗体5A8及其应用
- 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种抗非洲猪瘟病毒(ASFV)P72蛋白中和活性抗体及其应用。本发明利用杂交瘤细胞融合技术,成功获得一株特异性针对ASFV P72蛋白的中和活性单克隆抗体5A8,在体外具有阻止ASFV感染...
- 王琦 曹丽艳郑海学 万颖 孔祥雨 张宇 孙茂文 段月月 袁聪 李想通
- 抗非洲猪瘟病毒P72蛋白中和活性单克隆抗体3F1及其应用
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- 王琦 曹丽艳郑海学 孔祥雨 万颖 张宇 孙茂文 段月月 袁聪
- 抗非洲猪瘟病毒P72蛋白中和活性单克隆抗体2C9及其应用
- 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种抗非洲猪瘟病毒(ASFV)P72蛋白中和活性抗体2C9及其应用。本发明利用杂交瘤细胞融合技术,成功获得一株特异性针对ASFV P72蛋白的中和活性单克隆抗体2C9,2C9是一株构象依赖...
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